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1、1氮磷钾对冬凌草中迷迭香酸积累影响的研究作者：董诚明 王龙 苏绣红 王伟丽【摘要 】 目的研究氮、磷、钾 3 种养分对冬凌草中迷迭香酸含量积累的影响。方法采用 3 因素 2 次饱和-D 最优盆栽施肥试验设计，对冬凌草中迷迭香酸积累进行肥效研究。结果磷肥对迷迭香酸的积累作用最为显著，氮磷肥共同施用时可使冬凌草中迷迭香酸含量增加一倍。结论营养元素对冬凌草中代谢产物的积累中有明显的调节作用，合理施肥能够有效地调节代谢产物合成与积累。 【关键词】 冬凌草； 迷迭香酸； 肥效； 数学模型Abstract：ObjectiveTo research the effects of three fertiliz
2、er of N,P,K on content accumulation of rosmarinic acid in Rabdosia rubescens . MethodsThe optimum design of three factors of Dsaturation design plan of N,P,K was adopted in the experiment.ResultsThe fertilizers of P made an obvious improvement in accumulation of rosmarinic acid , The fertilizers of
3、P and N used together could double the content of rosmarinic acid.ConclusionThe nutrient elements make obvious adjustment. Reasonable fertilization can make 2great effect on synthesis and accumadatin of the secondary meoabvlites.Key words：Rabdosia rubescens（Hemsl.）Hara; Rosmarinic acid； Response of
4、fertilizer; Active components ; Mathematics equations冬凌草 Rabdosia rubescens (Hems1.)Hara 为唇形科香茶菜属植物。主产于河南济源太行山区。河南民间以泡茶、煮水治疗咽喉肿痛、食管癌等已有 50 余年历史，临床报道其水及醇提取物对食管癌、贲门癌、肝癌、乳腺癌有一定疗效1 。实验证明，迷迭香酸具有较好的抗菌、消炎、止痛的功效，是冬凌草其水溶性部位主要的有效成分。矿物元素对冬凌草迷迭香酸代谢积累研究未见报道。前人的研究表明氮、磷、钾是影响药用植物次生代谢物积累的重要因素2 ，因此探索其对冬凌草中迷迭香酸代谢积累的影响
5、，从根源上提高冬凌草的质量是十分必要的。1 材料实验设在河南中医学院苗圃基地，盆栽实验土壤为黄砂壤，供试土壤基本性状：pH7.4，氨态氧 22.44 mg/kg，硝态氮 22.00 mg/kg，速效磷 34.94 mg/kg，速效钾 105.28 mg/kg。供试的冬3凌草经董诚明教授鉴定为唇形科香茶菜属，碎米桠 Rabdosia rubenscen (Hemsl) Hara。移栽时间为 20060315。花盆装土重量为 10 kg，肥料分别为尿素(含 N 46) 、过磷酸钙(含 P 16)、硫酸钾(含 K 33) 。冬凌草迷迭香酸对照品均为河南中医学院冯卫生教授所赠，纯度为 99.8。2 方
6、法2.1 实验方案实验采用 3 因素 2 次饱和 D最优设计3 。2.2 冬凌草迷迭香酸的提取和含量分析样品置于 60 恒温干燥箱中干燥至恒重，用研钵研成粉末，精密称取 0.25 g 样品，加 20 ml 甲醇，超声提取 2 次，30 min/次，合并 2 次滤液，水浴蒸干，用甲醇溶解定溶于 5 ml 容量瓶中，作为供试样品。用 HPLC 法分析迷迭香酸的含量。岛津 20-A 高效液相色谱仪，SPA-20 检测器。所用柱子为 Sphermage-80, 4 mm 250 mm 反相柱。迷迭香酸检测波长 335 nm，流速为 0.8 ml/min。流动相为甲醇-0.5%的磷酸水溶液（4555）
7、，柱温为 30，标准液 0.58 mg/ml。每个样品测定 3 次，进样量为 10 l。样品中的迷迭香酸含量均为 3 次进样的平均值。42.3 数据分析方法实验数据结果运用 DPS 统计软件对进行分析4 。3 结果3.1 实验结果见表 1。3.2 实验分析3.2.1 氮、磷、钾肥对冬凌草迷迭香酸肥效方程的建立及检验Y=0.808 7+0.395 9X1+0.027 52X2-0.377 5X3-0.132 23X12+0.099 7X22+0.124 1X32-0.012 29X1X2+0.030 8X1X3-0.144 2X2X3 注： X1 氮肥；X2 磷肥 ；X3 钾肥 显著水平 P=0
8、.0033(P 值小于 0.01) 达到极显著水平, F 值=55 279.076 7,相关系数 R=0.999 999 该数学模型与田间试验结果高度拟合。此回归方程可以应用二次多项式回归模型来分析实验结果。3.2.2 氮磷钾对冬凌草素的影响程度由回归方程可以看出氮、磷、钾对冬凌草甲素的影响程度大小为磷氮 钾。53.2.3 单因素分析将方程采用降维法,得到各因素对冬凌草迷迭香酸的方程，并将方程作图 1。Y=0.808 7+0.395 9X1-0.132 23X12 氮肥Y=0.808 7+0.027 52X2+0.099 7X22 磷肥Y=0.808 7-0.377 5X3+0.124 1X3
9、2 钾肥由 式和图 1 可见，氮肥数学模型曲线为开口向下的抛物线，随着氮肥施用量的增多，冬凌草迷迭香酸的含量先达到顶点后又连续递减，说明施用适量的氮肥对冬凌草迭香酸的积累有促进作用，施用过量的氮肥对冬凌草迷迭香酸的形成造成不利影响；由式和图 1 可见，磷肥数学模型曲线为开口向上的抛物线，随着磷肥施用量的增多冬凌草迷迭香酸百分含量一直连续上升，并达到最高值。说明磷肥在冬凌草迷迭香酸的形成积累过程中起着首要的作用；由式和图 1 可见，钾肥数学模型曲线为开口向上的抛物线，随着钾肥施用量的增多冬凌草迷迭香酸先递减后有所上升，但还是低于空白处理的冬凌草迷迭香酸，说明钾肥不利于冬凌草迷迭香酸的积累。表 1
10、 氮、磷、钾配施实验冬凌草干重及冬凌草甲素含量结果3.2.4 交互作用分析将方程采用降维法,得到两因素对冬凌草干6重的方程并作图 24 。由图 2 可见，氮磷肥共同施交互作用明显，为正效应。适量的氮肥与足量的磷肥共同施用时，可以促使冬凌草迷迭香酸的含量显著增加；由图 3 可见，氮钾肥交互作用为正。施用适量的氮肥与足量的磷肥，可使冬凌草迷迭香酸百分含量达到较高水平。由图 4 可以看出，在 PK 肥共同施用时，交互作用为负，钾肥的施用极为不利于冬凌草迷迭香酸的积累。3.2.5 寻优结果根据冬凌草迷迭香酸氮、磷、钾肥效反应方程计算可知施肥模式寻优结果：当纯 N 的施用量为 6.83 kg/667m2
11、，P2O5 的施用量 12.00 kg/667 m2，冬凌草迷迭香酸可达到最大目标含量 1.703 04。4 讨论矿质营养元素对药用植物有效成分的含量关系作用很大，很多无机养料参与活性物质如生物碱、苷类等的生物合成，成为其不可缺少的原料。赵杨景等5的研究表明，土壤中钾、磷、锰、镁和有机质含量的差异是当归道地性形成的主要生态因子。因此药用植物施肥应该多考虑如何不改变药材的地道性。在本实验中磷对冬凌草迷迭香酸积累影响作用最大，单施磷肥就可使冬凌草迷迭香酸含量7达到 1.45%。氮磷肥同施交互作用更为明显，可以使冬凌草迷迭香酸含量达到 1.70，与对照相比增加 1 倍还多。【参考文献】 1 刘晨江,赵志鸿. 冬凌草的研究进展J.中国药学杂志,1998，33(10) ：577.2 刘长庆. 冬凌草及其开发利用 J.中国特产，1999,2 ：4.3 张永成 .饱和 D 最优设计方法在农业试验中的应用J.马铃薯杂志，1997, 11(3)：1714 唐启义, 冯明光 .实用统计分析及其 DPS 数据处理系统J . 华夏英才基金学术文库,2002.5 赵杨景，陈 震.西洋参营养特点研究 II 氮磷钾营养元素对西洋参生长的影响J.中草药，1997, 22 (1)：13
