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1、高效液相色谱在食品分析中的应用孙俊（武昌工学院食品科学与工程系，湖北武汉 430065 ）摘要： 参考多个相关文献，综合介绍高效液相色谱法在食品添加剂、食品中糖类、食品维生素、食品有机酸以及其他方面分离分析中的应用。基本反映高效液相色谱法在食品分析中的最新应用，并且阐述了独到的见解。关键字： 高效液相色谱法食品分析应用1. 前言高效液相色谱法是20 世纪 70 年代末发展起来的一种新型分离分析技术，随着科技的不断发展和进步， 目前已是被广泛应用的化学分析技术。它结合经典液相色谱的特点，引进气相色谱的理论， 采用高压泵、 高效固定相和高灵敏度检测器等技术，因此在当今社会的发展中占有重要地位。近年
2、来，高效液相色谱法凭借其分离速度快，分离效率高，选择性好，检测灵敏度高等特点，在食品分析中占据了主导地位，它不仅操作简便快速，而且还能为我们提供很多的有效信息，给我们的生活质量带来保障。2. 高效液相色谱法的分离原理1根据分离原理的不同，高效液相色谱法可分为以下几种主要类型：液- 液分配色谱法（LLC）化学健合相色谱法液- 固吸附色谱法离子交换色谱法空间排阻色谱法等。液- 液分配色谱法 （LLC）是基于样品组分中溶质在固定相和流动相之间的相对溶解度的不同而使组分在两相之间分配系数不同，进而分离的过程。化学健合相色谱法是把固定液的有机基团通过化学反应键合在担体的表面上，从而克服固定液流失的现象，
3、以达到分离的目的。液- 固吸附色谱法是根据样品中各组分吸附作用的不同而实现彼此分离的过程。离子交换色谱法是利用离子交换原理与液相色谱技术结合的方法来测定溶液中阳离子和阴离子的。空间排阻色谱法是把具有化学惰性的多孔物质作为固定相，使样品组分受固定相孔径大小的影响，将不同体积的分子进行分离的过程。3. 高效液相色谱法的应用食品不仅是人类生活的必需品，同时也是人类生命活动所需能量的源泉。食品的种类繁多，每种食品都具有不同的特性和营养成分。它们所含有的糖类脂肪氨基酸蛋白质都直接关系着人们的健康。在食品生产加工过程中，往往还会添加防腐剂色素甜味剂保鲜剂等化学物质。它们的含量过高也将引起人类的健康问题。此
4、外， 由于我们所处环境的日益恶化， 也会使食品沾染有害的微量元素来危害我们的身体健康。因此， 食品检测的重要性日益受到人们的关注。3.1 食品中添加剂的分析 2食品添加剂不仅种类繁多，功能各异，而且分类没有统一标准。因此，对添加剂的测定就提出了更加艰巨的要求。食品添加剂的测定同其他分析一样，首先要将其从复杂的混合物中分离出来， 分离后再针对待测物质的物理化学性质的不同来选择适当的分析方法。高效液相色谱在食品添加剂中的应用，不仅可以提高食品的质量以及营养价值，而且可以改善食品给我们带来的感观性质。食品添加剂可以防止食品变质，提高保藏期限， 给我们提供美味的口感。 我们可以用高效液相色谱法对甜味剂
5、中糖精钠的含量进行测定。制备糖精钠的标准储备液和糖精钠的标准使用液，将样品微热搅拌，并加入氨水（1+1）调试pH=7，以甲醇 -乙酸铵溶液（0.02mol/L）(5+95) 作为流动相制备色谱柱，取样品处理液和标准使用液各10uL，注入高效液相色谱仪进行分离，以标准溶液的保留时间为依据进行测定，以其峰面积求出样液中被测物质的含量。3.2 食品中糖类的分离分析3淀粉是一种多糖，它广泛存在于植物的根茎叶种子等组织中，是人类食物的重要组成部分， 同时也是供给人体热量的主要来源。淀粉是由葡萄糖单位构成的聚合体，其水解产物为单糖。我们可以用高效液相色谱法对小麦淀粉的水解产物进行分析。 3.3 食品中维生
6、素的分离分析维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必须从食物中获得的一类微量有机物，在人体的生长代谢和发育过程中发挥着重要的作用。在测定脂溶性维生素时，通常要先用皂化法处理样品， 用水洗去除类脂物，然后用有机溶剂提取脂溶性维生素，浓缩后溶于适当的溶剂后测定。3.4 食品中有机酸的分离 4食品中的有机酸是食品中酸味的主要来源，食品中有机酸的种类含量与构成对食品的味道有很大的影响。 因此食品中有机酸的定性与定量分析不仅对食品营养研究意义重大，而且在食品生产过程的质量管理中也必不可少。HPLC应用于有机酸的测定时，要先将食品样品匀浆提取离心后，样液经0.3um 滤膜抽滤，以（NH4）2HPO4 H3
7、PO4缓冲液（ pH=2.7）为流动相，用高效液相色谱法在C18色谱柱上分离，在波长210nm处经紫外检测器检测，用峰高或峰面积表示的标准曲线测定有机酸的含量。 3.5 在食品中调味品的分析高效液相色谱法也可以被用于食物调味品的分离分析。如J.D.BARANOWSKI 报导了利用高效液相色谱法分离生姜辣味成分的方法 5。又如 Bbathnanathic M 和 BuckleH.A报导了使用高效液相色谱法测定胡椒中胡椒碱含量的方法6。 3.6 在其他食品分析中的应用HLPC不仅仅是应用在以上领域，还可以广泛用于食品药品残量的检测，食品中违禁成分的检测以及食品中营养成分的分离与分析。彭锦峰7建立了
8、用高效液相色谱测定食用香菇中甲醛的方法。王帆等8键立了用高效液相色谱检测保健食品中大豆异黄酮的方法。这些方法的研究和实验，使高效液相色谱在食品中的应用得以发展，为日后高效液相色谱在食品分离与分析中的广泛应用提供了依据。 4. 展望高效液相色谱法作为一种高效分析方法，它不仅在食品分析中有这广泛的应用，而且在石油化工， 有机合成等领域也有着很重要的地位。随着科学技术的不断发展和进步，它与计算机的联合使用将使它的应用领域更加广泛，使它给我们带来的效益更加丰厚。参考文献1任晓棠温红珊仪器分析技术武汉：华中科技大学出版社.2010.249 251 2刘绍食品分析与检测武汉：华中科技大学出版社.2011.223 224 3李启隆胡劲波食品分析科学北京：化学工业出版社.2011 4刘绍食品分析与检测武汉：华中科技大学出版社.2011.129 131 5J.D.BARANOWSKI;Jchromatogr,1985.319.471-474 6Rathnanathic M.and Buckle H.A.J.chromatogr.1983.264.316-320 7彭锦峰，刘景富，吕爱华，等.HLPC法测定食用香菇中的甲醛J 分析试验室， 2005.24(4)57-59 8王帆，胡小钟，匡建军高效液相色谱法检测保健食品中大豆异黄酮含量J 分析测试学报，2003.22(6)66-69
