《吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对2型糖尿病大鼠胰鸟β细胞凋亡的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对2型糖尿病大鼠胰鸟β细胞凋亡的影响（62页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 目录中文摘要1英文摘要7研究论文吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对2 型糖尿病大鼠胰岛p细胞凋亡的影响前言1 3月l J 舌1 3材料与方法1 4结果2 2附图2 7附表31讨 仑3 4结论3 8参考文献3 9综述高糖氧化应激与2 型糖尿病胰岛p 细胞损伤4 2致谢5 4个人简历5 5中文摘要吡咯烷二硫氨基甲酸酯对2 型糖尿病大鼠胰岛p 细胞凋亡的影响摘要目的：英国前瞻性糖尿病研究( U p D S ) 结果表明，2 型糖尿病患者在初诊时，胰岛功能多已低于正常的5 0 ，并随着糖尿病时间的推移，胰岛p 细胞功能呈进行性受损。而胰岛p 细胞凋亡异常增多是导致胰岛p细胞数量减少的重要原因，如何保护残存的胰
2、岛p 细胞及通过对p 细胞的保护来延缓糖尿病的进展，仍然是糖尿病治疗领域的难点和热点问题。2 型糖尿病体内升高的血糖、血脂诱发体内氧化与抗氧化作用失衡并引起氧化应激，是导致胰岛B 细胞损伤和糖尿病发生发展的一个重要原因。大量葡萄糖进入细胞内使活性氧簇( r e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s ，R O S ) 产生增多，促发氧化应激，激活N F 1 ( B 途径，增加了诱生型一氧化氮合酶( i n d u c i b l en i t r i co x i d es y n t h a s e ，i N O S ) 的转录，使N O 合成增加。N O 可
3、通过多种途径引起胰岛D 细胞凋亡，同时过量的N O 可与超氧阴离子结合生成氧化作用更强的过氧亚硝基阴离子( p e r o x y n i t r i t e ，O N O O ) ，其对胰岛p 细胞具有超强的细胞毒性，可造成p 细胞凋亡，O N O O 还可使蛋白质的酪氨酸残基或游离酪氨酸发生硝基化反应，最终形成产物硝基酪氨酸( n i t r o 够r o s i n e ，N T ) ，蛋白质被硝基化后，可诱导酶活性丧失、细胞坏死及凋亡。吡咯烷二硫代氨基甲酸酯( p y m l i d i n ed i t h i o c a r b a m a t e ，P D T C ) 为二硫氨基
4、酸酯，其分子上含有巯基( t h i 0 1 ) 结构，具有抗氧化及金属螯合作用。P D T C 可以特异性抑制N F 心活性，有效抑制氧化应激所致的N F 心的过度表达，已有多项研究证实，P D T C 可降低糖尿病大鼠血糖水平，但其机制尚不清楚。本研究以高脂喂养加小剂量链脲佐菌素( s t r e p t o z o t o c i n ，S T Z ) 腹腔注射的方法建立2 型糖尿病大鼠模型，并用P D T C ( 5 0m g k g d _ ) 干预1 周后，通过检测血糖水平、胰腺组织中S O D 和G S H P X活力、M D A 含量、胰腺组织中i N O S 表达和N T 的
5、生成以及胰岛p 细胞凋亡的情况，旨在整体水平确定P D T C 对糖尿病大鼠的降糖作用及其对抗氧化应激、硝化应激对胰腺p 细胞损伤的保护作用。中文摘要方法：1 动物模型建立、分组及标本处理参照M J R e e d 等方法建立2 型糖尿病大鼠模型，3 7 只健康雄性W i s t a u r 大鼠，8 周龄，体重1 8 0 2 1 0 9 ，随机分为对照组( N C 组) 1 2 只和 高脂喂养组( 心D 组) 2 5 只，对照组给予基础饲料喂养，高脂组给予高脂饲料喂养，8 周后行糖耐量实验，高脂喂养组证实出现胰岛素抵抗时，给予一次性腹腔注射链脲佐菌素2 7 m 酬吨，对照组大鼠给予同体积柠檬
6、酸缓冲液腹腔注射腹腔注射，各组以原饲料继续喂养。7 2 小时后测血糖值，以随机血糖1 6 7m m o l L 者为2 型糖尿病大鼠，证实造模成功，共成模2 4 只。成模组随机取1 2 只给予P D T C 5 0 m g l ( d 进行腹腔注射治疗。正常对照组和糖尿病组每日给予同体积的生理盐水腹腔注射。各组大鼠每周监测血糖和体重。每组大鼠于腹腔注射S T Z 前后均做口服葡萄糖耐量试验( o r a lg l u c o s et o l e r a n c et e S t ，0 G T T ) 和胰岛素耐量试验( i n s u l i nt o l e 啪c et e s t ，I
7、T T ) 。大鼠自采血前一日2 0 ：o o 开始禁食，第二日8 ：o o 分别从内眦静脉取血3 m l ，分离血浆，用于检测胰岛素、甘油三酯( t r i g l y c e r i d e ，T G ) 、总胆固醇( t o t a lc h o l e s t e r o l ，T C ) 、高密度脂蛋白胆固醇( h i 曲d e n s i t y1 i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l ，H D L C ) 、低密度脂蛋白胆固醇( 1 0 w e r d e n s i 哆l i p o p r o t e i n c h o l e
8、s t e r o l ，L D L C ) 、游离脂肪酸( 仔e ef a 钍ya c i d ，F F A ) 。P D T C 治疗l 周后处死动物，留取胰腺组织分别检测超氧化物歧化酶( s u p e r o x i d ed i a m u t a s e ，S O D ) 、谷胱甘肽过氧 化物酶( 9 1 u 讪i o np e r o x i d a s e ，G S H P X ) 的活性及丙二醛( m a l o n a l d e h y d e ， 加A ) 的含量，i N o S 、N T 的表达及胰岛p 细胞凋亡率。2 血糖、胰岛素的测定采用葡萄糖氧化酶法测定血糖，E
9、 L I S A 法测定胰岛素。通过稳态模型胰岛素抵抗指数( h o m e o e s t a s i sm o d e la s s e s s m e mo fi n s u l i nr e s i 丸m c e ，H O M A I R ) 及胰岛素敏感指数( i n s u l i ns e n s i t i v i 西i n d e x ，I S I ) 评价胰岛素抵抗的程度，H 叭压A I R _ I N ( F B G F I N S 2 2 5 ) 表示胰岛素抵抗的程度，胰岛素敏感指数I S I = L N ( 1 F B G F I N S ) ，表示胰岛素敏感性。3
10、口服葡萄糖耐量试验( O G T T ) 和胰岛素耐量试验( I T T )口服葡萄糖耐量实验：给予2 刚蟾葡萄糖灌胃，分别测定灌胃后O 、3 0 m i n 、6 0 m i n 、9 0 m i n 、1 2 0 m i n 的血糖、胰岛素水平，并计算每只大鼠中文摘要葡萄糖曲线下面积( a r e au n d e rt h ec u e ，A U C ) 。胰岛素耐量实验：给予1 U l ( g 生物合成人胰岛素腹腔注射，分别测定各组大鼠注射后O 、15 m i n 、3 0 m i n 、6 0 m i n 、9 0 m i n 的血糖水平。4 血脂的测定 甘油三酯( T G ) 、总
11、胆固醇( T C ) 、高密度脂蛋白胆固醇( 皿L C ) 、低密度脂蛋白胆固醇( L D L C ) 均使用全自动生化分析仪测定，游离脂肪酸( F F A ) 采用C u 2 + 比色法测定。5 胰腺组织S O D 、G S H P x 活性和M D A 含量的测定取胰腺组织2 0 0 m g ，制备1 0 胰腺组织匀浆，低温离心机3 0 0 0 r m i n ，离心1 0 1 5 m i n ，留取上清，按照试剂盒说明分别测定S O D 、G S H P x 的活力及M D A 含量。6 大鼠胰岛组织形态学观察取胰尾部分胰腺组织用1 0 福尔马林固定2 4 小时后，梯度酒精脱水，石蜡包埋
12、。石蜡切片，切片厚度为4 岬，旺染色观察胰岛的一般形态学变化，免疫组化检测胰腺组织内i N O S 的表达及N T 生成量。7 胰岛素与P I 双染色法，流式细胞术检测胰岛p 细胞凋亡率。经7 0 乙醇固定的胰腺组织，制备单细胞悬液，用碘化丙啶( p r o p i d i u mi o d i d e ，P I ) 和F I T C 标记的胰岛素抗体( a n t i I n s u l i n F I T C )双染色法，4 染色3 0m i n ，流式细胞仪( n o wc y t o m e 时，F C M ) 测定p细胞凋亡百分率。8 统计学处理计量资料以；姆表示，采用S P S S
13、 l 3 O 软件进行统计分析。两组间差异用两样本均数的f 检验进行比较，多组间比较采用单因素方差分析( A N O V A ) ，检验标准Q = O 0 5 ，氏O 0 5 为有统计学差异。结果：1S T Z 注射前各组大鼠指标比较1 1 各组大鼠体重比较实验初各组大鼠体重无统计学差异，按照分组喂养不同饲料，实验第8 周，高脂喂养组大鼠体重( b o d yw e i 曲t ，B W ) ( 3 6 1 9 2 士1 9 2 2 9 ) 明显高于对照组( 3 1 3 1 7 土1 9 9 5 9 ) ，差别具有统计学意义( 尸 rr 乏n sb ya u l t i o x i d a n
14、t s P r o cN a t lA c a dS c iU S A ，1 9 9 9 ，9 6 ( 1 9 ) ：1 0 8 5 7 1 0 8 6 24 2M a i r t i mA C ，S a n d e r SR A ，W a t k i n s 鹏E f f e c t so fa 1 p h a - l i p o i ca c i do nb i o n m a r k e r so fo x i d a t i V eS n s si 1 1s t r e p t o z o t o c i n - i n d u c e dd i a L b e t i cr a t
15、s JN u t rB i o c h e m ，2 0 0 3 ，14 ( 5 ) ：2 8 8 2 9 44 3V i n a y a g 锄o o n h iRB o b b yZ ，S r i d h a rM G 觚i o x i d a n t sp e s e r v er e d o xb a l a n c ea 1 1 di n h i b i tc J u l l 一N t e m i n a lk m a s epa t h w a yw h i l ei m p r o V i n g5 2综述i n s u l i ns i g n a l i n gi nf a t f e dr a t s ：e v i d e n c ef o rt h er o l eo fo x i
