《复合生物添加剂对烟草陈化过程中有机酸和游离氨基酸含量影响分析研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《复合生物添加剂对烟草陈化过程中有机酸和游离氨基酸含量影响分析研究（58页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、摘要烟草有机酸和氨基酸的种类及含量的变化对烟草陈化的品质有着重要的影响。实验在此研究过程中，分别建立了烟草中有机酸和游离氨基酸的高效液相色谱分析方法，方法重现性好，准确度高。实验比较了复合生物添加剂对不同部位、不同陈化时间烟叶中有机酸和氨基酸含量的影响。论文主要工作归纳如下：1 建立了超声提取、固相萃取( S P E ) 纯化、反相高效液相色谱法分离检测陈化烟叶中的1 0 种低分子量有机酸的含量。梯度流动相为p H2 6 的2 0 m M 磷酸盐缓冲液和乙腈一超纯水( 3 ：2 ，v v ) ，流速为l m L m i n ；色谱柱为S i n n o e h r o m O D S色谱柱，紫
2、外检测波长为2 1 0 n m 。有机酸在1 6 r a i n 内全部出峰，有机酸浓度与峰面积呈良好的线性关系，相关系数都大于0 9 9 ，检测限O 0 0 1 1 4 1 9m M ，回收率为8 4 2 1 0 6 3 ，保留时间的R S D 大于2 5 ，峰面积的R S D 在O 4 2 1 7 8 。结果表明：丙酸在所有烟样中都未检测到，在陈化的过程中，不同部位烟样有机酸的含量有所增加：中部和上部烟样处理增幅高于对照，效果好于下部烟样。2 研究了用离子交换萃取，反相高效液相色谱法测定烟草中游离氨基酸的方法。烟草中的1 7 种氨基酸用A Q C ( 6 一氨基喹啉基_ N 一羟基琥珀酰亚
3、氨基甲酸酯)柱前衍生，色谱柱为W a t e r s 的A Q C T a g “C 1 8 氨基酸专用柱，梯度流动相为醋酸盐缓冲溶液和乙腈一水( 6 ：4 ，v v ) ，紫外检测波长2 4 8 n m ，柱温3 5 。C 流速1 0 m L m i n 。氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系，相关系数都大于O 9 9 ，回收率8 3 3 1 1 2 2 ，日内和日问相对标准偏差分别低于2 4 8 和5 ，1 7 。结果表明：在陈化的过程中氨基酸的含量降低；中部烟样的氨基酸总量高于上部烟样，下部烟样氨基酸的含量最低；经处理过的上部烟样陈化一年后其氨基酸总量略高于对照，中部烟样增幅不明显，下部烟
4、样低于对照。陈化二年后，上部烟样氨基酸总量仍有增加，而中下部烟样氨基酸的含量低于对照。A b s t r a c tT h ev a r i e t i e sa n dt h ec h a n g e si nt h ec o n t e n t so fo r g a n i ca c i d sa n df r e ea m i n oa c i d ss t r o n g l ya f f e c tt h eq u a l i t yo ft o b a c c o I nt h ec o u r s eo fr e s e a r c ht h em e t h o df o r
5、a n a l y z i n go r g a n i ca c i d sa n df r e ea m i n oa c i d so ft o b a c c ou s i n gH P L Cw a se s t a b l i s h e da n dp r o v i d ee x c e l l e n tr e p r o d u c i b i l i t ya n da c c u r a c y T h ee x p e r i m e n tc o m p a r e dt h ee f f e c t so fc o m p o u n db i o a d d i
6、 t i v eo nt h ec o n t e n t so fo r g a n i ca c i d sa n df l e ea m i n oa c i d si nt o b a c c ol e a v e sf r o md i f f e r e n tp o s i t i o na n dd i f f e r e n ta g e i n gt i m e T h es u l n n a r i z a t i o no ft h i sd i s s e r t a t i o ni Sa sf o l l o w s ：I ，Ar e v e r s e d p
7、 h a s el i q u i dc h r o m a t o g r a p h ys e p a r a t i o nm e t h o dw i t hu l t r a s o n i ce x t r a c t i o na n ds o l i d - p h a s ee x t r a c t i o nh a sb e e nd e v e l o p e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fo r g a n i ca c i d si na g i n gt o b a c c o T h eg r a d i e n
8、tm o b i l ep h a s ee m p l o y e dw a s2 0 m Mp h o s p h a t eb u f f e r ( p H 2 2 6 ) a n da e e t o n i t f i l e w a t e r ( 3 ：2 ，v v ) a taf l o w r a t eo f1 O m L m i n T h ec h r o m a t o g r a p h i cs e p a r a t i o nw a sp e r f o r m e do nS i n o C h r o mO D Sc o l u m na n dd e
9、t e c t e da t2 1 0 n m O r g a n i ca c i d sw e r ee l u t e di nl e s st h a n1 6m i n T h em e t h o ds h o w e dg o o dl i n e a r i t yb e t w e e nc o n c e n t r a t i o n sa n dp e a ka r e a sw i t ha ne x c e l l e n tl i n e a r i t y ( c a l i b r a t i o nc o e f f i c i e n t s O 9 9
10、7 ) L i m i t so fd e t e c t i o n ( L O D ) f o rt h e1 0a c i d sr a n g e df r o mO 0 0 1t O1 4 1 9 r a ma n dr e c o v e r i e sb e t w e e n8 4 2t o1 0 6 3 w e r ef o u n d R e p r o d u c i b i l i t y ( R S D ) w a sb e t t e rt h a n2 5 f o rr e t e n t i o nt i m e sa n db e t w e e nO 4 2
11、a n d1 7 8 f o rp e a ka r e a s T h er e s u l t ss h o w e dt h a tp r o p i o n i ca c i dw a sn o td e t e c t e di na l lt o b a c c os a m p l e sa n do r g a n i ca c i dc o n c e n t r a t i o n si nd i f f e r e n tl e a fp o s i t i o ni n c r e a s e dw i t ha g i n gt i m e t h eu p p e
12、ra n dt h em i d d l el e a v e sb yt r e a t i n g ，h a v eh i g h e ri n c r e a s i n gd e g r e et h a nu n t r e a t e dl e a v e sa n dh a v eb e R e rt r e a t i n ge f f e c t st h a nl o w e r1 e a v e s 2 Am e t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o no ff r e ea m i n oa c i d si nt o b a
13、 c c ob yi o ne x c h a n g ee x t r a c t i o na n dr e v e r s e dp h a s eh i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h yw a ss t u d i e d ，S e v e n t e e nf r e ea m i n oa c i d si nt o b a c c ow e r ea n a l y z e d b yp r e c o l u m nd e r i v a t i z a t i o nw i t hA
14、Q C ( 6 - a m i n o q u i n o l y N h y d r o x y s u c c i n i m i d yc a r b a m a t e ) T h eW a t e r s A Q C T a g “C 1 8c o l u m n a c e t a t eb u f f e ra n da c e t o n i t r i l e w a t e r ( 6 ：4 ，v v ) w e r ep r e p a r e di ng r a d i e n te l u t i o n C o n d i t i o n so ft h ee x
15、p e r i m e n tw e r ew a v e l e n g t h2 4 8n m ，I Ic o l u m nt e m p e r a t u r e3 5 。Ca n df l o wr a t e1 0m L m i n C o n c e n t r a t i o no fe v e r ya m i n oa c i da n dp e a ka r e aa c h i e v e dal i n e a rr e l a t i o na n dc a l i b r a t i o nc o e f f i c i e n t si sh i g h e
16、rt h a nO 9 9 ) T h ea v e r a g er e c o v e r i e sw e r ef r o m8 3 3 t o1 1 2 2 T h er e l m i v es t a n d a r dd e v i m i o n so fi n t r a - d a ym a di n t e r - d a yw e r el e s st h a n2 4 8 a n d5 1 7 r e s p e c t i v e l y T h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h ea m i n oa c i dc o n t e n td e c r e a s e dw i t hp r o g r e s s i v ea g i n gt i m ea n dh a sh i g h e rc o n c e n
