病理技术专业知识1

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1、（一）单纯固定液（一）单纯固定液 甲醛：甲醛： 1浓度：40%，气体 2渗透力强，固定均匀，组织收缩小，渗透力强，固定均匀，组织收缩小， 3不能使白蛋白和核蛋白沉淀不能使白蛋白和核蛋白沉淀 4保存脂类，必须用冷冻切片。是糖的保护剂保存脂类，必须用冷冻切片。是糖的保护剂 5可固定高尔基体，线粒体重铬酸钾重铬酸钾 1. 浓度：1%-3%水溶液，有毒有毒，橘红色结晶 2. 穿透速度快，几乎不收缩，经乙醇脱水后明显收缩，穿透速度快，几乎不收缩，经乙醇脱水后明显收缩， 3. 未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀，但可使蛋白质变为脂溶剂。未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀，但可使蛋白质变为脂溶剂。 酸化后可使蛋

2、白质沉淀，此时染色体可被保存，但线粒体破坏。酸化后可使蛋白质沉淀，此时染色体可被保存，但线粒体破坏。 4. 固定高尔基体和线粒体有良好效果。 5. 酸性染料着色好，碱性染料着色差 6. 固定的组织需经流水冲洗 12-24h，或用亚硫酸盐洗涤。苦味酸苦味酸 1. 黄色结晶体，是一种强酸，易燃易爆，配成饱和溶液储藏 2. 穿透慢，组织收缩明显，无明显硬化穿透慢，组织收缩明显，无明显硬化。 3. 能沉淀一切蛋白质能沉淀一切蛋白质 4对脂肪和类脂无固定作用对脂肪和类脂无固定作用。 5. 可软化皮肤和火棉胶，不宜用火棉胶包埋不宜用火棉胶包埋 6. 固定时间不宜超过 24h， 7. 固定的组织应尽快放入

3、70%乙醇，滴加饱和碳酸锂或浓氨水，有助于除去苦 味酸固定产生的黄色。升汞升汞 1. 浓度为 5%-7%的水溶液，针状结晶 2穿透力低，只宜固定薄片组织，单独应用组织收缩明显穿透力低，只宜固定薄片组织，单独应用组织收缩明显 3, 对蛋白质有固定作用，对蛋白质有固定作用， 4. 对类脂和糖类无固定作用对类脂和糖类无固定作用 5. 临用时加冰醋酸醋酸醋酸 1. 刺激性气味的无色液体，低于 15为冰醋酸 5%的醋酸 PH 为 2-8，可抑制细菌和酶的活性，可防止自溶。 2. 穿透力强穿透力强 3 不能沉淀白蛋白，球蛋白，但能沉淀核蛋白不能沉淀白蛋白，球蛋白，但能沉淀核蛋白 4 不能固定脂肪和内酯，不

4、能保存糖不能固定脂肪和内酯，不能保存糖 5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸，可较好的保存染色体 6, 缺点是组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白铬酸铬酸 1. 为三氧化铬的水溶液，浓度 0.5%-1%，强氧化剂，不能与乙醇，甲醛等混 合2 穿透力弱，一般组织需固定穿透力弱，一般组织需固定 12-24h，固定的组织有收缩，固定的组织有收缩， 3 能沉淀蛋白质，核蛋白固定良好。能沉淀蛋白质，核蛋白固定良好。 4 对脂肪无固定作用对脂肪无固定作用 5 固定线粒体和高尔基复合体 6. 宜避光保存，以防蛋白质溶解。宜避光保存，以防蛋白质溶解。 7. 必须彻底流水冲洗（24h） 。锇酸（

5、锇酸（四氧化锇） 1.淡黄色结晶，剧毒剧毒，浓度 1%-2%，强氧化剂，不能与乙醇，甲醛等混合 2. 渗透力极弱，易使组织变硬，延长固定时间，组织的脆性增加，对染色不利渗透力极弱，易使组织变硬，延长固定时间，组织的脆性增加，对染色不利。3. 固定均匀，不沉淀蛋白质。固定均匀，不沉淀蛋白质。 4为脂类固定剂为脂类固定剂 5. 适用于线粒体和内质网的固定适用于线粒体和内质网的固定 6. 为电镜研究的必须固定剂。 7. 固定目的不同，配方和浓度根据需要改变 8. 固定后对碱性染料亲和力强，细胞核的染色效果好 9. 应在临用前前几天配制以保证充分溶解。丙酮丙酮 1易挥发，易燃的无色液体，可与水，醇，氯

6、仿，醚混合 2. 渗透力强，对核的固定差渗透力强，对核的固定差 3. 可使蛋白质沉淀可使蛋白质沉淀 4. 作用基本与乙醇相同，但对糖原无固定作用作用基本与乙醇相同，但对糖原无固定作用 5广泛用于酶组织化学中各种酶的固定乙醇乙醇 1. 无色液体， ，还原剂，可与水无限相溶，有固定兼脱水作用用于固定的浓度为 80%-95% 2渗透力弱，固定速度较慢，易使组织变脆，无水乙醇固定时，穿透速度快，渗透力弱，固定速度较慢，易使组织变脆，无水乙醇固定时，穿透速度快， 渗透力差，使组织收缩渗透力差，使组织收缩 3.，能沉淀白蛋白，球蛋白，核蛋白，能沉淀白蛋白，球蛋白，核蛋白 4. 用于糖原的固定用于糖原的固定

7、 5. 50%以上乙醇可溶解脂肪和类脂体，并可溶解血红蛋白，对其他色素也有破 坏。三氯醋酸三氯醋酸1. 为无色易潮解的结晶体，水溶液为强酸性，易溶于醇和醚，应密封保存2. 也是一种良好的脱钙剂（二）混合固定液（二）混合固定液B-5 固定液（醋酸钠固定液（醋酸钠-升汞升汞-甲醛）甲醛）1多用于固定淋巴组织，多用于固定淋巴组织，2. 染色前应进行脱汞处理3. 配方：无水醋酸钠 1.25g，升汞 6g，甲醛 10ml，蒸馏水 90ml.Bouin 液液 1. 有一定毒性有一定毒性，应避免吸入或与皮肤接触 2. 固定液偏酸，对抗原有一定损害，使组织收缩，不适宜标本的长期保存不适宜标本的长期保存 3.

8、固定效果好，组织细胞结构完整。细胞核着色鲜明，细胞质着色较差。细胞核着色鲜明，细胞质着色较差。 4. 对脂肪固定效果好，尤适用于含脂肪的淋巴结，乳腺组织和脂肪瘤标本 5. 适用于结缔组织染色，尤其是三色染色更为理想适用于结缔组织染色，尤其是三色染色更为理想。 6. 配方：饱和苦味酸水溶液：甲醛水溶液：冰醋酸=15：5:：1Carnoy 液液 1有防止乙醇的硬化和收缩作用，增加渗透力，外膜致密的组织可用其固定 2. 固定速度快，3mm 厚组织块 1h 内即可固定，大块组织不超过 4h。 3，固定细胞质和细胞核，对于染色体固定佳染色体固定佳，显示显示 DNA，RNA 效果好效果好。 4. 常用于糖

9、原和尼氏体的固定常用于糖原和尼氏体的固定 5不能保存脂类，不适用脂肪染色。不能保存脂类，不适用脂肪染色。 6. 配方：冰醋酸 10ml，氯仿 30ml，无水乙醇 60ml Muller 液液 1. 作用缓慢，固定均匀，组织收缩小 2. 多用于媒染和硬化神经组织多用于媒染和硬化神经组织 3. 固定过程中，需常更换新鲜的液体固定过程中，需常更换新鲜的液体 4.配方：重铬酸钾 2-2.5g，硫酸钠 1.0g，蒸馏水 100mlOrth 液液 1. 渗透力强，组织收缩小 2. 应临时配置，在暗处固定应临时配置，在暗处固定，固定 24h 左右，固定液变为黑色时不可用，固定后流 水冲洗 12-24h。 3

10、. 固定胚胎组织，神经组织。脂肪组织固定胚胎组织，神经组织。脂肪组织 4. 配方：重铬酸钾 2.5g，硫酸钠 1.0g，蒸馏水 100ml，37%-40%的甲醛 10ml（用时加 入）PFG 液液 1. 适用于多种肽类抗原的固定，多用于免疫电镜研究 2. 对细胞抗原性和结构保存好 3. 配方：对苯醌 20g，多聚甲醛 15g，25%戊二醛 40ml，0.1mol/L 二甲砷酸钠缓冲液 1000ml。PLP 和和 PLPD 液液 1. 均含过碘酸盐 2. 对细胞抗原性和结构保存好，适用于富含糖类组织的固定适用于富含糖类组织的固定Rossman 液液 1. 对糖原固定好对糖原固定好，固定 12-2

11、4h，用 95%的乙醇洗 2. 配方：无水乙醇苦味酸饱和液 90ml，甲醛 10mlZenker 液液 1用于固定多种组织，对于病毒包涵体固定效果也较好 2. 使细胞核和细胞质染色清晰，常用于三色染色，对免疫球蛋白染色最好对免疫球蛋白染色最好 3. 不适用含血量较多的标本不适用含血量较多的标本，如充血的脾脏和肺梗死等标本 4.不能用金属容器盛放，且固定后不能用金属镊夹取。4%多聚甲醛多聚甲醛-0.1mol/L 磷酸缓冲液磷酸缓冲液 1. 适用于光镜免疫组织化学法， 2. 动物先用此液灌注固定，取材后再用该液浸泡固定 3. 可用于标本的较长时间的保存4%多聚甲醛多聚甲醛-磷酸二钠磷酸二钠/氢氧化

12、钠氢氧化钠 1. 适用于光镜和电镜免疫组织化学法， 2. 用于免疫电镜时，应加入新鲜配置的戊二醛。使其终浓度为 0.5-1% 3. 性质温和，可长期保存组织。 4配置后 PH 值应调至 7.2-7.4, 4 保存甲醛甲醛-钙液钙液 . 适用于固定脂肪组织和组织化学染色乙醇乙醇-甲醛液甲醛液有脱水作用，对皮下组织中肥大细胞的固定好乙醚乙醚-乙醇液乙醇液渗透性强，固定效果好，用于细胞涂片的固定。去除甲醛色素：去除甲醛色素：Verocay 液液 脱汞盐结晶：脱汞盐结晶： Lugol 液液 脱黑色素：脱黑色素： 0.25%高锰酸钾高锰酸钾蓝化作用：蓝化作用： 稀氨水稀氨水组织的脱水组织的脱水（一）乙醇

13、（一）乙醇乙醇脱水的浓度：乙醇脱水的浓度：70%80%90%95%100% 进行糖原和尿酸盐结晶染色的标本应直接用无水乙醇固定，更换一次无水进行糖原和尿酸盐结晶染色的标本应直接用无水乙醇固定，更换一次无水 乙醇脱水即可。乙醇脱水即可。 （二）丙酮（二）丙酮与乙醇作用相似，但对组织块的收缩作用比乙醇更严重，快速脱水或固定与乙醇作用相似，但对组织块的收缩作用比乙醇更严重，快速脱水或固定 兼脱水时应用，脱水时间为兼脱水时应用，脱水时间为 1-3h. 丙酮可作为染色后的脱水剂，用于丙酮可作为染色后的脱水剂，用于 DNA 和和 RNA 染色。染色。 （三）异丙醇（三）异丙醇是乙醇的良好替代品，不含水，可

14、代替无水乙醇使用，对火棉胶和染料不溶，是乙醇的良好替代品，不含水，可代替无水乙醇使用，对火棉胶和染料不溶， 因此不能用于火棉胶包埋和染料配制。因此不能用于火棉胶包埋和染料配制。 （四）正丁醇和叔丁醇（四）正丁醇和叔丁醇（电镜标本制作时常用作中间脱水剂。（电镜标本制作时常用作中间脱水剂。 ）正丁醇：无色液体，脱水能力较弱，可与水，乙醇和石蜡混合，因此，这正丁醇：无色液体，脱水能力较弱，可与水，乙醇和石蜡混合，因此，这 种这种脱水的组织块可直接浸蜡包埋，种这种脱水的组织块可直接浸蜡包埋， 叔丁醇：无毒，叔丁醇：无毒，可与水，乙醇和二甲苯混合，与正丁醇相比，它不易使组可与水，乙醇和二甲苯混合，与正丁

15、醇相比，它不易使组 织收缩或变硬，而且脱水后可不经透明直接浸蜡，织收缩或变硬，而且脱水后可不经透明直接浸蜡， （五）还氧已环（五）还氧已环 还氧已环能于水和乙醇混合，也能溶解石蜡，可代替乙醇进行脱水，也可还氧已环能于水和乙醇混合，也能溶解石蜡，可代替乙醇进行脱水，也可 代替二甲苯进行透明，不引起组织收缩和硬化，代替二甲苯进行透明，不引起组织收缩和硬化，用于制备植物标本较好，用于制备植物标本较好，易挥易挥 发，价格昂贵。发，价格昂贵。 （六）四氢呋喃（六）四氢呋喃易于水，乙醇，丙醇和苯类混溶，对组织渗透快，易挥发，无毒，易于水，乙醇，丙醇和苯类混溶，对组织渗透快，易挥发，无毒，可用作封可用作封

16、片溶剂，对染料不溶。片溶剂，对染料不溶。 （七）环己酮（七）环己酮 环己酮无毒，环己酮无毒，与苯，二甲苯，氯仿和石蜡混合，可代替无水乙醇脱水后直与苯，二甲苯，氯仿和石蜡混合，可代替无水乙醇脱水后直 接浸蜡，组织块不会变硬。接浸蜡，组织块不会变硬。 （八）松脂醇（八）松脂醇可取代无水乙醇用作脱水剂和随后的浸透与包埋。可取代无水乙醇用作脱水剂和随后的浸透与包埋。树脂包埋法适用于：不脱钙骨髓活检组织，肝、肾穿刺活检和淋巴结组织等树脂包埋法适用于：不脱钙骨髓活检组织，肝、肾穿刺活检和淋巴结组织等。常用的特殊染色技术常用的特殊染色技术 一一 结缔组织染色结缔组织染色 Mallory 三色三色 Masson 三色三色 胶原纤维，网状纤维胶原纤维，网状纤维 蓝色蓝色 绿色绿色 软骨，粘液，淀粉样软骨，粘液，淀粉样 淡蓝色淡蓝色 神经胶质纤维，肌纤维神经胶质纤维，肌纤维 红色红色