《新一代聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚胺酶基础研究论文》由会员分享，可在线阅读，更多相关《新一代聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚胺酶基础研究论文（64页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、浙江人学硕士学位论文英文摘要B a s i cR e s e a r c ho faN e wG e n e r a t i o nP e g y l a t e dA D IM e d i c i n es c h o o lo fZ h e ji a n gU n i v e r s i t yO n e o l o g yP o s t g r a d u a t eG r a d e2 0 0 6S u p e r v i s o rJ i a n gW e i q i nP r o f e s s o rP a nH o n g m i n gA b s t r a c tO b j
2、 e c t i v e ：N o r m a lc e l l sd on o tr e q u i r ea r g i n i n ef o rg r o w t h ，s i n c et h e yc a ns y n t h e s i z ea r g i n i n ef r o mc i t r u l l i n ew i t hat w o s t e pp r o c e s s I nc o n t r a s t ，i th a sb e e nr e p o r t e dt h a tp r i m a r yh e p a t o c e l l u l a
3、rc a r c i n o m ac e l l sr e q u i r e sa r g i n i n ef o rg r o w t h ，S Ot h e ya r ea u x o t r o p h i cf o ra r g i n i n e A r g i n i n ed e i m i n a s e ( A D I ) ，a ne n z y m et h a td e g r a d e sa r g i n i n e ，m a yb eu t i l i z e da sat r e a t m e n tm e a n s T h i sr e s e a
4、r c ht r i e st od e v e l o pan e wg e n e r a t i o nd r u gf o rh e p a t o m a s ：P e g y l a t e dA D I ( P E G A D I ) M e t h o d s ：T h eA D Ig e n eW a sp r o d u c e db yd e n o v os y n t h e s i s ，w h i l eE s c h e r i c h i ac o bp r e f e r e n c ec o d o n sw e r ei n t r o d u c e
5、d T h es y n t h e s i z e dg e n ef r a g m e n tW a si n s e r t e dt op E T 3 aa n dt h er e c o m b i n a n tp l a s m i dc o n t a i n e dA D Ig e n e ( p E T 3 a - A D I ) W a st r a n s f o r m e dt oE s c h e r i c h i ac o l iB L 21D E 3 ( p L y s s ) E s c h e r i c h i ac o l iB L 21D E 3
6、 ( p L y s s ) h a r b o r i n gA D lw a si n d u c e db yi n c u b a t i o nw i t hI P T Gf o r4 h ，a n dt h ec e l l sw e r eh a r v e s t e db yc e n t r i f u g a t i o n T h ec e l lp e l l e t sw e r er e s u s p e n d e di nP Ba n dd i s r u p t e db yh i g hp r e s s u r e T h ei n c l u s i
7、 o nb o d i e sw e r es o l u b i l i z e dw i t h8 MG u H C Ia n dr e n a t u r a t i o nW a sp e r f o r m e du n d e rr e f o l d i n gc o n d i t i o n s T h er e s u l t i n gc o m p l e t e l yr e f o l d e dr A D IW a sp u r i f i e du s i n gs e q u e n t i a lQ S e p h a r o s ea n i o ne x
8、 c h a n g ea n dP h e n y lH Ph y d r o p h o b i ci n t e r a c t i o na n dA r g i n i n eS e p h a r o s e4 B A D Ie n z y m ea c t i v i t yw a sd e t e r m i n e db yt h ep r o d u c t i o no fL c i t r u l l i n ef r o mL a r g i n i n e T h eP E Gw a sc o v a l e n t l yb i n d e dw i t hr A
9、 D Ib yan e wg e n e r a t i o nP E Gm o d i f i c a t i o nt e c h n o l o g y T h er e s u l t i n gP E G r A D IW a sp u r i f i e du s i n gR e s o u r c eP H Eh y d r o p h o b i ci n t e r a c t i o n T h en u m b e ro fP E Gm o l e c u l e sa t t a c h e dp e rA D Im o l e c u l eW a sd e t e
10、 r m i n e db yF e ( S C N ) 3 T h em e n s u r a t i o no fP E G r A D Ie n z y m ea c t i v i t yW a st h es a m ea st h eo n eo fA D I T h e nv i v oa n di nv i t r oa n i m a lp h a r m a c o d y n a m i c sa n dl I l浙江人学硕J ：学位论文英文摘要P h a r m a c o k i n e t i c se x p e r i m e n t sw e r ep e
11、r f o r m e db yi nv i t r oh e p a t o m a si n h i b i t i o n ,p h a r m a c o d y n a m i ce f f e c t so nH 2 2i m p l a n tt u m o r , a n di m m u n o g e n i c i t ya s s e s s m e n to fn o r m a lr i c e R e s u l t ：A nE s c h e r i c h i ac o l ie x p r e s s i o nv e c t o rh a r b o r
12、i n gr A D I ( p E T 3 a - A D I )w a sc o n s t r u c t e ds u c c e s s f u l l y B yi m p r o v i n gf e r m e n t a t i o nc o n d i t i o n s ，i m p r o v i n gt h ee x p r e s s i o no fo b j e c tp r o t e i n ，a n do p t i m i z i n gr e f o l d i n gc o n d i t i o n so fr A D Ii n c l u s
13、i o nb o d i e s ，t h ep r o t e i nr e c o v e r yr a t ew a sp r o m o t e du pt o4 0 T h es p e c i f ya c t i v i t i e so fp u r i f i e dr A D lw e r ea b o v e4 0 I U m g A n dt h en e wg e n e r a t i o nP e g y l a t e dr A D Is i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e di m m u n o g e n i c
14、i t yc o m p a r i n gw i t hu n m o d i f i e dr A D I T h ei nv i v oa n di nv i t r oa n i m a lp h a r m a c o d y n a m i c sa n dP h a r m a c o k i n e t i c se x p e r i m e n t sp r o v e d ：T h ee f f e c to ft u m o ri n h i b i t i o no ft h i sn e wg e n e r a t i o nP e g y l a t e dr
15、A D lw a se q u a lt oP E G A D l 2 0o fP h o e n i xP h a r m a c o l o g i c sl n c C o n c l u s i o n s ：An e wg e n e r a t i o np e g y l a t e dA D Ih a sb e e ns u c c e s s f u l l yc o n s t r u c t e d ，a n dt h ee f f e c to ft u m o ri n h i b i t i o no ft h i sP E G r A D Ih a sb e e
16、nc o n f i r m e d K e y w o r d s ：h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a ；a r g i n i n ed e i m i n a s e ；p e g y l a t i o n ；a r g i n i n eI V浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者虢带救秀签字眺棚年朋岁日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝垄盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编
