单味中药金钱草、石韦、车前子对肾结石模型大鼠预防作用

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1、温州医学院硕士学位论文单昧中药金钱草、石韦、车前子预防肾结石的动物实验研究目的中文摘要中药用于治疗肾结石已有上千年的历史。各种中药验方曾在不同时期、不同地方广泛应用。目前已有少量关于中药治疗肾结石的现代研究,但中药组方复杂,难以明了每一味中药的确切疗效。本实验旨在观察单味中药金钱草、石韦、车前子分别对肾结石的预防作用以及对结石模型肾的保护作用。方法9 0 只大鼠随机分为5 组,采用1 2 5 乙二醇和1 氯化铵制备大鼠肾结石模型,造模同时用上述三种单味中药的免煎剂型分别按剂量给各实验组大鼠灌胃,阴性对照组给予生理盐水每只动物每天2 m l 灌胃,阳性对照组用枸橼酸钾,4 周后观察尿和肾组织中草

2、酸钙结晶的形成情况以及肾脏损伤情况两方面指标。用半定量法判定尿沉渣中草酸钙结晶排出情况和左肾草酸钙结晶形成情况,采用非参数检验( 秩和检验) 的M a n n - W h i t n e yU 检验;用计数法检测右肾草酸钙结晶形成情况,采用均数比较的t 一检验;对于成石率的比较,采用p e a r s o nC h i s q u a r e 检验;对于肾脏损伤情况指标( 左肾充血情况、左肾炎细胞浸润情况、左肾小管扩张情况) ,也因属于等级资料,采用非参数检验的M a n n W h i t n e yU 检验。结果1 、金钱草组、石韦组、车前子组大鼠尿中草酸钙结晶的排泄均明显多于模型组,而枸

3、橼酸钾组大鼠尿中草酸钙结晶的排泄与模型组相比未见显著差异。2 、单味中药金钱草组、石韦组、车前子组大鼠左、右侧肾内草酸钙结晶明2温州医学院硕士学位论文显少于模型组,而与西药枸橼酸钾组相当;模型组大鼠肾内结晶密集,易于形成结石;实验组大鼠肾内结晶松散,易从尿中排出,不易形成结石。3 、实验组成石率明显低于模型组。模型组成石率为7 7 8 ;金钱草组为4 1 2 ,P = O 0 2 7 3 0 H P 。2 、肾草酸钙结晶形成情况指标。( 1 ) 半定量法检测左肾草酸钙结晶。所有左侧肾由同一名病理科医生采用半定量法判定肾草酸钙结晶形成情况。判定标准:( 一) :高倍视野中未见草酸钙结晶;( +

4、) :肾皮质和髓质内结晶为主,约O 4 0 H P ;( 2 + ) :肾乳头和肾盂内结晶为主,约 4 0 H P 。( 2 ) 计数法检测右肾草酸钙结晶。量。由另一名病理科医生计数平均每个高倍视野内右肾草酸钙结晶数3 、肾脏损伤情况指标。( 1 ) 左肾充血情况;( 2 ) 左肾炎细胞浸润情况;( 3 ) 左肾小管扩张情况;所有左侧肾由同一名病理科医生按同一标准( 个人习惯标准) 采用半定量法判定肾脏充血、炎细胞浸润和肾小管扩张情况。( 五) 统计方法l O温州医学院硕士学位论文采用S P S S l1 5 统计软件包,对于右肾草酸钙结晶数量指标,因属于计量资料( 以颗粒为单位) ,采用均数

5、比较的t 检验;对于尿检和半定量法判定左肾草酸钙结晶情况,因属于等级资料,采用非参数检验( 秩和检验)的M a n n W h i t n e yU 检验;对于成石率的比较,采用p e a r s o nC h i s q u a r e 检验;对于肾脏损伤情况指标( 左肾充血情况、左肾炎细胞浸润情况、左肾小管扩张情况) ,也因属于等级资料,采用非参数检验( 秩和检验) 的M a n n W h i t n e yU 检验。温州医学院硕士学位论文结果( 一)实验动物数量饲养给药过程中,B 组和D 组各有1 只大鼠死亡,故取得实验数据的共有8 8 只大鼠。( - - )尿中草酸钙结晶( 见表2

6、)表2各组半定量法尿中草酸钙结晶检测情况由上表可见B 、C 、D 三组尿中草酸钙结晶排泄明显高于A 组( 阴性对照组) ,P b - a = O 0 0 4 ( 0 0 5 ;P c a = O 0 0 3 ( 0 0 5 ;P d a = O 0 1 0 0 5 ;尚不能认为E 组尿中草酸钙结晶排泄高于A 组P e - a - O 2 9 1 。( 三) 半定量法检测左肾草酸钙结晶( 见表3 )表3各组半定量法左肾草酸钙结晶检测情况1 2温州医学院硕士学位论文由上表可见B 、c 、D 、E 四组左肾草酸钙结晶明显少于 组( 阴性对照组)1 ) b - a = O 0 0 8 0 0 5 :P

7、 c - a = O 0 1 0 0 5 :P d a = O 0 1 7 ( 00 5 ;P e a = O 0 4 1 0 0 5 。尚不能认为B C 、D 三组左肾草酸钙结晶与E 组( 阳性对照组) 有差异P b - e = 0 6 5 0 ;P c - e = O 7 7 3 :P d e = 0 7 6 4 。另外,h 组( 阴性对照组) 成石率为7 7 8 9 I ;B 组( 金钱草组) 成石率为4 1 2 9 6 ,鹏显低于h 组,P b - a = O 0 2 7 0 0 0 ;C 组( 石韦组)成石率为4 4 4 ;明显低于A 组,P ca = O0 4 , ( 00 5 ;

8、D 组( 车前子组) 成石率为4 1 2 9 6 ,明显低于A 组,e d a = O 0 2 7 00 5 :E 组( 枸橼酸钾组) 成石率为4 4 4 ;明显低于 组,P e - a - 0 0 4 0 0 5 。由此可见,B 、C 、D 三组左肾草酸钙结晶明显少于A 组,而与E 组相当。f 目一- - - - - - - - - :。 图3 ( c 组一例) 示中等量散在结晶图2 ( B 组一例) 未见明显结晶囤4 ( D 组一铆) 示中等量散在结昌鬻藕温州医学院硕士学位论文由上述图片可见,A 组( 阴性对照组) 结晶密集,易于形成结石,故成石率高;B 、C 、D 三组结晶松散,易从尿中

9、排出,不易形成结石,故成石率低。( 四) 计数法检测右肾草酸钙结晶( 见表4 )表4 计数法右肾草酸钙结晶检测情况用融$ 表示( 以颗粒为单位)由上表可见B 、C 、D 、E 四组右肾草酸钙结晶数量明显少于A 组( 阴性对照组) ,P b a = 0 0 0 l ;P c - a = 0 0 0 0 , P d a = O 0 0 0 , P e - a = 0 0 0 1 ,以上P 值均小于0 0 5 。尚不能认为B 、C 、D 三组右肾草酸钙结晶与E 组( 阳性对照组)有差异P b e = O 4 7 2 , P c - e = 0 5 6 7 , P d e = O 2 9 6 。( 五

10、) 半定量法检测左肾充血情况( 见表5 )表5 半定量法检测左肾充血情况左肾充血情况3 +2 +1 +A ( n = 1 8 )B ( n = 1 7 )C ( n = l S )D ( n - - 1 7 )E ( n = 1 8 )481 01 09由上表可见B 、C 、D 、E 四组左肾充血情况明显轻于A 组( 阴性对照组) ,P b a - - 0 0 3 7 0 0 5 , P c - a = O 0 0 7 0 0 5 , P d a 2 0 0 2 4 0 0 5 , e e - a = 0 0 3 4 0 0 5 。尚不能认为B , C 、D 三组左肾充血情况与E 组( 阳性对

11、照组) 有差异P b e = 0 8 8 3 ,1 4温州医学院硕士学位论文P c - e = O 6 9 6 :P d - e = O 8 0 7 。( 六) 半定量法检测左肾炎细胞浸润情况( 见表6 )表6 半定量法检测左肾炎细胞浸润情况由上表可见B 、C 、D 、E 四组左肾炎细胞浸润情况明显轻于A 组( 阴性对照组) ,P b a = O 0 0 7 0 0 5 ;P c - a 2 0 0 2 8 0 0 5 ;P d a = O 0 2 3 0 0 5 ;P e - a = O 0 3 8 0 0 5 。尚不能认为B 、C 、D 三组左肾炎细胞浸润情况与E 组( 阳性对照组) 有差

12、异P b e = O 7 5 8 ;P c - e = O 6 9 6 ;P d - e = O 7 5 8 。( 七) 半定量法检测左肾小管扩张情况( 见表7 )表7 半定量法检测左肾小管扩张情况由上表可见B 、C 、D 、E 四组左肾小管扩张情况明显轻于A 组( 阴性对照组) ,P b a 0 0 0 7 0 0 5 ;P c - a = O 0 2 8 0 0 5 , P d a = O 0 3 9 0 0 5 ;P e - a = O 0 0 5 0 0 5 。温州医学院硕士学位论文尚不能认为B 、C 、D 三组左肾小管扩张情况与E 组( 阳性对照组) 有差异P b _ e = O 9

13、 4 0 ;P c - e 2 0 4 5 8 ;P d e 2 0 4 0 4 。1 6温州医学院硕士学位论文讨论长期以来,泌尿系结石一直是常见病、多发病。在中国,中药治疗肾结石已有上千年的历史。通过互联网数据库查询,目前已有大量关于中药治疗肾结石的文章,大多属于中药验方论文。随机选取了2 7 份各种肾结石中药方,抄录其中各味中药,经统计后发现使用最多的是所谓“三金( 金钱草2 3 2 7 ,鸡内金2 2 2 7 ,海金沙2 1 2 7 ) ,“二石“ ( 石韦1 8 2 7 ,滑石1 3 2 7 ) ,“二子“ ( 冬葵子1 2 2 7 ,车前子1 3 2 7 ) 。从中医角度分析上述7

14、种药物,所谓“三金( 金钱草、鸡内金、海金沙) 属于清热利湿、通淋排石,有效用于溶石排石,同时有预防结石的作用,同属一类;“二子“ ( 冬葵子、车前子) 属于清热利尿药,用于预防结石较有效;“二石“ ( 石韦,滑石) 属于利尿通淋药,也用于预防结石。三组中各选取一药进行本动物实验研究,以观察、比较疗效。中药现代研究表明:金钱草的药理作用为:( 1 ) 增加尿量,( 2 ) 增强输尿管蠕动;( 3 ) 抑制结晶形成过程;( 4 ) 调节p H 值;( 5 ) 还具有抗炎镇痛、细胞免疫抑制、抗菌、抗氧化、抑制肝脏脂质过氧化作用等。车前子的药理作用为利尿作用,能增加尿素、尿酸及氯化钠的排泄。石韦的药

15、理作用为具有利尿通淋、清热止血的功效。用于热淋、血淋、石淋、小便不通、淋沥涩痛H 钔。其中利尿及促进输尿管蠕动作用在中医学属“排石“ 作用;抑制结晶形成过程、影响调节因子、形成络合物属“防石“ 作用;调节p H 值属“溶石“ 作用;而抗炎、抑菌、镇痛等则属“护肾“ 作用嘲。枸橼酸钾作为防治泌尿系结石的首选药物,其疗效已得到普遍认可。在本试验中作为阳性对照。研究表明枸橼酸是一种很强的钙离子螯合剂口1 ,可降低钙离1 7温州医学院硕士学位论文子活性、浓度及其饱和度,从而减少钙盐结晶的形成。枸橼酸钾能抑制草酸钙和磷酸钙结晶的析出,阻断结石的成核、生长和聚集过程,同时也可碱化尿液,且具有利尿作用阳3 。本实验表明枸橼酸钾作用于肾结石模型后,能明显减少大鼠肾集合系统内草酸钙结晶形成( 图1 、2 、5 ) ,但尿中草酸钙结晶的排泄并没有明显增加,表明其可能主要是通过抑制草酸钙结晶的形成起作用的。在肾结石中,草酸钙结石约占8 0 阻1 。尚旭明等认为,绝大多数结石含有草酸钙、检出率为9 8 o n 0 1 。本实验采用1 2 5 乙二醇和1 氯化铵水溶液诱导大鼠肾草酸钙结石形成( 图3 、4 ) 。试验中,阴性对照组单纯造模;试验组造模同时,加用单味中药预防结石;阳性对照组造模同时,加用枸橼酸钾预防结石。结果发现三种单味中药均能减少肾结石模型大鼠肾集合系统内草酸钙结晶形成和堆积( 图6

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