《监测可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（suPAR）在预测多发性骨髓瘤患者髓外受累及预后中的作用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《监测可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（suPAR）在预测多发性骨髓瘤患者髓外受累及预后中的作用（47页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师( 或指导小组) 的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名9 亢：蚕导师签名：融圭学院领导签名： 沁鸯年r月z 专日河北医科大学 研究生学位论文独创性声明圆本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研
2、究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：y 芝导师签名：拳；芰沁吨年，月与日中文摘要监测可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体( s u P A R ) 在预测多发性骨髓瘤患者髓外受累及预后中的作用摘要目的：以往多项研究证实，血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体( S o l u b l eu r o k i n a s e t y p ep l a s m i n o g e na c t i v a t o rr e c e p t o r ，s u P A R ) 与肝病、感染及多种恶性肿瘤的预后相关。本研究旨在探讨s u P A R 在多发性骨髓瘤病人血清
3、中的表达、该数值与疾病预后相关因素( 分期、年龄、髓外浸润、染色体异常、肾功能、C 反应蛋白、1 5 2 - M G 等) 的关系及其在预测疾病预后方面的临床意义。方法：应用流式细胞仪检测了4 0 例初治多发性骨髓瘤患者( 包括I g G 型15 例、I g A 型1 4 例，轻链型4 例、I g D型4 例，I g M 型3 例) 骨髓C D 8 7 C D 5 6 C D 3 8 的表达，并应用E L I S A 方法检测其血清s u P A R 表达，对这些患者在治疗前行血常规、末梢血白细胞分类、骨髓穿刺、免疫固定电泳( 送北京红十字朝阳医院临床医学实验中心) 、血和尿p 2 微球蛋白，
4、C 反应蛋白、肾功能、全身骨骼X 线或E C T 检查、染色体分析。所取病例中髓外浸润包括舌淀粉样变( 1 例) 、肺浸润( 胸水离心涂片查见骨髓瘤细胞或针吸穿刺病理确证4 例) 、牙龈浸润( 2 例) 。共有6 例患者应用M P ( 马法兰、泼尼松) 方案化疗，3 4 例患者应用M 2 ( 卡莫司汀、环磷酰胺、马法兰、泼尼松) 方案化疗，其中7 例患者因治疗效果不佳更换V A D ( 长春新硷、阿霉素、地塞米松) 方案化疗。参照张之楠血液诊断及疗效标准( 第二版) 评价其化疗中文摘要疗效。同时检测了2 0 名健康人s u P A R 表达水平，应用t 检验分析骨髓瘤患者分期、血红蛋白、p 2
5、 微球蛋白、C 反应蛋白、肾功能、染色体变异、髓外浸润等影响愈后的各因素与s u P A R 值之间的关系，应用l o g i s t i c 回归分析影响病人生存期的具有统计学意义的因素。结果：健康成人血清均有s u P A R 表达( 2 3 3 4 7 8 3 2 2 p g m 1 ) 。4 0 例多发性骨髓瘤患者中，男性2 3 例，女性1 7 例，年龄波动于3 9 7 6 岁之间，其血清中均有s u P A R 表达，且明显高于正常对照组。参照疗效标准将病人分为部分缓解、进步( 此两组归为有效组) 、无效三组。有效组其血清s u P A R 表达分别为2 5 7 6 3 2 4 7
6、p g m l 、3 3 1 0 4 - 9 9 8 0p g m l ，与正常对照组相比较均无统计学差异( P O 0 5 ) 。无效组血清s u P A R 表达为5 6 2 2 2 9 1 0p g m l ，与正常对照组比较有显著统计学差异( P 1 0 m g L 1 0 m g L ) 、p 2 微球蛋白( 4 0 m g d l 4 0 m g d 1 ) 、髓外浸润( 有无) 组血清s u P A R 值均有显著统计学差异( P 值均 0 0 5 ) I nc o n t r a s t ，t h es e r u ms u P A Re x p r e s s i o no
7、fc a s e si ni n e f f e c t i v eg r o u pi s5 6 2 2 士2 91 0p g m l ，w h i c ht e l l sa no b v i o u ss t a t i s t i c a ld i f f e r e n c ew i t ht h ef i g u r eo fr e f e r e n c et e a m ( P 2y e a r sg r o u p ( P 4 O m g d l 4 0 m g d 1 ) ，a n de x t r a m e d u l l a r yi n f i l t r a t
8、i o n ( y e s n o ) B ym e a n so fl o g i s t i cr e g r e s s i o na n a l y s i so ft h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nl i f el i m i to fp a t i e n t sa n df a c t o r s ，s u c ha ss e x ，a g e ，p h a s i n g ，r e n a lf u n c t i o n ，h e m o g l o b i n ，c - r e a c t i v ep r o t e i n
9、 ，B 2 一m i c r o g l o b u l i n ，d e l e t i o no fc h r o m o s o m e13 ，e x t r a m e d u l l a r yi n f i l t r a t i o na n ds u P A R ，i th a ss h o w nt h a tp h a s i n go fd i s e a s ea n dh i g hl e v e lo fs u P A Ra r et h es e p a r a t ef a c t o r st h a tr e d u c el i f el i m i to
10、 fp a t i e n t sb e l o w2y e a r s C o n c l u s i o n ：S e r u ms u P A R ，w h i c hi sr e l a t e dt ot h ep h a s i n go fm u l t i p l em y e l o m a ，h e l p sj u d g ep r o g n o s i so ft h i sd i s e a s ew h i l et h eh i g he x p r e s s i o nl e v e lo fs u P A Ri sr e l a t e dt op o o
11、 rp r o g n o s i s K e yW o r d s ：s u P A R ；m u l t i p l em y e l o m a ；p r o g n o s i s ；C D 8 7 ；e x t r a m e d u l l a r yi n f i l t r a t i o n7研究论文监测可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体( s u P A R ) 在预测多发性骨髓瘤患者髓外受累及预后中的作用-JL- 刖舌尿激酶型的纤溶酶原激活物受体- - C D 8 7 ( u P A R ) 是一种特异性的可饱和的受体，通过糖化磷脂酰肌醇部分连接到细胞膜上，可识别细胞膜上的
12、纤溶酶，继之通过与尿激酶型的纤溶酶原激活物( u P A ) 结合，刺激细胞的移动和迁移。u P A R 和它的配体u P A 共同组成了与白细胞浸润、组织重建有关的蛋白水解系统。另外u P A R 可刺激细胞黏附、移动和增殖，肌动蛋白支架的重塑及新生血管形成，参与肿瘤细胞的浸润及转移过程。u P A R 在体液及肿瘤提取物中亦可以可溶性的形式存在( s u P A R ) ，其由C D 8 7 阳性的肿瘤细胞所释放。s u P A R 由胞模释放并通过G P I 锚清除。u P A 和u P A R 主要在血细胞包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞及激活的T 细胞中表达乜1 。最近的研究证实恶
13、性浆细胞表达u P A 和u P A R ，而且其表达代表了骨髓瘤细胞与骨髓微环境的相互作用过程，这一过程可影响重要的生物学事件，包括骨髓基质的降解、浆细胞的浸润及定居以及患者的临床评估。我们研究了4 0 例多发性骨髓瘤患者瘤细胞表面u P A R( C D 8 7 ) 的表达水平及它的可溶性形式s u P A R 的血清水平，分析了其血清水平与患者的I 临床特征、化疗效果、生存期之间的关系。旨在探讨监测s u P A R 血清水平在预测多发性骨髓瘤患者不良预后及髓外受累中的作用。研究论文材料与方法l 。病例：4 0 例，均为河北省沧州中心医院血液科自2 0 0 4 年3 月至2 0 0 6
14、年1 月收治的多发性骨髓瘤患者，男性2 3 例，女性1 7 例，年龄3 9 - 7 6 岁，其中I g G 型1 5 例，I g A 型1 4 例，轻链型4 例，I g D 型4 例，I g M 型3 例。所有患者入院后均行下列检查：血常规及末梢血分类、骨髓穿刺、免疫固定电泳( 送北京红十字朝阳医院临床医学实验中心) 、血和尿p 2微球蛋白、C 一反应蛋白、肾功能、全身骨骼X 线或E C T 检查、染色体分析、流式细胞仪检测C D 8 7 C D 5 6 C D 3 8 。入院后视其具体病情应用不同方案联合化疗，其中6 例患者应用M P ( 马法兰、泼尼松) 方案，3 4 例患者应用M 2 (
15、 卡莫司汀、环磷酰胺、马法兰、泼尼松) 方案，其中7 例患者后因治疗效果不佳更换V A D ( 长春新硷、阿霉素、地塞米松)方案，并配合改善骨质破坏或血液透析等辅助支持治疗。留取标本时均为非炎症期。2 实验方法：2 1 流式细胞仪测定及分析：采集骨髓瘤患者骨髓l m l 加入E D T A 抗凝管，充分混匀，取5 0 u l 入流式细胞仪试管1 2 3 ，一 分别加入2 0 u l鼠抗I g G l - F I T C I g G 2 一P EC D 4 5 一P e r C P , C D 3 4 F I T C C D 8 7 一P E ，C D 4 5 一P e r C P , C D
16、3 8 一F I T C C D 5 6 P E C D 4 5 P e r C P ( 试剂购自美国B D 公司) ，涡旋器充分混匀，闭光孵育2 0 - 4 0 分钟，加入红细胞裂解液2 m l ，( 1 份原液+ 9 份过滤后蒸馏水稀释) ，闭光孵育1 0 分钟至液体透亮，离心1 0 0 0 转5 分钟去上清，加入2 m l P B S 缓冲液洗涤，离心研究论文1 0 0 0 转5 分钟去上清，加入P B S 缓冲液3 0 0 u l 上流式细胞仪检测。所用流式细胞仪F A C SC a l i b u r ( 购自美国B D 公司) ，数据获取采用C e l lQ u e s t3 2 ，所用蒸馏水、配制的P B S 、红细胞裂解液均经过0 2 u m 过滤网过滤，应用鼠抗人I g G l F I T CI g G 2 P E C D 4 5 P e r C P 为对照设置样本非特异荧光，即阴性 对照
