《生物必修三大题归纳总结》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生物必修三大题归纳总结（9页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1基因工程技术生产凝乳酶的过程基因工程技术生产凝乳酶的过程凝乳酶凝乳酶基因基因限制酶限制酶切割位点切割位点质粒质粒重组质粒重组质粒生物必修三大题汇总生物必修三大题汇总1.1.（1515 分）分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。可以提取干扰素用于制药。（1 1）进行转基因操作前，需用）进行转基因操作前，需用_酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。（2 2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自）为使干扰素基因在家
2、蚕细胞中高效表达，需要把来自 cDNAcDNA 文库的干扰素基因片段正确插文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的入表达载体的_和和_之间之间；若要检测；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中干扰素基因在家蚕细胞中是否是否表达表达，可，可以采用的方法有以采用的方法有 、 。（3 3）通过通过 PCRPCR 技术可技术可大量获取目的基因大量获取目的基因。PCRPCR 反应体系主要包反应体系主要包括括：扩增缓冲液（含：扩增缓冲液（含 MgMg2+2+）、）、水水，4 4 种脱氧核糖苷酸、模板种脱氧核糖苷酸、模板 DNADNA、_和和_。（4 4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空
3、薄壁小玻璃珠放）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以入反应器中，这样可以_，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。答案：答案：39.39. （1 1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） （2 2）启动子）启动子； 终止子终止子； 分子杂交技术；分子杂交技术； 抗原抗原- - 抗体杂交技术（符合题意即可）抗体杂交技术（符合题意即可） （1 1 分）分）（3 3）TaqDNATaqDNA 聚合酶聚合酶（热稳定（热稳定 DNADNA 聚合酶聚合酶）；）； 与与干扰素基因特异性干扰素基因特异
4、性配对配对的的 DNADNA 引物引物 （4 4）增大细胞贴壁生长的附着面积）增大细胞贴壁生长的附着面积 2凝乳酶能凝固牛奶成奶酪，传统上凝乳酶只能从小牛的胃中提取，价格昂贵。凝乳酶能凝固牛奶成奶酪，传统上凝乳酶只能从小牛的胃中提取，价格昂贵。1990 年，美年，美 国辉瑞公司生产出了食品产业所需的第一个基因工程产品国辉瑞公司生产出了食品产业所需的第一个基因工程产品 CHYMAX 牌凝乳酶，其化学组牌凝乳酶，其化学组 成与从小牛体内提取的完全相同，但其更加物美价廉。生产过程如下图，据图回答问题：成与从小牛体内提取的完全相同，但其更加物美价廉。生产过程如下图，据图回答问题： （1）过程）过程中从
5、小牛体内提取的凝乳酶基因通常需要通过中从小牛体内提取的凝乳酶基因通常需要通过 技术进行扩增，该技术的技术进行扩增，该技术的 原理是原理是 。2（2）基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是图中过程）基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是图中过程 （填序号）（填序号） ，在该，在该 过程中重要使用的工具酶是过程中重要使用的工具酶是 。（3）过程）过程中理想的受体细胞是大肠杆菌，该类生物具有的特点是中理想的受体细胞是大肠杆菌，该类生物具有的特点是 ，要想把重组质粒，要想把重组质粒 导入大肠杆菌，首先必须用导入大肠杆菌，首先必须用 处理大肠杆菌，使其转化为处理大肠杆菌，使其转化为 细胞，然
6、后细胞，然后 将重组质粒和大肠杆菌在缓冲液中混合培养完成转化过程。将重组质粒和大肠杆菌在缓冲液中混合培养完成转化过程。（4）过程）过程将小牛凝乳酶基因转入大肠杆菌后，能够准确表达的主要原因是将小牛凝乳酶基因转入大肠杆菌后，能够准确表达的主要原因是 3、降钙素是一种多、降钙素是一种多 肽类激素，临床上肽类激素，临床上 用于治疗骨质疏松用于治疗骨质疏松 症等。人的降钙素症等。人的降钙素 活性很低，半衰期活性很低，半衰期 较短。某科研机构较短。某科研机构 为了研发一种活性为了研发一种活性 高、半衰期长的新高、半衰期长的新 型降钙素，将能人型降钙素，将能人 工合成降钙素的工合成降钙素的 DNA 与大肠
7、杆菌的与大肠杆菌的 DNA 分子进行重组分子进行重组， ，并成功地在大肠杆菌中得以表达。并成功地在大肠杆菌中得以表达。（1） 图图 1 示人工合成降钙素示人工合成降钙素 DNA 的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核 苷酸序列，并人工合成了两条苷酸序列，并人工合成了两条 72 个碱基的个碱基的 DNA 单链，两条链通过单链，两条链通过 18 个碱基对形成部分双链个碱基对形成部分双链 DNA 片段，再利用片段，再利用 Klenow 酶补平，获得双链酶补平，获得双链 DNA。从功能看，。从功能看，Klenow 酶是一种酶是一种_ 酶
8、，合成的双链酶，合成的双链 DNA 有有_个碱基对。个碱基对。 （2） 图图 2 示利用基因工程获得产品的过程。获取目的基因的方法除图示利用基因工程获得产品的过程。获取目的基因的方法除图 1 显示的方法外还有显示的方法外还有 。 （3） 对图对图 2 中中 a 点的操作方法为点的操作方法为 。 （4） 获得的双链获得的双链 DNA 经酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行经酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行 DNA 测序验证。测序验证。 1）大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它）大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_。 2）要进行重组质粒的鉴定和选择
9、，大肠杆菌质粒需要含有）要进行重组质粒的鉴定和选择，大肠杆菌质粒需要含有_。 （5） 对符合设计要求的重组质粒进行酶切，对符合设计要求的重组质粒进行酶切，已知限制酶已知限制酶 I 的识别序列和切点是的识别序列和切点是GGATCC ，限制酶，限制酶 II 的识别序列和切点是的识别序列和切点是GATC。请写出大肠杆菌质粒被限制酶。请写出大肠杆菌质粒被限制酶 I 切割后所形成切割后所形成3的的 DNA 片段两个末端的碱基序列片段两个末端的碱基序列 。 答案：答案：3 3 1.1. DNA 聚合酶聚合酶 126 2.2. 从供体细胞的从供体细胞的 DNA 中直接分离基因中直接分离基因3.3. 用与目的
10、基因同一种限制性内切酶切割质粒，露出相对应的可进行碱基配对的用与目的基因同一种限制性内切酶切割质粒，露出相对应的可进行碱基配对的 DNA 链链4.4. 1）繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少 2）标记基因标记基因5.5. 4 4 （8 8 分分下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答：下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答：过程过程和和必需用到的酶是必需用到的酶是 。 重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有 才能构成一个完整才能构成一个完整 的基因表达载
11、体。的基因表达载体。 为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射 的方法，做的方法，做超超数数排排卵卵处理，处理， 并将所采集到的卵母细胞在体外培养到并将所采集到的卵母细胞在体外培养到_期即可通过显微操作将其细胞核去除。期即可通过显微操作将其细胞核去除。早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。等物质。如果想同时得到多头绿色荧光如果想同时得到多头绿色荧光蛋白转基因克隆猪，可通
12、过胚胎蛋白转基因克隆猪，可通过胚胎分割技术得以实现。但应选择分割技术得以实现。但应选择的早期的早期胚胎进行操作，且要注意胚胎进行操作，且要注意 ，否则会影响分割后胚胎的恢复和否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。进一步发育。与一般的繁育良种动物方式相与一般的繁育良种动物方式相比较，胚胎移植的优势是比较，胚胎移植的优势是 。答案：答案：3535、限制酶和限制酶和 DNADNA 连接酶（缺一不可）连接酶（缺一不可）启动子、终止子和标记基因（缺一不可）启动子、终止子和标记基因（缺一不可）促性腺激素促性腺激素 减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期血清血清发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚发育良好形态正常
13、的桑椹胚或囊胚 将内细胞团均将内细胞团均等分割等分割可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力5.5.干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取0.50.5g g，所以价格昂，所以价格昂 贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。 （1 1）从人的淋巴细胞中取出干扰素基因，一般可采用用）从人的淋巴细胞中取出干扰素基因，一般可采用用 技术进行扩增，此基因在基技术进行扩增，此基因在基 因工程中称为因工程中称为 。 （2 2）此基因与细菌的质粒相结合要依靠）此基因与细菌的质粒相结合要依靠 酶酶，其作用部位是，其作用部位是 ，然后，然后 将目的基因移植到酵母菌体内，酵母菌在基因工程中叫将目的基因移植到酵母菌体内，酵母菌在基因工程中叫 。 （3 3）为了明确干扰素基因在酵母菌体内能否发挥功能作用，从分子水平看，首先要检测其是否）为了明确干
