《外固定架结合低频脉冲电刺激仪促进骨折愈合的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《外固定架结合低频脉冲电刺激仪促进骨折愈合的实验研究（78页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中国人民解放军军医进修学院博士学位论文外固定架结合低频脉冲电刺激仪促进骨折愈合的实验研究姓名：王占朝申请学位级别：博士专业：外科学骨科指导教师：侯树勋20050530军医进修掌豌博士掌位论文中文棚r 要外固定架结合低频脉冲电刺激仪促进骨折愈合的实验研究摘要目的：将临床常用的外固定架与低频脉冲电刺激骨愈合仪相结合来促进骨折愈合，尝试应用动物实验的方法，从细胞、分子水平来研究其机理和证实其有效性，为临床的广泛应用奠定峰实的理论基础。方法：本课题分两次分别制备标准兔胫骨骨折模型9 0 只，每次均随机平均分成三组( 每组3 0 只) ，第一组：绝缘材料组：人为造成兔胫骨骨折后，用单臂外固定架固定，其螺
2、纹钉采用绝缘材料( 聚四氟乙烯) 包埋后只外露部分螺纹和尾端少许，螺纹钉与连杆之间再以橡皮筋绝缘，于骨折线两侧临近的螺纹钉上连接脉冲直流电骨愈合治疗仪的两电极，脉冲电刺激骨愈合治疗仪放置于饲养笼外。第二组：非绝缘材料组：螺纹钉未用绝缘材料包埋，其余皆和第一组相同。第三组：不通电对照组：用普通单臂外固定架固定且不通电作为对照。术后一天，切口干燥即开始通电治疗，每天持续通电刺激6 小时，通电期间于笼中自由活动。术后2 、4 、6 、8 周麻醉F 摄取右胫骨正侧位片，观察骨痂生长情况；术后l 天和I 、2 、4 、6 、8 周麻醉F 通过激光多普勒血流灌流监测仪观察局部微循环动态变化；术后1 4 、
3、2 1 、2 8 、4 2 、5 6 天分批处死动物，每组各6 只，取出完整胫骨干后，清除软组织，纱布包裹，生理盐水浸透，双层塑料袋封存于4 。C 冰箱内。检测时标本解冻后置于生理盐水中3 0 m i n ，通过万能材料实验机测量骨痂的弯曲刚度、扭转刚度和破坏扭矩：术后3 、7 、1 4 、2 1 、2 8 、4 2 天耳缘静脉注射空气处死动物，每组每时间点处死5 只，以骨折端为中心，切取1 c m 长标本，单面刀片将骨标本分割成0 5 c m X 0 2 c r u X 0 2 c m 小块，生理盐水冲沈干净，立即置入4 多聚甲醛中固定1 2 小时。然后脱钙、包埋、制成石蜡切片，利用免疫组织
4、化学方法在蛋白质水平上检测骨痂中T G F Bl 、B M P 2 、b F G F 、V E G F 的表达和分布，利用原位杂交方法在n l R N A 水平上检测骨痂中T G F 1 31m R N A 、B M P ，m R N A 、b F G Fm R N A 、V E G Fm R N A 的表达和分布。结果：1 x 线观察：骨折早期( 2 周内) 三组X 线观察无明显差别，造模后4 周开始，无论从骨军医进修掌院博士学位论文中文搁r 要痂的数量上，还是质量上，三组之间丌始有明显差别，具体为绝缘材料组 非绝缘材料组 4 i 通电对照组。2 骨折局部微循环变化：术后1 d 时i 组骨折
5、局部血流量较正常值显著下降( F = 8 6 6 ，P = 0 0 0 0 ) ；术后7 d 基本恢复到正常水平( p = 2 9 1 ，P = 0 0 7 6 ) 。1 4 d 时三组血流量均显著高于正常值，三组问血流量的排列顺序为：绝缘材料组 非绝缘材料组 不通电对照组，且相互问差异有显著性 0 0 5 ) ：2 1 d 时三组骨密度有明显够 ，但相互问仍无显著差异( p O 0 5 ) ；2 8 d 、4 2 d 时三绍眉密度进步升高，三组间有非常显著性差异( p 非绝缘材料组 不通电对照组，且相互间差异有显著性( P O 0 5 ) 。2 8 d 、4 2 d 、5 6 d 时三组扭转
6、刚度依次明显增强，三组间扭转钢度的排列顺序为：绝缘材料组 非绝缘材料组 不通电对照组，通电两组升高幅度大于不通电组，且有非常显著差异( P 0 0 5 ) ；术后2 8 d 三组标本骨痂的破坏扭矩明显增加，相互间有显著差异俨 非绝缘材料组 不通电对照组，且相互问有非常显著差异俨 非绝缘材料组 不通电组，且差异有统计学意义( p 非绝缘材料组 不通电组，相互问差异有统计学意义( p 非绝缘材料组 不通电组，相互间差异有统计学意义( 口 非绝缘材料组 不通电组，相互问差异显著，有统计学意义( p u n u s i n gi n s u l a n tg r o u p n o r m a lc
7、o n t r o l 。2 A tf i r s td a ya f t e ro p e r a t i o n ，t h el o c a lb l o o df l o wo ft h et h r e eg r o u p sw e r ea l lg r e a t l yd e c r e a s e d I tr e c o v e r e dt on o r m a ll e v e la ts e v e n t hd a ya f t e ro p e r a t i o n ，A t1 4 t hd a y , t h el o c a lb l o o df l o
8、wo ft w og r o u p sw h i c hw e r ec o n n e c t e dr e s p e c t i v e l yw i t hp u l s ee l e c t r i c a ls t i m u l a t o rW a sb o t hh i g h e rt h a nn o r m a lc o n t r o l ，a n dt h eb l o o df l o w o fu s i n gi n s u l a n tg r o u pw a sh i g h e rt h a nt h a to fu n u s i n gi n s
9、 u l a n tg r o u p ( P 0 0 5 ) 3 A t1 4 t hd a ya f t e ro p e r a t i o n , t h eB M Do f b o n e so f t h r e eg r o u p sW a s j u s t1 0 o ft h en o r m a ll e v e la n dt h e r eW a sn os t a t i s t i c a ld i f f e r e n c ea m o n gt h r e eg r o u p s f P O 0 5 ) T h eB M Do fb o n e so ft
10、 h r e eg r o u p sw a si n c r e a s e dg r e a t l ya t2 1 t ha n d2 8 t hd a y T h eB M Do fb o n e so fu s i n gi n s u l a n tg r o u pW a sh i g h e rt h a nt h a to ft h er e s tt w og r o u p s ( P O 0 5 ) 4 ( 1 ) A t1 4 t hd a ya f t e ro p e r a t i o n ，t h eb e n d i n gs t i f f n e s s
11、o f b o n e so f t h r e eg r o u p sw a sj u s t3 o ft h en o r m a ll e v e l ，t h e r eW a sn os t a t i s t i c a ld i f f e r e n c ea m o n gt h r e eV I军医进修掌霸啊士掌位论文英文摘要g r o u p s ( P O 0 5 ) T h eb e n d i n gs t i f f n e s so fb o n e so ft h r e eg r o u p sW a Si n c r e a s e da t21 t h
12、d a y , n e i t h e rs t a t i s t i c a ld i f f e r e n c ee x i s t e da m o n gt h r e eg r o u p s ( P 0 0 5 ) A t2 8 t ha n d4 2 t hd a y , t h eb e n d i n gs t i f f n e s so fb o n e so ft h r e eg r o u p sw a si n c r e a s e dg r e a t l y ,a n dt h eb e n d i n gs t i f f n e s so fb o
13、n e so fu s i n gi n s u l a n tg r o u pW a sh i g h e rt h a nt h a to ft h er e s tt w og r o u p s 泸 0 0 5 ) ( 2 ) A t1 4 t ha n d2 1 t hd a ya f t e ro p e r a t i o n , t h et o r s i o n a ls t i f l S a e s so fb o n e so ft h r e eg r o u p sw a sv e r yl o w , t h e r ew a sn os t a t i s
14、t i c a ld i f f e r e n c ea m o n gt h e m f P 0 0 5 ) r h et o r s i o n a ls t i f f n e s so fb o n e so ft h r e eg r o u p sw a si n c r e a s e da t2 8 t hd a y , a n dt h et o r s i o n a ls t i f f n e s so fb o n e so fu s i n gi n s u l a n tg r o u pW a sh i g h e rt h a nt h a to ft h
15、er e s tt w og r o u p s ( P 1Xl m m 2 。测定骨折处l c m 区域骨矿密度。未手术侧标本在骨折相同部位扫描测量。重复3 次。测得骨痂的骨密度值及计算与对侧正常骨的骨密度比率。3 骨折端微循环测量【3 】选用P e r i m e dA B 公司( P e r i m e d A B 、S t o c k c h o l m 、S w e d e n ) 生产的P e r i f l u x4 0 0 1M a s t e r 激光多普勒血流灌流监测仪( L a s e rD o p p l e rP e r f u s i o nM o n i t o
16、r ) 。技术参数：激光二极管光源，1 州氦氮激光( H e N el a s e r ) ，波长7 8 0 r i o n 。光纤探头：P F 4 1 1 不锈钢探头，直径0 4 5 n E n 。一台计算机与激光多普勒P e r i f l u x4 0 0 1M a s t e r 相连，通过公司提供的专用软件程序P e r i s o f t进行操作，显示并记录波形，计算并储存血流量数据。血流量的数据直接显示于相连的微机中，用P e r i s o f t 存储数据，确定时间区段计算平均值。术后i 、7 、1 4 、2 1 、2 8 、4 2 、5 6 天，动物麻醉后，于胫骨内侧骨折处切开皮肤、皮下组织，将微循环仪光纤检测探头酒精擦拭后置于骨折端骨痂表面，选取5 点测量、记录血流量，取平均值。4 生物力学测试( 广州南方医大生物力学实验室进行)术后1 4 、2 1 、2 8 、4 2 、5 6 天分批处死动物，
