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1、作物遗传育种专业优秀论文作物遗传育种专业优秀论文 葡萄糖氧化酶基因对水稻的遗传转化葡萄糖氧化酶基因对水稻的遗传转化及表达分析及表达分析关键词：葡萄糖氧化酶基因关键词：葡萄糖氧化酶基因 水稻水稻 载体构建载体构建 遗传转化遗传转化 基因表达基因表达摘要：葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GO）能氧化葡萄糖产生过氧化氢，过 氧化氢不仅对病原菌具有直接杀伤作用，而且可作为信号分子激活植物一系列 防卫基因的表达，使植物产生系统获得性抗性。研究还发现，在不亲和的植物 一病原互作中氧化激增产生的过氧化氢不仅可作为区域信号导致细胞死亡，而 且还可以作为扩散信号诱导周围未侵染细胞中防卫基因如谷胱甘
2、肽 S 转移酶基 因的表达。 本研究将葡萄糖氧化酶基因插入具有除草剂选择标记的 pCambia3301 中，构建了 Ubiquitin 启动子驱动的带有 bar 基因选择标记的植 物高效表达载体 pUBGO，将此质粒导入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens） EHA105 中，利用农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花 11 号成熟胚来源的愈伤 组织，并由筛选出的抗 Basta 的抗性愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因 植株进行聚合酶链式反应和叶片喷涂除草剂 Basta 鉴定，表明 GO 基因已经整合 到受体基因组中。利用淀粉-KI 染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化
3、氢（Hydrogen peroxide，H2O2） ，证明 GO 基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在 水稻中发挥功能。对所得的转基因植株进行抗氧化酶 SOD、POD 和 APX 活性测定， 也表明 GO 基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于过氧化氢诱导的植物防卫反 应没有种属专一性，因此，转基因植株将会对多种病原菌产生抗性。 在本项 研究的载体构建中选用 bar 基因为选择标记，便于转基因植株的田间筛选以及 将 GO 基因通过有性杂交的方法转育到其它水稻品种。正文内容正文内容葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GO）能氧化葡萄糖产生过氧化氢，过氧 化氢不仅对病原菌具有直接杀伤作用，而且
4、可作为信号分子激活植物一系列防 卫基因的表达，使植物产生系统获得性抗性。研究还发现，在不亲和的植物一 病原互作中氧化激增产生的过氧化氢不仅可作为区域信号导致细胞死亡，而且 还可以作为扩散信号诱导周围未侵染细胞中防卫基因如谷胱甘肽 S 转移酶基因 的表达。 本研究将葡萄糖氧化酶基因插入具有除草剂选择标记的 pCambia3301 中，构建了 Ubiquitin 启动子驱动的带有 bar 基因选择标记的植 物高效表达载体 pUBGO，将此质粒导入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens） EHA105 中，利用农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花 11 号成熟胚来源的愈伤 组织，并由
5、筛选出的抗 Basta 的抗性愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因 植株进行聚合酶链式反应和叶片喷涂除草剂 Basta 鉴定，表明 GO 基因已经整合 到受体基因组中。利用淀粉-KI 染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化 氢（Hydrogen peroxide，H2O2） ，证明 GO 基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在 水稻中发挥功能。对所得的转基因植株进行抗氧化酶 SOD、POD 和 APX 活性测定， 也表明 GO 基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于过氧化氢诱导的植物防卫反 应没有种属专一性，因此，转基因植株将会对多种病原菌产生抗性。 在本项 研究的载体构建中选用 bar 基因为选择
6、标记，便于转基因植株的田间筛选以及 将 GO 基因通过有性杂交的方法转育到其它水稻品种。 葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GO）能氧化葡萄糖产生过氧化氢，过氧化氢 不仅对病原菌具有直接杀伤作用，而且可作为信号分子激活植物一系列防卫基 因的表达，使植物产生系统获得性抗性。研究还发现，在不亲和的植物一病原 互作中氧化激增产生的过氧化氢不仅可作为区域信号导致细胞死亡，而且还可 以作为扩散信号诱导周围未侵染细胞中防卫基因如谷胱甘肽 S 转移酶基因的表 达。 本研究将葡萄糖氧化酶基因插入具有除草剂选择标记的 pCambia3301 中， 构建了 Ubiquitin 启动子驱动的带有 bar
7、 基因选择标记的植物高效表达载体 pUBGO，将此质粒导入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105 中，利用 农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花 11 号成熟胚来源的愈伤组织，并由筛选出 的抗 Basta 的抗性愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因植株进行聚合酶链 式反应和叶片喷涂除草剂 Basta 鉴定，表明 GO 基因已经整合到受体基因组中。 利用淀粉-KI 染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化氢（Hydrogen peroxide，H2O2） ，证明 GO 基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在水稻中发挥功 能。对所得的转基因植株进行抗氧化酶 SOD、POD
8、和 APX 活性测定，也表明 GO 基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于过氧化氢诱导的植物防卫反应没有种 属专一性，因此，转基因植株将会对多种病原菌产生抗性。 在本项研究的载 体构建中选用 bar 基因为选择标记，便于转基因植株的田间筛选以及将 GO 基因 通过有性杂交的方法转育到其它水稻品种。 葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GO）能氧化葡萄糖产生过氧化氢，过氧化氢 不仅对病原菌具有直接杀伤作用，而且可作为信号分子激活植物一系列防卫基 因的表达，使植物产生系统获得性抗性。研究还发现，在不亲和的植物一病原 互作中氧化激增产生的过氧化氢不仅可作为区域信号导致细胞死亡，而且还可 以作
9、为扩散信号诱导周围未侵染细胞中防卫基因如谷胱甘肽 S 转移酶基因的表 达。 本研究将葡萄糖氧化酶基因插入具有除草剂选择标记的 pCambia3301 中，构建了 Ubiquitin 启动子驱动的带有 bar 基因选择标记的植物高效表达载体 pUBGO，将此质粒导入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105 中，利用 农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花 11 号成熟胚来源的愈伤组织，并由筛选出 的抗 Basta 的抗性愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因植株进行聚合酶链 式反应和叶片喷涂除草剂 Basta 鉴定，表明 GO 基因已经整合到受体基因组中。 利用淀粉-KI
10、 染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化氢（Hydrogen peroxide，H2O2） ，证明 GO 基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在水稻中发挥功 能。对所得的转基因植株进行抗氧化酶 SOD、POD 和 APX 活性测定，也表明 GO 基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于过氧化氢诱导的植物防卫反应没有种 属专一性，因此，转基因植株将会对多种病原菌产生抗性。 在本项研究的载 体构建中选用 bar 基因为选择标记，便于转基因植株的田间筛选以及将 GO 基因 通过有性杂交的方法转育到其它水稻品种。 葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GO）能氧化葡萄糖产生过氧化氢，过氧化氢 不仅对病
11、原菌具有直接杀伤作用，而且可作为信号分子激活植物一系列防卫基 因的表达，使植物产生系统获得性抗性。研究还发现，在不亲和的植物一病原 互作中氧化激增产生的过氧化氢不仅可作为区域信号导致细胞死亡，而且还可 以作为扩散信号诱导周围未侵染细胞中防卫基因如谷胱甘肽 S 转移酶基因的表 达。 本研究将葡萄糖氧化酶基因插入具有除草剂选择标记的 pCambia3301 中， 构建了 Ubiquitin 启动子驱动的带有 bar 基因选择标记的植物高效表达载体 pUBGO，将此质粒导入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105 中，利用 农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花 11 号成
12、熟胚来源的愈伤组织，并由筛选出 的抗 Basta 的抗性愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因植株进行聚合酶链 式反应和叶片喷涂除草剂 Basta 鉴定，表明 GO 基因已经整合到受体基因组中。 利用淀粉-KI 染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化氢（Hydrogen peroxide，H2O2） ，证明 GO 基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在水稻中发挥功 能。对所得的转基因植株进行抗氧化酶 SOD、POD 和 APX 活性测定，也表明 GO 基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于过氧化氢诱导的植物防卫反应没有种 属专一性，因此，转基因植株将会对多种病原菌产生抗性。 在本项研究的载 体构建中选
13、用 bar 基因为选择标记，便于转基因植株的田间筛选以及将 GO 基因 通过有性杂交的方法转育到其它水稻品种。 葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GO）能氧化葡萄糖产生过氧化氢，过氧化氢 不仅对病原菌具有直接杀伤作用，而且可作为信号分子激活植物一系列防卫基 因的表达，使植物产生系统获得性抗性。研究还发现，在不亲和的植物一病原 互作中氧化激增产生的过氧化氢不仅可作为区域信号导致细胞死亡，而且还可 以作为扩散信号诱导周围未侵染细胞中防卫基因如谷胱甘肽 S 转移酶基因的表 达。 本研究将葡萄糖氧化酶基因插入具有除草剂选择标记的 pCambia3301 中， 构建了 Ubiquitin 启
14、动子驱动的带有 bar 基因选择标记的植物高效表达载体 pUBGO，将此质粒导入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105 中，利用 农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花 11 号成熟胚来源的愈伤组织，并由筛选出 的抗 Basta 的抗性愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因植株进行聚合酶链 式反应和叶片喷涂除草剂 Basta 鉴定，表明 GO 基因已经整合到受体基因组中。 利用淀粉-KI 染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化氢（Hydrogen peroxide，H2O2） ，证明 GO 基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在水稻中发挥功 能。对所得的转基因植株进行抗氧
15、化酶 SOD、POD 和 APX 活性测定，也表明 GO基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于过氧化氢诱导的植物防卫反应没有种 属专一性，因此，转基因植株将会对多种病原菌产生抗性。 在本项研究的载 体构建中选用 bar 基因为选择标记，便于转基因植株的田间筛选以及将 GO 基因 通过有性杂交的方法转育到其它水稻品种。 葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GO）能氧化葡萄糖产生过氧化氢，过氧化氢 不仅对病原菌具有直接杀伤作用，而且可作为信号分子激活植物一系列防卫基 因的表达，使植物产生系统获得性抗性。研究还发现，在不亲和的植物一病原 互作中氧化激增产生的过氧化氢不仅可作为区域信号导致细胞
16、死亡，而且还可 以作为扩散信号诱导周围未侵染细胞中防卫基因如谷胱甘肽 S 转移酶基因的表 达。 本研究将葡萄糖氧化酶基因插入具有除草剂选择标记的 pCambia3301 中， 构建了 Ubiquitin 启动子驱动的带有 bar 基因选择标记的植物高效表达载体 pUBGO，将此质粒导入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105 中，利用 农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花 11 号成熟胚来源的愈伤组织，并由筛选出 的抗 Basta 的抗性愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因植株进行聚合酶链 式反应和叶片喷涂除草剂 Basta 鉴定，表明 GO 基因已经整合到受体基因组中。 利用淀粉-KI 染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化氢（Hydrogen peroxide，H2O2） ，证明 GO 基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在水稻中发挥功 能。对所得的转基因植株进行抗氧化酶 SOD、POD 和 APX 活性测定，也表明 GO 基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于过氧化氢诱导的植物防卫反
