发酵芝麻饼粕的抗氧化功能及特征成分研究

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1、江苏大学博士学位论文发酵芝麻饼粕的抗氧化功能及特征成分研究姓名:邵元龙申请学位级别:博士专业:食品科学指导教师:董英20090606江苏大学博士学位论文过氧化脂质含量,且S C F E 的作用效果优于S C E 。主要结果为:诱导模型小鼠体内的抗氧化能力和抗氧化酶活性性显著下降,氧化的代谢产物量显著提高;灌胃S C F E 和S C E 后,显著降低总甘油三酯( T G ) 、总胆固醇( T C ) 、低密度脂蛋白胆固醇( L D L C ) 及动脉硬化指数( A 1 1 ,A 1 2 ) ,显著提高高密度脂蛋白胆固醇( H D L C ) 含量;此外还显著提高小鼠血清的总抗氧化能力( T A

2、 C ) 和超氧化物歧化酶的活性( S O D ) ,降低脂质过氧化物丙二醛( M D A ) 含量,在剂量范围内,呈现显著的量效关系,给药S C F E 的小鼠血清中各指标均显著优于S C E ;比较了预防组和调节组中相同指标的相关系数,发现S C F E 和S C E 对高脂高胆固醇小鼠的预防效果要优于调节的效果。高血脂小鼠血脂水平和动脉硬化指数与其氧化抗氧化水平密切相关,二者相互促进。( 4 ) 对S C F E 中的特征物质P x 进行分离纯化和鉴定。S C F E 经过乙酸乙酯萃取,硅胶柱层析得到纯化的P x ,得率分别为2 7 1 9 和1 4 3 1 硅胶柱色谱分离纯化P x 用

3、石油醚乙酸乙酯= 3 1 和1 1 两种比例洗脱剂洗脱;硫酸显色后,薄层层析( T L c ) 中P x 的迁移率R f 为0 2 0 ,紫外扫描为单一峰;P x 两个特征吸收波长分别为2 2 8n n l 和2 8 7r l m lH P L C 中其保留时间为1 3 5r a i n ;L C M S 定性检测,分子量为3 7 0 。0 。该特征物质被鉴定为芝麻素酚,分子组成为:C 2 0 H 1 8 0 7 。( 5 ) 对芝麻素酚体外抗氧化活性进行了研究。芝麻素酚具有抑制大鼠肝脏微粒体自发及H 2 0 2 诱导的脂质过氧化作用。在抑制自发性肝脏微粒体脂质过氧化作用时,芝麻素酚浓度从1

4、0p 咖L 上升至1 0 0 鹏r m L 时,S O D 酶活性从1 3 0 7m g p r o t 提高到1 9 8 3u m g p r o t ,M D A 抑制率从2 1 7 提高到6 1 8 ;在亚油酸-吐温乳化系统和亚油酸乙醇系统中,芝麻素酚均具有抑制亚油酸脂质氧化的作用,在乳化系统中,芝麻素酚的抑制效果优于B H T ;浓度为2 0 肛m L 时,芝麻素酚清除D P P H 自由基的效果与5 咖L B H T 和V c 相当。通过生物转化芝麻饼粕中木脂素的研究,为芝麻饼粕深度加工和利用奠定了基础。利用微生物发酵技术,对芝麻饼粕中木脂素进行了生物转化,并分离纯化得到具有强抗氧化

5、活性的特征物质芝麻素酚,为进一步开发利用芝麻饼粕提供理论依据。关键词:芝麻饼粕,木脂素,发酵,优化,抗氧化活性,酱油曲霉,芝麻素酚I IA B S T R A c TA B S T R A C TT h er e s o u r c eo fs e s a m ei sv e r ya b u n d a n ti no u rc o u n t r y , a n dt h eb y - p r o d u c to fs e s a m ep r o c e s s i n gi sm o r et h a n5 0t h o u s a n dt o n sa n n u a l l y

6、 T h es e s a m ec a k ec o n t a i n s4 0 - 6 0 p r o t e i na n d0 5 1 O l i g n a n s ,a n di sa l w a y su s e da sf e e do rm u c k ,a n dt h er e s e a r c ho fd e e pp r o c e s s i n ga n dc o m p r e h e n s i v eu t i l i z a t i o no fs e s a m ec a k ei sf a ra w a yf r o mS U C C E S S

7、I nt h i sp a p e r , t h ef i n a lo b j e c t i v ei st oi m p r o v et h ea n t i o x i d a n ta c t i v i t yo fs e s a m ec a k eb yf e r m e n t a t i o na n dt om a k ef u l lu s eo fs e s a m ec a k er e s o u r c e s W eo p t i m i z e dt h ec o m p o s i t i o no ff e r m e n t a t i o ns

8、u b s t r a t ea n dt h ec o n d i t i o no fe t h a n o le x t r a c t i o ni nf e r m e n t i n gs e s a m ec a k ew i t hA s p e r g i l l u ss o j a e ,t h ea n t i o x i d a n ta c t i v i t yi nv i t r oa n dd e c r e a s i n gh y p e r l i p i d e m i ai nr i v ew e r es t u d i e d Ac h a r

9、a c t e r i s t i ci n g r e d i e n tW a si s o l a t e da n dp u r i f i e df r o ms e s a m ec a k ef e r m e n t e de x t r a c ta n dn a m e da ss e s a m i n o lt h r o u g hs t r u c t u r a la n a l y s i s T h ea n t i o x i d a n ta c t i v i t yo fs e s a m i n o lw a ss t u d i e d T h e

10、m a j o rr e s u l t sa r ea sf o l l o w s :( 1 ) T h ef e r m e n t a t i o ns u b s t r a t ec o m p o s i t i o na n de x t r a c t i o nc o n d i t i o no fi n c r e a s i n ga n t i o x i d a n ta c t i v i t yw e r eo p t i m i z e di ns e s a m ec a k eb yA s p e r g i l l u ss o j a e T h e

11、o p t i m i z e df e r m e n t a t i o ns u b s t r a t ec o m p o s i t i o nw e r ea sf o l l o w s :a m o u n to fg l u c o s e ,a m m o n i u r ns u l f a t ea n dw h e a tb r a ni ns u b s t r a t ew e r e1 9 ,1 6 a n d2 6 r e s p e c t i v e l y ,a n df e r m e n t a t i o nt e m p e r a t u r

12、 ea n dt i m ew e r e2 8 a n d12 0hr e s p e c t i v e l y T h eo p t i m i z e de x t r a c t i o nc o n d i t i o n sw o r e :e t h a n o lc o n c e n t r a t i o n6 0 ,r a t i oo fs o l u t i o nt om a t e r i a l16m L g ,t i m e12 0m i n ,t e m p e r a t u r e5 0 。Ca n dr o t a r ys p e e d15 0r

13、 m i n T h ep e a ka r e aa n dh e i g h to fc h a r a c t e r i s t i cm a t e r i a lf r o mo p t i m u m s e s a m ec a k ef e r m e n t a t i o ne x t r a c t i o n ( S C F E ) W a si n c r e a s e db y8 8a n d51t i m e st h a nt h a to fs e s a m ec a k ee x t r a c t i o n ( S C E ) ,r e s p e

14、 c t i v e l y T h eD P P Hr a d i c a ls c a v e n g i n ga c t i v i t yW a si n c r e a s e df r o m5 3 4 t o8 7 9 ,a n dt h et o t a lp h e n o lc o n t e n tw a si n c r e a s e df r o m1 8 5 t 02 2 3 ( 2 ) T h ea n t i o x i d a n ta c t i v i t yo fS C F Ei nv i t r oW a ss t u d i e d ,w h i

15、 c hi sb e t t e rt h a nS C E T h et o t a la n t i o x i d a n tc a p a c i t y ( T A C ) a n dr e d u c t i o na b i l i t yo fS C F Ea c c e n t u a t e dw i t hc o n c e n t r a t i o ni n c r e a s i n gi nt h er a n g eo fO 1 1 0m g m L ,a n dt h ea c t i v i t ys i g n i f i c a n t l yi n c

16、 r e a s e da t0 5m g m L T h eD P P Hr a d i c a ls c a v e n g i n ga c t i v i t yo fS C F Ea t0 5m g m La n d1 0m g m LW a s7 2 7 a n d8 7 5 ,r e s p e c t i v e l y , w h i l et h a to fS C EI I I江苏大学博士学位论文w a s5 3 7 a n d7 0 6 ,r e s p e c t i v e l y T h e0 2 一s c a v e n g i n ga b i l i t yo fS C F Ea t1 0m g m LW a s2 0 h i g h e rt h a nt h a to fS C E T h ei n h i b i t i o nr a t i oo fS C F Eo nt h

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