生后早期经验、活动改变大鼠听皮层NMDA受体NR2B亚单位蛋白表达

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1、生后早期经验、活动改变大鼠听皮层谨D A 受体N R 2 B 亚单位蛋翻表达吴秀梅 生莲学听觉神经生物学 孙。0 德教授摘要,、出生后早期听觉剥夺、活动对大薪听皮层N 佃A 受体N R 2 B 蛋白表达的双怒调节应用w e s t e r nb 1 。t t i n g 检测技术,研究生后早期听觉剥夺、经验对大鼠听皮层K 潞A 受薅X R 2 B 蛋自表达懿澎响。缭暴表鞠,褥觉鞴夺菠生焉 4 天菸和2 8天龄动物听皮层N R 2 B 蛋白表达水平明恩下降( P O 0 5 ) 。结果提示,大鼠生后听觉发育关键期,听觉剥夺、经验可改变瞬皮层N M D A 受体N R 2 B 蛋自表达零平。研究结

2、果为磺究感觉功能发弯可塑性鲍槛制提供重要实验资料。二、生后早期听觉经验对大鼠听皮层N M D A 受体N R 2 B 巫单位礞白表达模式的影晌应用w e s t e mb l o t t i 峨和免痰组织化学技术,分别在生后1 4 、2 8 和4 2 天龄大鼠上研究生后早期经验、活动对昕皮滕N M D A 受体N R 2 B 亚单位蛋白表达模式的影喻。实验分为听觉剥夺组、缝音暴露组和听觉剥夺+ 纯音暴露组。结暴表明,听激剥夺组动物N R 2 B 蛋白表达较对照组下降,其中1 4 天龄组动物下降幅I I I生监向磐方究究研专研导发最为掰显,蛋白表达鬣显著降低( p O O 嚣T h e 辖s 瑾

3、t si n d i c 越e 蘸t h 矗t ,妇i n g 攮ec d t i 蹦婶i o do f 戤p o s t I l a t a la u d i t o r yd e v e l o p m e m ,a u d i t o r yd 印r i V a t i o na I l de x p e r i e n c ec a na l t e r 也ep r o t e me X p r e s s i o nl e v e lo fN M 王) Ar e e 锣l o rS u b 删tN R 2 B 强e 蠡n d 趣g so f 出i se x p e r i m e n

4、 tp m v i d e di m p o r t a n td a t at om es m d yo ft h em e c h a n i s m sf o rt h ed e v e l o p f n e n t a lp l a s t i c i t yo fs e n s o f yf 妇c t i o n s 。2 E f 耗c t so fe a r l ya l l d i t o l 了e x p e r i e n c et ot h ed e V e l o p m e n t a le x p r e s s i o no f N M D Ar e c e p

5、t o rs u b u n “N R 2 Bp r o t e i ni nt h er a ta u d i t o r yc o r t e xA u d i o I yd e p r i V 娃 o n ,p u f e t o n ee x p o s u r e 鞠da u d 呈t o 翠d e p 娥V a t o 建+ t o n ee x p O s 黜w e r ee m p l o y e do nd i f f 色r e n tg r o u p so fr a ts o p a r a t e l ya te a r l yp o s 协a t a ld a y s

6、 ( p N D ) :P N D1 4 ,P N D2 8a n dp N D4 2 W e s t e mb l o 砸n ga 】_ l di m m u n o h i s t o 巍e m i s 枉yw e r eu s e dt od e t e c t 也eN M D Ar e c e p t o rs u b u n i tN R 2 Bp r o t e h 遗a l l d i t o f yG o r t e x 协a n a l y z et h ee 虢c to f t h et 】_ l r e ef b r m so f a u d i t o r ye x p

7、 e r i e n c e st o 廿l er o l a t i v ee x p r e s s i o n1 e v e lo fN R 2 Bp r o t e i n 弧er 。s u l t ss b o w e dt h 斑a 最e rt o n eo x p o s u r 。,t h e 吲矗t I v ee x p 掩s s i o nV1 e v e lo f N R 2 Bp r o t e i ns t i l lm a i n t a i n e dt h es a m ee x p r e s s i o nm o d e lo fa g e d e p e

8、d e n t硼w 嚣dm o 氐l 蕊黼e x p r 。s s i o na s 蛙搀e 锶粕l 赋s 强。r e l 蕊v e 。x p 辖s s i o nl e V e lo fN R 2 Bp r o t e i 工ld r o p p e dn o t a b l ya n e ra u d i t o r yd e p r i V a t i o n ,o s p e c i a l l yt h e 群o u po fP N D14 ,a n di t sr e l a t i v ee x p r e s s i o n1 e v e lo f N R 2 Bp r o t

9、 e i ni se v e nl e s sm a nm er a t so fP N 观8 髓鑫P 烈D 4 2 。两娃ce x p s u 羚e 强畦黼蠢e a l l yp r o 擞o t e d 氆e 鞭R 2 Bp r o t c 遗e x p r e s s i o n ,m a k i n gi ts h o wt h es i m i l a re x p r e s s i o nm o d e la st h en o m l a Ic o n t r o l r a t s I ti n d i c a t e dt h a td i 舒釜r e ms e n s e

10、o fe x p e r i e n c ea n da c t i V i t yb r o u g h to nd i f 免r e n ti n n u e n c e幻氆e 辩l a 垃v 。e X p 辖s s 呈。建l e V e lo f N 秘D A 瓣e e p t 。rs 珏玟邋至童N 怼Bp 赋e 遗遮a 毽蓬t 。翠c o n e x ,a r l dc a 工T y i n go nt h es 锄ef o r mo fe x p e r i e n c oo ra c t i v 姆a td i f f e r e n tt j m ea l s o1 e a d

11、e dt o 西自e r e H te 任宅c t a n dm a ta n i m a l sw e r em o r es e n s i t i v et ot h ee n v i r o n m e n ta n da e t i v i 锣氐建毅gt 囊ec r t 至e a lp e 娃o d 。f h i s 啦d yp D V i d e 矗藏l o r od 鑫专al ot 董l er o s e a K 珏o na 【u d “o I yd e V e l o p m e n t a lp l a s t i c i t yV I学位论文独餐注声明本人所堇交曲学位论文是

12、我在导舜的指导下进行晌研究工作及蔽褥酶研究戚暴。据我爱知,狳文申已经注臻导| 矮戆蠢容鳋,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均芒J 在文中作了明确说明并表示谢意。作者签名:墨! 煎毯巅:型:尘:学位论文授权使用声明本人完全了解华东师范大学有关保馨、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文送入学校蹬书馆搜查阕。番权将学位论文麓走容编入有关数据库遘圣亍检索。有权将学位论文的标题和撼要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文络者签名:寮

13、拍导簿签名沪彖S 二秘期:哥f ,扩日期:龟! ! :蒸二垡华东师范大学2 0 0 3 级硕士论文第一章生后早期听觉剥夺、活动对大鼠听皮艨N M D A 受体N 黻B 蛋白表达赡双怒调节瓣要应用w i 船mb l o 蜓挂窑捡溪l 技术,霹究晕麓听焚裂夺、经验对大藏舔皮瑟N M D A 受体N R 2 B 蛋白表达的影响。结果表明,听擞剥夺使生后1 4 天龄组和2 8 天龄缢动物褥皮茁强毪B 餐自表达永平疆程下降( 尹 疆嬲) 。络果提示,在大鼠生后发弯关键期,听觉剥夺、经验可改变听皮层N M D A 受体N I 也B 鬣白表达水平。研究结果为研究感觉功能发育可塑性的援铡提供了重要实验资鹳。关

14、键翊大鼠听菠瑟N 怼B 断觉裂夺听觉经验W e s t e m 毯。谯i n g萎离子型G 1 uN M D A 受体在中枢神经系统教育可塑性中起熏要作用,特别是N R 2 B 蹶单位的作用售受关注( F e l d m e y e r D ,1 9 9 6 ;隐g Y P ,1 9 9 9 ) 。对穰皮层的疆究表明,在动物生后发育“关键期”( c r i t i c a lp e r i o d ) ,m A 受体弧单位里年龄一依鼓性表达,著受程觉经验双霆+ 装调节,星理动力学交化过程( Q n 娃a n 嚣M ,1 9 9 9 :c h e n L ,1 9 9 9 ) 。推测N M D

15、A 受体强单位表达变化过程可能与经验一依赖性突艇可熬性静梳裁有关。本实验蹇以往对太鼓听疫层磷究也表鞠,N 辩D A 受体N R 2 B亚单位m R N A 和蛋白质均呈年龄一依赖性表达模式( c h e nL ,2 0 0 0 :崔一蕾,2 0 0 2 ) 。本文暾用w e s t e r nb l o t t i n g 技术,避一步考察大鼠生后发育早期,听觉剥夺和经验对听皮层N R 2 B 瑟白表达的影响,为深入研究脑功能发育可塑性螅机制提供实验依据。华东师范天学2 0 0 3 缎坝士论文材料和方法1 实验动物实验在6 0 只S D 大鼠上进行,购自复旦大学实验动物中心,清洁缓,枣零实验室

16、溺莽繁麓,妨菠蹋予本实验。动物分旁瞬觉剥夺( a u d i t o r yd 印r i v a t i 。n ,A D ) 组、听觉剥夺+ 声音暴露( a u d i t o r yd e p r i v a t i o na n dt 。n ee x p o s n r o ,A D 十豫) 组帮对照( c o n 疆o l ,C o n ) 缀,每缀2 0 只。2 。昕觉剥夺和声音黎露孵堂剥夺分别在动物絮质1 4 天( P 1 4 ) 、2 8 天( P N D2 8 ) 张2 天( p N B4 2 ) ,应用人用泡沫隔音耳塞( M a x 一1 型,美国H o w a r d 公司) 堵塞双侧外耳邋,实憨瞬觉剥夺。先搀滤沫隔鸯耳塞剪戏适台大藏羚耳遂大参黪镬状,蜷塞乡 骂遂,并用医用橡皮膏封固,以防脱落。堵察前,所有动物都要做耳廓反射检查。动物矫耳辩、隔瞽耳塞等徽鬻筑消毒,戳笳感染。处瑾好的动耪正常饲莽分瘸至垒后2 8 天( P N D2 8 ) 、4 2 天( P N D4 2 ) 和5 6 天(

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