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1、【摘要】 目的：探索制备的家猪急性心肌梗塞模型中梗塞相关冠状动脉零流量压(P)与 存活心肌面积的关系。方法：普通家猪 13 只,冠脉造影结束后应用指引导管测量前降支近 端压力，置入冠脉内多普勒导丝测量前降支远端冠脉内的血流速度，绘制压力-血流速度坐 标轴，计算 P。将球囊送至冠状动脉左前降支中远端,堵闭血流 60100min，建立心梗模 型。模型建立后重复测算前降支 P，分析心梗模型制备前后前降支 P 数值的变化。处死 试验动物，切片心肌采用 TTC 染色法识别梗塞心肌与存活心肌，采用图像分析仪分析代表 存活心肌的颜色占整个左心室面积的百分数，将其与梗塞后前降支 P 数值联合建立坐标 轴，观察
2、二者之间的关系。结果：所有家猪均完成冠状动脉左前降支远端的封堵, 2 只家猪 分别在堵闭 45 和 65 min 时因心室纤颤死亡。存活 11 只家猪均成功地建立急性心肌梗塞模 型，完成 P 数值的测算。心梗后前降支的 P(53.0623.01)mmHg较心梗前(40.1319.53)mmHg显著升高，P0.5mV)，R 波振幅降低，证实实验家猪发生心肌梗塞，60100min 后撤除球囊及导 丝。术中给予连续心电监护以及动脉内压力监测，常规应用 11 浓度利多卡因 (100mg/100ml)静脉维持，AMI 模型制备成功后酌情给予静脉美托洛尔，控制家猪心率与球 囊堵塞前尽可能保持一致。1.3
3、应用冠脉内多普勒导丝测算动物心梗前后冠脉内零血流压冠状动脉 P 的计算方法同文献报道4，在舒张期内冠状动脉内血流速度与冠状动脉的压力呈直线相关，因此 P 的数值可以通过计算舒张期内冠状动脉内血流速度为零时的 冠脉压力得到。冠脉造影结束后，将冠脉内多普勒导丝连接后进行调零;将多普勒导丝送至 前降支远端，注意在送入冠脉后导丝能靠在血管壁上，维持多普勒探头在管腔中央的固定 位置，通过耳缘静脉注射腺甘(剂量为 140g/kgmin)，当冠状动脉诱发的最大充血达到 稳定状态时,记录每一心动周期的冠脉血流频谱，同时记录通过指引导管记录的冠脉压力。 以冠脉压力为横坐标，即时血流频谱速度为纵坐标，绘制坐标图(
4、见图 2)，建立舒张期内冠 状动脉内血流速度与冠状动脉的压力之间的直线方程并计算 P 数值。在完成球囊堵塞制 备心梗模型后，撤出球囊和导丝，通过耳缘静脉再次注射腺甘，通过相同的方法计算心梗 模型制备后前降支的 P 数值，对两次计算出的 P 数值进行比较。图 2 零流量压计算方 法示意图左图为三个心动周期内记录的冠脉压力曲线和血流频谱速度，右图建立起血流-压力数 值坐标轴，舒张期冠脉的血流与压力的关系可以用线性方程表示(y=ax+b)，零血流压 P=- b/a1.4 应用氯化四唑(TTC)染色检测存活心肌冠脉内多普勒血流测量结束后维持家猪存活 4 h，通过静脉推注 10%KCL 处死家猪， 迅速
5、开胸取出心脏，用生理盐水将残余血液冲洗干净，放入-40冰箱中冰冻 12 h，待心肌 硬度适度后取出，垂直于心脏长轴，自心尖向心底将心脏切成 4 mm 厚的短轴面切片，然 后置于 1% TTC 磷酸盐缓冲液中，放入 37 恒温水浴箱 20 min 之后在 10% 福尔马林中固 定。取出晾干后数码相机拍照，根据不同的颜色区别梗塞心肌(呈苍白色)、存活心肌(淡红 色)和正常心肌(砖红色)(图 3，见封三)。用手术刀将左心室心肌从标本中分离出来，采用图 像分析仪(Image tool 3.0)将染色差异性区域显像像素转化为具体数据，用%表示。记录代表 存活心肌的颜色占整个左心室的百分数，观察其与梗塞后
6、冠脉内 P 数值的关系。1.5 统计学方法采用 SPSS 15.0 软件进行统计学分析，计量资料以均数标准差(s)表示，比较采用 配对 t 检验，P0.05 为差异有显著性。两组数据关系的分析先绘制散点图，如条件满足采 用线性回归分析，建立回归方程。2 结 果2.1 急性心梗模型的制备结果所有家猪均完成冠状动脉左前降支远端的封堵, 其中 2 只家猪分别在堵闭 45 和 65 min 时因发生心室纤颤，经反复除颤抢救无效死亡，总死亡率为 15.4%(2/13)。存活 11 只家猪成功地建立 AMI 模型，其中 2 只家猪在球囊堵塞后 37 和 74 min 时也 发生心室纤颤，均经 200250
7、J 非同步直流电复律后消失，13 只动物中室颤发生率 30.8% (4/13)。另有 5 只家猪分别发生短阵室速、频发室早、室性自主心律等室性心律失常，在静 脉维持利多卡因条件下心律失常消失，室性心律失常发生率 69.2% (9/13)。 其原理为在脱 氢酶完整的组织(正常和存活心肌)内形成红色沉淀(砖红色或淡红色)，而缺乏完整脱氢酶系统的梗塞心肌不染色，呈苍白色。2.2 球囊堵塞前后冠脉内 P 数值的变化本研究中有 11 只家猪完成球囊堵塞前后冠脉内多普勒血流测定及零流量压的计算，在 球囊堵塞前前降支的 P 数值为(40.1319.53)mmHg，堵塞后 P 数值显著升高至(53.0623.
8、01)mmHg(P0.001)。2.3 存活心肌和冠脉内 P 数值的关系11 只家猪处死后取出心脏切片后行 TTc 染色，采用图像分析仪分析存活心肌占左心室 面积的百分数为(57.5720.00)%。绘制前降支的 P 和存活心肌占左心室面积的百分数之 间的散点图，二者呈直线负相关趋势。对两组数据进行线性回归分析并建立回归方程 y=- 0.764x+98.10，相关系数 r=-0.879，P0.001，二者相关性具有显著性，以心梗模型制备后 冠脉内 P 数值为横坐标、存活心肌占左心室心肌的百分数为纵坐标建立坐标轴(见图 4)， 从坐标轴上可以看出随着 AMI 后存活心肌占左心室的百分数的增加，冠
9、脉内 P 数值呈递 减趋势。提示 P 的测定可以作为预测心梗后存活心肌范围的一个指标。图 4 存活心肌与零流量压的相关性3 讨 论本研究运用介入方法堵闭冠状动脉，建立大型动物心肌梗塞模型，进行存活心肌的相 关研究。堵闭家猪的主要冠状动脉尤其是前降支后极易引起大范围心肌梗塞和各种恶性心 律失常,死亡率较高，因此选择合适的堵塞部位非常重要。我们选择第二对角支后或第一对 角支的远端进行球囊堵塞，以避免过大面积的心梗造成家猪死亡。在球囊堵塞前降支后， 常规静脉维持 11 利多卡因可有效防止恶性心律失常的发生，提高除颤抢救成功率。我们 将堵闭前降支的时间控制在 60100 min，避免缺血时间过长。一方
10、面可以降低梗塞动物 的死亡率，另一方面避免心肌梗塞范围过大，存活心肌范围小不利于分析。实验中家猪的 血液粘稠度大,血液极易凝集形成血栓,从而扩大心肌梗塞范围,使死亡率升高，术中大剂量 静注肝素(10 000 单位以上)会减少逆行性血栓发生率,提高制备模型的成功率。另外良好的 麻醉是完成实验的重要保障。本研究用氯胺酮做诱导麻醉,气管插管呼吸机辅助呼吸,并应用 戊巴比妥麻醉后施行手术，麻醉效果满意，保证了实验的顺利进行。TTC 染色是动物实验中确定存活心肌与梗塞心肌的可靠方法5。P 不是一个直接测 得的数值，它是通过绘制血流速度-压力坐标轴，对舒张间期冠状动脉血流速度与压力的关 系建立线性回归方程
11、，计算冠脉内血流为零时压力轴上的截距计算所得6。P 可以反映 微血管能力7。Shimada8等使用定量氟脱氧葡萄糖(FDG)正电子发射断层摄影术(FDG PET)对 P 与成功血管成形术后残存心肌活性之间的关系进行研究。结果提示 P 与 FDG PET 检测出存活心肌的面积百分数呈显著相关。本研究通过应用冠脉多普勒导丝测算 P 数值，与 TTC 染色检测心梗后存活心肌占左心室重量的百分数进行相关性分析，结果证实 存活心肌的百分比与测得的 P 数值呈负相关，应用多普勒导丝测算 P 可以反映存活心 肌的存在及范围的大小。本研究是针对 AMI 动物进行的基础研究，在导管室使用压力导丝容易推算和计算出
12、 P，而且几乎不受血流动力学的影响9。本研究结果证实根据 P 数值评价存活心肌是安 全可行的，P 与存活心肌的面积呈负相关， 它可能是检测急性心梗患者存活心肌的有用 的指标10。把本研究采用的方法应用于临床，将有助于医师在介入手术过程中对急性心 梗患者心肌状况进行评价，预测介入血运重建的疗效。 【参考文献参考文献】 1 陈春林, 张随学. 在体女性盆腔动脉血管网数字化三维模型构建方法及意义J. 中 国实用妇科与产科杂志. http:/ 2 徐玉静,欧阳振波,刘萍,陈春林. 磁共振成像在子宫肌瘤动脉栓塞术中的应用价值J. 中国实用妇科与产科杂志. 2011(04) 3 方驰华,苏仲和. 数字医学
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