《1红曲菌M22 pksCT基因缺失株的构建2红色红曲菌蛋白质组学研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《1红曲菌M22 pksCT基因缺失株的构建2红色红曲菌蛋白质组学研究（50页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、南昌大学硕士学位论文1.红曲菌M22 pksCT基因缺失株的构建;2.红色红曲菌蛋白质组 学研究姓名：万成申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：许杨20081215A B S T R A C TA BS T R A C TM o n a s c u si sak i n do ff i l a m e n t o u sf u n g u s ，w h i c hc a np r o d u c ed i f f e r e n tk i n d so fm e t a b o l i t e ss u c ha sm o n a s c u sp i g m e n t s ，M o n
2、 a c o l i nKe r g o s t e r o l ，a n dS Oo n H o w e v e r , d u et ot h ep r o d u c t i o no fc i t r i n i ni nM o n a s c u s ，i ti sc a l l e di nq u e s t i o na b o u tt h es a f e t ye v a l u a t i o no fM o n a s c u sp r o d u c t I nt h i sp a p e r ，ag e n e t i ce n g i n e e r i n gs
3、 t r a i nw i t ht h ed i s r u p t i o no f p b C Tg e n ew a sc o n s t r u c t e db yK n o c k o u t ，i no r d e rt op r o v i d ec o n s u l t a t i o nf o rc o n s t r u c t i n gi n d u s t r i a l i z e ds t r a i n A c c o r d i n gt ot h ep r o t e o m i c sm e t h o d ，t h ep r o t e o m e
4、o fM o n a s c u sa n di t sg e n e t i ce n g i n e e r i n gs t r a i nw c r cb a s i c a l l yr e s e a r c h e d T h em a j o rf i n d i n g sw e r ee x p o u n d e da sf o l l o w s ：1D i s r u p t e dt h ep k s C Tg e n ei nM o n a s c u sb yg e n eK n o c k o u t , f i l t r a t e dt h ec o n
5、 v e r t e rb yu s i n gH p hr e s i s t a n c ea n dP C Rw i t hg D N A I th a db e e np r o v e db yH P L Ct h a tt h ep r o d u c t i o no fc i t r i n i nW a sr e d u c e di nt h es t r a i nw i t ht h ed i s r u p t i o no f p k s C T 2E x t r a c t e dt o t a lp r o t e i ni nM o n a s c u sr
6、u b e rb yT C A - a c e t o n e E s t a b l i s h e dt h et w o - d i m e n s i o n a le l e c t r o p h o r e s i ss y s t e mb yc o m p a r i n ga n da n a l y z i n gt h ei n f e c t i o nc a u s e db yd i f f e r e n tk i n d so fm e d i u m s ，c o m p o n e n to fl y s i sb u f f e ra n dt h ec
7、 o n d i t i o no fr e h y d r a t i o n 3A n a l y z e dt h ed i f f e r e n c eo fp r o t e i ne x p r e s s i o nb e t w e e nas t r a i no fM o n a s c u sr u b e rw i t hd i s r u p t i o no fp k s C Ta n di t sw i l dt y p e ，t h ei n f e c t i o nt ot h ep r o t e i ne x p r e s s i o nh a db
8、 e e nb a s i c a l l ys t u d i e d K e yw o r d s ：M o n a s c u s ；p k s C Tg e n e ；K n o c k - o u t ；p r o t e o m i c s ；t w o - d i m e n s i o n a le l e c t r o p h o r e s i sI V缩略语缩略语A m po B 6b pC H A P SD N AE D ，I = Aa p hH P L CF口GK bL BM E SM SM S GO DP A G EP C R英文名A m p i c i l l
9、i nD e g r e eB a u m eB a s eP a i r缩略语A b b r e v i a t i o n s中文名氨苄青霉素波美度碱基对3 一【( 3 一C h o l a m i d o p r o p y l ) - d i m e t h y l a m m o n i3 - ( 3 - 胆酰氨基丙基) 二甲氨基- 丙o 】1 - p r o p a n es u l f o n a t e磺酸3 - 【( 3 - C h o l a m i d o p r o p y l ) - d i m e t h y l a m m o n i3 ( 3 一胆酰氨基丙基)
10、二甲氨基- 丙。卜1 - p r o p a n es u l f o n a t ei n n e rs a l t磺酸内盐D e o x y d b o n u c l e i ca c i d脱氧核糖核酸E t h y l e n ed i a m i n et e t r a a c e t i ca c i d乙二胺四乙酸潮霉素H i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o 鲫h y 高效液相色谱I s o e l e c t r i c f o c u s i n g等电聚焦I m m o b i l i z e dp
11、Hg r a d i e n t固相化p H 梯度K i l o b 嬲ep a i r sL u r i a B e r t a n im e d i u mM a l te x t r a c ts u c r o s em e d i u mM a s ss p e c t r o m e t r yM o n o s o d i u mG l u t a m a t eo p t i c a ld e n s i t yP o l y a c r y l a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i sP o l y m e r a s ec h
12、a i nr e a c t i o n千碱基对溶菌肉汤培养基麦芽汁蔗糖培养基质谱单谷氨酸钠光密度聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合酶链式反应缩略语P E GP K sP T CS D SS T C1 1 8 3T e M E D秭SV h rY E SP o l y e t h y l e n eG l y c o lP o l y k e t i d eS y n t h a s e聚乙二醇聚酮体合成酶P o l y e t h y l e n eG l y c o l T r i s C a l c i u m 聚7 , - - 醇- T r i s 一氯化钙溶液c h l o r i d eS o
13、 d i u md o d e c y ls u l f a t e十二烷基磺酸钠S o r b i t o l - T r i s C a l c i u mc h l o r i d e山梨醇T r i s 氯化钙溶液T e r r i f i cB r o t hm e d i u m丰富肉汤培养基N ，N ，N ，N - T e t r a m e t h y l e t h y l e n e d i a m i n eN ，N ，N ，N 一四甲基二乙胺T r i s ( h y d r o x y m e t h y l ) a m i n o m e t h a n e三羟甲基
14、氨基甲烷V o l th o u r伏时数Y e a s te x t r a c ts t l c l “ o s em e d i u m酵母浸膏蔗糖培养基I I学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌文学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名( 手写) ：乃文签字日期：2 “ 舻年，2 月l ，日学位论文版权使用授权书本学位论文作者
15、完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌文学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。( 保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名( 手写) ：彳签字日期：舢妒年，z 月t l “ E t化下日，也，X月写、乙鹅、厶0年名勺叫Il姑鹘L导玑，期日字整第1 章文献综述第1 章文献综述1 1 红曲菌及其次级代谢产物1 1
16、1 红曲菌红曲菌( M o n a s c u s ) 是丝状真菌的一种，在分类学上属于真菌门( E u m y o c p h y t a ) ，子囊菌、_ q E I - ( A s c o m y c o t a ) ，不整囊菌纲( P l e c t o m y c e t e s ) ，散囊菌目( E u r o t i a l e s ) ，红曲科( M o n a s c a c e a e ) ，红曲属( M o n a s c u sV a nT i e g h a m ) t 1 1 ，其主要种类有安卡红曲菌( Ma n k a ) ，红曲菌( Mp u r p u r e u s ) ，红色红曲菌似t u b e r ) 和烟色红曲菌( Mf u l i g i n o s u s ) 等。红曲菌能产生淀粉酶、麦芽糖酶、蛋白酶、柠檬酸、琥珀酸等物质，多数种还能产生颜色鲜艳的红曲色素，在食品生产、酿酒、制醋等方面有着广泛的用途。我国早在宋元时期就有以红曲加工食品已达到防腐作用的记载，利用
