东海刺海参冻干粉抑瘤作用的研究

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1、山东人学硕士学位论文缩略语B c l 2I L 一2T N F 0 【C T XS l8 0E L I S Ab F G FP C N AV E G FD M B A符号说明英文全称中文译名B c e l ll y m p h o m al e u k e m i a 一2g e n eB 细胞淋巴瘤白血病2 基因i n t e r l e u k i n - - 2白介素2t u m o rn e c r o s i sf a c t o r a l p h a肿瘤坏死因子一ac y c l o p h o s p h a m i d eS 1 8 0s a r c o m a环磷酰胺小鼠肉

2、瘤1 8 0e n z y m e - l i n k e di m m u n o s o r b e n ta s s a y酶联免疫吸附试验b a s i cf i b r o b l a s tg r o w t hf a c t o r碱性成纤维细胞生长因子P r o l i f e r a t i n gc e l ln u c l e a ra n t i g e增殖细胞核抗原v a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o r血管内皮细胞生长因子7 ，1 2 d i m e t h y l b e n z ( a

3、) a n t h r a c e n二甲基苯蒽C a s P a s e - 3c y s t e i n eP r o t e i o a s半胱氨酸蛋白酶36原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：廛l 碉垒日期：出：碰关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子

4、版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。( 保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：国蠲盈翩签名绳过日期：幽墨n 汐山东人学硕1 ：学位论文东海刺海参冻干粉抑瘤作用的研究研究生：周湘盈导师：徐贵发教授中文摘要目的研究东海刺海参冻干粉对S 1 8 0 荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫功能的影响。同时研究了海参冻干粉对大鼠乳腺癌的抑制作用并探讨了其机理。方法1 健康昆明小鼠5 0 只，皮下接种S 1 8 0 肿瘤细胞，次同随机分成模型对照组，阳性对照组( 2 0 m g k g d ) ，

5、低、中、高三个剂量组( 0 4 9 k g b w ，O 8 9 k g b w ，1 6 9 k g b w ) ，连续给予受试物1 0 天后，观察瘤重、抑瘤率；瘤组织的病理改变，免疫组化法测定瘤组织中c a s p a s e 3 蛋白以及b a x 和b c l 2 的蛋白表达；脾指数、胸腺指数；利用E L I S A 法检测血清中I L 2 和T N F a 的含量。2 健康S D 大鼠8 0 只，随机分成2 大组，对照组2 0 只，海参组6 0 只。对照组又分为空白对照组1 0 只与模型对照组1 0 只( D M B A ) ，海参组分为D M B A致癌前喂饲海参冻干粉低、中、高剂

6、量组( O 5 9 k g b w 、1 0 9 k g b w 、2 0 9 k g b w )和D M B A 致癌后喂铡海参冻干粉低、中、高剂量组( 0 5 9 k g b w 、1 0 9 k g b w 、2 0 9 k g b w ) 。模型组与D M B A 致癌前喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组：先用海参冻干粉溶液灌胃2 周，再给予致癌剂D M B A ( 即从第3 周开始) ，再持续灌胃到2 4 周结束；D M B A 致癌后喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组：先给予致癌剂D M B A ( 即从第3 周开始) ，2 周之后再灌胃海参冻干粉溶液，持续灌胃到2 4周结束。观察各组大鼠

7、肿瘤的平均潜伏期、肿瘤诱发率，乳腺标本经光镜观察，免疫组化法测定V E G F 、b F G F 、P C N A 的蛋白表达。结果1 海参冻干粉对小鼠S 1 8 0 肉瘤的抑制作用：海参中、高剂量组与模型对照组比较瘤霞明显减小，体积明湿减小，抑瘤率显著增加，具有统计学意义( 尸 0 0 5 ) T h ec o n t e n t so fI L 一2 i nt h em i d d l e ，h i g hg r o u p sw e r em o r eh i g h e rt h a nm o d e lc o n t r o lg r o u p s ( 氏0 01 ) ，t h e

8、c o n t e n t so fI L - 2w e r es i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dc o m p a r e dw i t hp o s i t i v ec o n t r o lg r o u p( 尸 0 01 ) T h ec o n t e n t so fT N F - 仅i nt h eh i g hg r o u pw e r ei n c r e a s e dr e m a r k a b l yi nc o m p a r i s o nw i t ht h em o d e lc o n t r o lg

9、 r o u p ( 尸 0 0 5 ) ，w h i l et h ec o n t e n t so fT N F G ti nt h et r e a t e dg r o u p sw e r ed e c r e a s e ds i g n if i c a n t l yi nc o m p a r i s o nw i t ht h ep o s i t i v e4山东人学硕f ：学位论文c o n t r o lg r o u p ( P 0 0 1 ) 20 ) T h ei n c u b a t i o np e r i o do ft h et r e a t e

10、dg r o u pw e r ee x t e n d e dn o t a b l yt h a nt h em o d e lc o n t r o lg r o u p ( P O 0 1 ) ) T h ei n c i d e n c er a t e so fm o d e lc o n t r o lg r o u pa n dt h et r e a t e dg r o u pr e a c h e d7 0 ，6 0 ，6 0 ，4 0 ，6 0 ，6 0 ，5 0 r e s p e c t i v e l y T h eg r a ys c a l eo ft h e

11、m i d d l e ，h i g hg r o u p si n c r e a s e dh i 【g h l yt h a nt h em o d e lc o n t r o lg r o u p ，t h ee x p r e s s i o n so fV E G Fp r o t e i n sd e c r e a s e dr e m a r k a b l y ( P 0 O1 ) T h eg r a ys c a l eo fb F G Fs h o w e ds i g n i f i c a n td i f f e r e n tb e t w e e nt h

12、 em i d d l e ，h i g hg r o u p sa n dt h em o d e lc o n t r o lg r o u p ，w h i l et h ee x p r e s s i o n so fb F G Fw e r el o w e rt h a nt h em o d e lc o n t r o lg r o u p( P 0 01 ) ( 亘) C o m p a r e dw i t ht h em o d e lc o n t r o lg r o u p t h eg r a ys c a l ei n c r e a s e ds i g n

13、 i f i c a n t l y ，w h i l et h ee x p r e s s i o n so f b F G Fd e c r e a s e ds i g n i f i c a n t l y ( P 0 0 1 ) C o n c l u s i o n sF r e e z e d r i e ds e ac u c u m b e rp o w d e rc o u l db ee f f e c t i v ea n t i t u m o ra n dc o u l dp r o t e c ta n dr e c o v e r yt h ei m m u

14、n es y s t e mo fSI8 0 一b e a t i n gm i c e ，a sw e l la st h ef r e e z e d r i e ds e ac u c u m b e rc a ni n h i b i tt h eg r o w t ho fm a m m a r yc a n c e ri nr a t k e yw o r d ss e ac u c u m b e r ；S18 0 一b e a r i n gm i c e ；m a m m a r yc a n c e r ；i n c u b a t i o np e r i o d ；i

15、n c i d e n c ep e r i o d5山东大学硕I j 学位论文刖吾癌症正在成为全球疾病负担的一个日益重要的因素。世界卫生组织统计，目前有2 4 6 0 万癌症患者；到2 0 2 0 年，估计将达到3 0 0 0 万。到2 0 2 0 年，癌症每年可造成1 0 0 0 多万人死亡。如果这一趋势继续，每年新病例的估计数预期将从2 0 0 2年1 0 9 0 万增加至2 0 2 0 年1 6 0 0 万。这些病例的约6 0 将发生在世界较不发达地区。每年几乎有7 0 0 万人死于癌症。肿瘤发生过程是多阶段的，包括启动、促进和演变三个阶段。启动足肿瘤发生的第一阶段，启动因子作用于靶细

16、胞，在短时间内引起单个靶细胞遗传物质的改变，经细胞分裂后，这种改变即被固定，成为永久性不可逆的改变。促进是肿瘤形成过程的第二阶段，在内源性因子或外源性促癌因子的作用下，经启动的细胞发生克隆性增生，并伴随细胞表型的改变，形成可用各种方法检出的病灶，这些病灶是可逆的，当去除促癌因子后，启动细胞的增生可消退，表型的改变也可恢复。演进是肿瘤发生的最后阶段，在演进因子或完全促癌因子的作用下，癌前状态的细胞其遗传基囚再次发生不可逆改变，并获得一些新的，物学特性，如细胞染色体核型向异倍体转变，具有相对自主生长能力等。目前对于癌症的治疗方法主要包括三种，即手术治疗、化学药物治疗和放射治疗。这三种治疗各有利弊，现在科学家都在探寻疗效高且副作用低的药物，最近研究比较多的是从分子水平上去探讨。细胞凋亡与肿瘤的发生和恶化非常密切，本文选择了细胞因子I L 2 和T N F a ，基冈b c l 一2 和b a x ，