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1、1必修必修 1 分子与细胞分子与细胞P7 实验:使用高倍显微镜观察几种细胞实验:使用高倍显微镜观察几种细胞一、材料用具一、材料用具 1材料:高等植物细胞(如洋葱鳞片叶内表皮细胞,叶的保卫细胞) ,动物细胞(如动物 细胞有丝分裂永久装片,人口腔上皮细胞,鱼的红细胞或蛙的皮肤上皮细胞)等。 2用具:显微镜,载玻片,盖玻片,镊子,滴管,吸水纸。 二、方法步骤二、方法步骤 (一)观察永久装片: 1对光。转动 反光镜 使视野明亮。 2低倍镜观察。放置装片,在 低倍镜 下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野 中 央 。 3转动 转换器 ,换成 高倍镜 。 4高倍镜观察。观察并只能用 细准焦螺旋 调焦。
2、(二)再制备并观察临时装片。 用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明薄膜内表皮。把撕下的内表皮浸入载玻片上的 水滴中,用镊子把它展平。 用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓地放下,盖在要观察的 材料上,这样才能避免盖玻片下面出现气泡而影响观察。 三、讨论三、讨论 1.物镜越长,放大倍数越大,装片距离越近,有螺纹目镜越长,放大倍数越小,装片距离越远,无螺纹比较项目物象大小细胞数目视野亮度与装片距离视野范围高倍镜大少暗近小低倍镜小 多亮远大P18P18实验实验 生物生物组织组织中中还还原糖、脂肪、蛋白原糖、脂肪、蛋白质质的的鉴鉴定定实验实验原理原理某些化学试剂能够使生物组织中的
3、有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 糖中的还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖) ,与斐林(Fehling)试剂(新制 Cu(OH)2) 发生作用,可以生成砖红色沉淀(Cu2O) 。 脂肪可以被苏丹 III 染液染成橘黄色(或被苏丹 IV 染液染成红色) 。 蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应(生成紫色络合物) 。还还 原原 糖糖 的的 鉴鉴 定定材料要求材料要求糖高色浅。 (不宜选用双子叶植物的叶子,因光合作用的产物葡萄糖形成后合成淀粉, 暂时储存在叶内;不宜选用植物的叶子作实验材料,因叶片中的叶绿素颜色较深,会对鉴 定时的颜色反应起掩盖作用,导致实验现象不明显) 试剂试剂斐林试剂 甲
4、液:质量浓度为 0.1g/mL 的 NaOH 溶液。 乙液:质量浓度为 0.05g/mL 的2CuSO4 溶液。操作流程1制备组织样液苹果或梨洗净、去皮、切块研磨(SiO2 少许,5mLH2O)过滤(一层纱布)收集滤液2制备斐林试剂:向 2mL 甲液中滴加 4-5 滴乙液,充分混匀。3鉴定注意事注意事项项1取材:糖高色浅。2斐林试剂配制现配现用:生成的 Cu(OH)2不稳定,久置会分解为 CuO 和 H2O;生成的Cu(OH)2不溶于水,刚配制时为悬浊液有利于反应的进行,久置会沉淀。甲液和乙液要混合均匀后使用,不可分别加入组织样液,因为强碱会使单糖分裂产生多种产物,或形成双缩脲试剂与蛋白质反应
5、,影响对反应颜色观察。乙液不可过量,若过量,Cu2+的蓝色会遮蔽反应产生的砖红色。3鉴定时要隔水加热,直接加热将造成温度过高,致使 Cu(OH)2分解为黑色的 CuO,对实验结果观察产生干扰。4试管口切勿对着人,以免溶液沸腾喷出试管伤人。5鉴定前应预留一部分样液,以便于实验后做对比。脂脂 肪肪 的的 鉴鉴 定定材料要求材料要求富含脂肪的种子,以花生种子为最好。实验前需浸泡 3-4h(浸泡时间过长,组织太软,切下的薄片不易成形;浸泡时间太短,不易切成片) 。试剂试剂苏丹 III 染液(染色 2-3min,反应呈橘黄色)或苏丹 IV 染液(染色 1min,反应呈红色),体积分数为 50%的酒精溶液
6、,蒸馏水。操作流程操作流程组织样液 2mL+斐林试剂 2mL振荡混匀呈蓝色水浴,煮沸 2min,观察颜色 变化蓝色棕色砖红色沉淀制备实验材料:花生种子浸 泡 3-4h徒手切片取最薄的一片移至载玻片中央染色:2-3 滴苏丹 III(或苏丹 IV),2-3min(苏丹 IV 1min)漂洗:吸取剩余染液,并滴 1-2 滴 50%酒精,去浮色制片:吸取酒精,滴蒸馏水 1-2 滴,盖上盖玻片观察:低倍镜下找到最薄处,改用高倍镜观察3注意事注意事项项1取材:富含脂肪,以花生种子为最好。注意浸泡时间。2切片:刀口向内,均匀,快速,滑行,用臂力,切薄。3染色、漂洗、观察时间不可过长,否则脂肪溶解于酒精,影响
7、实验观察。蛋蛋 白白 质质 的的 鉴鉴 定定材料要求材料要求最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官) ,颜色宜浅。植物材料常用的是大豆种子,动物材料常用的是鸡蛋(卵白) 。试剂试剂双缩脲试剂 A:质量浓度为 0.1g/mL 的 NaOH 溶液。 双缩脲试剂 B:质量浓度为0.01g/mL 的 CuSO4 溶液。操作流程操作流程注意事注意事项项1取材:若用黄豆,必须提前浸泡 1-2d。若用蛋清作实验材料,必须稀释,以免实验后粘住试管,不易洗刷。2双缩脲试剂的 A 液和 B 液要先后加入,造成碱性环境,使蛋白质与形成紫色络合物,否则 Cu2+会先生成 Cu(OH)2沉淀,把紫色遮蔽。3B 液不可过量
8、,否则的蓝色会遮盖反应生成的紫色。4鉴定前应预留部分样液做对照。P26P26 实验:观察实验:观察 DNADNA 和和 RNARNA 在细胞中的分布在细胞中的分布一、目的要求一、目的要求 初步掌握观察 DNA 和 RNA 在细胞中分布的方法。 二、实验原理二、实验原理 1、DNA 主要分布在 细胞核 内,RNA 大部分存在于 细胞质 中。 2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同,甲基绿使_DNA_呈_绿 色, 吡罗红使_RNA_呈_红 色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示 DNA 和 RNA 在细胞的分布。 3、盐酸能改变 细胞膜 的通透性,加速染色剂
9、进入细胞,同时使染色质中的_DNA_ 和 蛋白质 分离,有利于_DNA_与染色剂结合。 三、材料用具三、材料用具 1实验材料:人的口腔上皮细胞(或洋葱鳞片叶内表皮细胞) 2仪器:烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,火柴,酒精灯,镊子,吸水 纸,显微镜,恒温水浴锅等。组织样液 2mL+双缩脲试剂 A 1mL振荡 观察无颜色变化双缩脲试剂 B 4 滴, 振荡观察紫色43试剂:质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液,质量分数为 8%的盐酸,吡罗红甲基绿染色剂, 蒸馏水。 四、方法步骤及实验现象四、方法步骤及实验现象 1、取口腔上皮细胞制片 在洁净的载玻片上,滴一滴质量分数为_0.9%_的_
10、NaCl_ 溶液; 用消毒牙签在自己漱净的_口腔内侧壁 _上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端, 放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下; 点燃酒精灯,将涂有_口腔上皮细胞_的载玻片烘干。 2、水解 在小烧杯中加入 30ml 质量分数为 8%的_盐酸_,将烘干的载玻片放入小烧杯中; 在大烧杯中加入_30_的温水; 将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温 5 min。 3、冲洗涂片 用蒸馏水的_缓水流_冲洗载玻片 10 秒,目的是为了洗去上一步滴加的_盐酸_,便于 下一步染色。 4、染色 用吸水纸吸去载玻片上的水分; 将吡罗红甲基绿染色剂滴 2 滴在载玻片上,染色 5 min; 【注意事项注意事
11、项】本实验两种染色剂不是单独使用,而是混合后使用!本实验两种染色剂不是单独使用,而是混合后使用! 吸去多余染色剂,盖上盖玻片。 5、观察 用低倍镜观察:选择染色均匀、色泽浅的区域,移至_视野中央_,将物像调节清晰; 换用高倍镜观察:调节_细准焦螺旋_,观察细胞核和细胞质的染色情况。 五、实验结果五、实验结果 细胞核被染成绿色,细胞质被染成红色。 六、结论六、结论 DNA 主要分布在细胞核内,RNA 大部分存在于细胞质中。P40 体验制备细胞膜的方法体验制备细胞膜的方法一、实验原理一、实验原理 成熟哺乳动物的红细胞没有细胞壁,而且也没有细胞核和各种细胞器,放入清水中,细胞 会吸水涨破,细胞内物质
12、流出,细胞膜比较纯净。 二实验材料二实验材料 猪(或牛、羊、人)的新鲜的红细胞稀释血液(加入适量的生理盐水) ,滴管、蒸馏水、吸 水纸,盖玻片,载玻片,生理盐水、小烧杯,显微镜 四、方法步骤及实验现象四、方法步骤及实验现象 1.在小烧杯中加入一定量的生理盐水。用滴管给小烧杯中加入几滴新鲜血液,制成红细胞 稀释液。用滴管吸取少量的红细胞稀释液,滴一小滴在载玻片上。盖上盖玻片,制成临时 装片。 2. 把载玻片放在高倍镜下进行观察。待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水。然 后在另一侧用吸水纸小心洗液,注意不要把细胞吸走,接下来用高倍镜仔细观察进水部分 红细胞的形态变化:凹陷消失,细胞体积增大,很
13、快细胞破裂,内容物流出。P47 实验:用高倍镜观察叶绿体和线粒体实验:用高倍镜观察叶绿体和线粒体5一、目的要求一、目的要求 使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态和分布。 二、实验原理二、实验原理 1、叶肉细胞中的叶绿体,散布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形。可以在高倍镜 下观察它的形态和分布。 2、线粒体普遍分布于植物细胞和动物细胞中。线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线 形、哑铃形等。 3、健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而 细胞质接近无色。线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时,通过染色,可以在高倍镜下 观察到生活状态的线粒体的形态和分布。 三
14、、材料用具三、材料用具 1实验材料:新鲜的黑藻叶(或菠菜叶、藓类的叶等) ,人的口腔上皮细胞。 2仪器:滴管,镊子,消毒牙签,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜等。 3试剂:新配制的质量分数为 1%的健那绿染液,蒸馏水。 四、方法步骤及实验现象四、方法步骤及实验现象 1、制作黑藻叶片临时装片 在洁净的载玻片中央滴一滴清水。 用镊子夹取一片黑藻叶片,放入水滴中,盖上盖玻片。 【注意事项注意事项】临时装片中的叶片不能放干了,要随时保持有水状态。临时装片中的叶片不能放干了,要随时保持有水状态。 2、观察叶绿体 先在低倍镜下找到叶片细胞后,在换用高倍镜,观察细胞内叶绿体的形态和分布。 3、制作人的口腔上皮
15、细胞临时装片 在洁净的载玻片中央滴一滴健那绿染液。 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在 染液中涂抹几下,盖上盖玻片 4、观察线粒体 先用低倍镜观察,找到口腔上皮细胞,再换用高倍镜观察,观察线粒体的形态和分布及染 色情况。 五、实验结果及结论五、实验结果及结论 黑藻叶片细胞中叶绿体散布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形。 人口腔上皮细胞中的线粒体被染成蓝绿色,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等,而细胞 质接近无色。P61P61 实验实验 观察植物细胞的质壁分离与复原(失水吸水)观察植物细胞的质壁分离与复原(失水吸水)实验实验原理原理1渗透作用。 2细胞
16、壁的伸缩性比原生质层的伸缩性小。方法步方法步骤骤制作临时装片低倍镜观察高倍镜观察使样本浸浴在 0.3g/mL 蔗糖溶液中低倍镜观 察高倍镜观察(可以观察到质壁分离现象)使样本浸浴在清水中中低倍镜观察高 倍镜观察(可以观察到质壁分离复原的现象)注意事注意事项项61取材:活、紫、薄、液泡勿破。 2滴加清水或蔗糖溶液时应将玻片从载物台上取下。 3使用溶液浓度要适当,对细胞无害,也不会迅速被细胞吸收。 4质壁分离时间不宜过长,否则会对植物细胞造成伤害甚至导致死亡。 结论结论外界溶液浓度 细胞液浓度细胞渗透失水(质壁分离) 外界溶液浓度 细胞液浓度细胞渗透吸水(质壁复原)P78P78、P83P83 探究影响酶活性的因素探究影响酶活性的因素一实验目的:一实验目的: 1探究不同温度和 PH 对过氧化氢酶活性的影响