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1、 武汉普诺赛生命科技有限公司 网站： 全国免费服务电话：400-650-3656 邮箱： 大鼠椎间盘纤维环细胞大鼠椎间盘纤维环细胞 Cat NO.: CP-R200 一、产品简介一、产品简介 1. 产品名称产品名称：大鼠椎间盘纤维环细胞 2. 组织来源组织来源：椎间盘组织 3. 产品规格产品规格：5 105cells/T25细胞培养瓶 4. 细胞简介细胞简介： 大鼠椎间盘纤维环细胞分离自椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨
2、构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚，而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带，后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3，其外层的细胞呈梭型，主要属于纤维细胞，内层细胞呈圆形，主要属于软骨细胞。在培养的情况下，用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现，它们的核较圆，核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多，为椭圆形，有的可看到双层单位膜，由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒，纤
3、维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛，保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少，纤维环的生物性能就会减弱，椎间盘开始退变。 本公司生产的大鼠椎间盘纤维环细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5105cells/瓶；细胞经型胶原蛋白、型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 5. 培养基信息培养基信息： DMEM-F12、FBS、软骨细胞生长添加剂、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、S
4、treptomycin等 我们推荐使用我们推荐使用Procell大鼠椎间盘纤维环细胞大鼠椎间盘纤维环细胞专用专用完全完全培养基培养基（产品货号：（产品货号：CM-R200）作为体外培养作为体外培养大鼠椎间盘纤维环细胞大鼠椎间盘纤维环细胞的培养基。的培养基。 二、细胞培养状态二、细胞培养状态 发货时发送细胞电子版照片 三、使用方法三、使用方法 武汉普诺赛生命科技有限公司 网站： 全国免费服务电话：400-650-3656 邮箱： 在在Procell技术部标准操作流程下，技术部标准操作流程下，大鼠椎间盘大鼠椎间盘纤维环细胞可传纤维环细胞可传5代左右，随着细胞代左右，随着细胞传代次数的增加，细胞
5、将渐渐失去软骨细胞的特征，传代次数的增加，细胞将渐渐失去软骨细胞的特征，3代以内细胞状态最佳代以内细胞状态最佳；建议您收；建议您收到细胞后到细胞后尽快进行相关实验。尽快进行相关实验。 客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。 1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。 2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 3. 细胞传代细胞传代 1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次； 2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回
6、缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化； 3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2-1:3适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养； 4) 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。 四、注意事项四、注意事项 1. 培养基于4条件下可保存3-6个月。 2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。 3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。 4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和Procell技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。 5. 该细胞只可用于科研。 备注：备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考
