分子生物学整理资料

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1、第一章第一章 1、证明、证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是什么是遗传物质的两个关键性实验是什么？ 1944 年肺炎球菌转化实验 1952 年噬菌体侵染实验 2、请阐明、请阐明 1953 年年 Watson 和和 Crick 提出的提出的 DNA 双螺旋模型内容。双螺旋模型内容。(1) 主链：由二条相互平行而走向相反的脱氧核苷酸链围绕一共同中轴以右手方向盘旋， 形成双螺旋构型。主链处于螺旋的外则。(2) 碱基对：碱基位于螺旋的内则，碱基对以氢键维系，A 与 T 间形成两个氢键，G 与 C 间形成三个氢键。碱基平面与螺旋中轴垂直。(3) 大沟和小沟：大沟和小沟分别指双螺旋表面凹下去的较大沟

2、槽和较小沟槽。(4) 结构参数：螺旋直径 2nm；螺旋周期包含 10 对碱基，螺距 3.4nm；相邻碱基对平面的 间距 0.34nm。 3、请说明核小体的结构组成。、请说明核小体的结构组成。 核小体是由核心颗粒（H2A、H2B、H3、H4 各两个分子生成的八聚体）和连接区 DNA（大约 200bpDNA）组成。DNA 双螺旋沿八聚体核心的短轴旋绕 1.75 圈，而 H1 则在 核小体的外面。每个核小体只有一个 H1。 4、原核生物与真核生物基因组的区别。、原核生物与真核生物基因组的区别。第二章第二章 1、原核与真核生物中的、原核与真核生物中的 DNA 聚合酶有哪些聚合酶有哪些?功能如何？功能如

3、何？DNApol功能：a 53聚合作用：DNApol的聚合作用主要用于 DNA 的修复和 RNA 引物的替换。b 53外切酶活性： 冈崎片段 5末端 RNA 引物的去除依赖此种外切酶活性。c 35外切酶活性：主要功能是校对作用DNApol： 具 a b 不具 c DNApolIII：DNA 聚合酶 III 是细胞内 DNA 复制所必需的酶，也是主要的酶 真核：DNA 聚合酶 ：催化核内染色体 DNA 前导链及滞后链的合成，需增殖细胞核抗原 蛋白 PCNA（proliferatating cell nucleus antigen-PCNA）的参与。 DNA 聚合酶 ：与引发酶配合，参与滞后链的合

4、成。 DNA 聚合酶 ：主要作用是核内缺口填充和 DNA 修复。 DNA 聚合酶 ：负责催化线粒体 DNA 的复制。 DNA 聚合酶 的结构和特征与酶 相似可能参与修复机制或与 和 协同作用。 2、DNA 复制的基本特点。复制的基本特点。 3、DNA 复制方式有哪些？有何区别？复制方式有哪些？有何区别？ “”型复制，滚环复制，D 环复制 滚环复制单链环形 DNA 的复制 D 环复制的特点是两条链的复制不是同步的。 第三章第三章 1、引起、引起 DNA 突变的原因或来源有哪些，突变结果如何？突变的原因或来源有哪些，突变结果如何？ 1、DNA 复制中的错误 2、DNA 的自发性化学变化 1、碱基的

5、异构互变 2、碱基的脱氨基作用 3、脱嘌呤与脱嘧 啶 4、碱基修饰与链断裂 5、转座成分的致突变作用 3、诱发突变 1、物理因素引起的 DNA 突变 2、化学因素引起的 DNA 突变 突变或诱变对生物可能产生 4 种后果： 致死性； 丧失某些功能； 改变基因型（genotype）而不改变表现型(phenotye)； 发生了有利于物种生存的结果，使生物进化。2、阐述、阐述 DNA 的几种修复方式。的几种修复方式。 一、光修复（DNA 的直接修复）修复是由细菌中的 DNA 光解酶（photolyase）特异性识别紫外线造成的核酸链上相 邻嘧啶二聚体，并与其结合，这步反应不需要光；结合后如受 300

6、-600nm 波长的光照射， 则酶被激活，将二聚体分解为两个正常的嘧啶单体，然后酶从 DNA 链上释放。 二、切除修复切除修复是修复 DNA 损伤最为普遍的方式，对多种 DNA 损伤包括碱基脱落形 成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等都能起修复作用。同时也是人体 细胞主要的 DNA 修复机制。步骤 首先由核酸内切酶识别 DNA 的损伤位点，损伤的 DNA 片段被切除。不同的 DNA 损伤需要不同的核酸内切酶来识别和切割。 在 DNA 聚合酶 I 的催化下，以完整的互补链为模板，按 53方向合成一段 DNA 链。 由 DNA 连接酶将新合成的 DNA 片段与原来的 DNA 断链连接

7、起来。这样完成的修 复能使 DNA 恢复原来的结构。 核苷酸切除修复 碱基切除修复 错配修复 三、重组修复上述的切除修复在切除损伤片段后以原来正确的互补链为模板来合成新的段落而 做到修复的。但在某些情况下没有互补链可以直接利用，例如在 DNA 复制进行时发生 DNA 损伤，此时 DNA 两条链已经分开，其修复可用 DNA 重组方式： 受损伤的 DNA 链复制时，产生的子代 DNA 在损伤的对应部位出现缺口。 完整的母链 DNA 与有缺口的子链 DNA 进行重组交换，将母链 DNA 上相应的片段 切下来填补子链缺口处，而母链 DNA 出现缺口。 以另一条子链 DNA 为模板，经 DNA 聚合酶催

8、化合成一新 DNA 片段填补母链 DNA 的缺口，最后由 DNA 连接酶连接，完成修补。重组修复不能完全去除损伤，损伤的 DNA 段落仍然保留在亲代 DNA 链上，只是重组 修复后合成的 DNA 分子经多次复制后损伤就被“冲淡”了。 四、SOS 修复SOS 修复是指 DNA 受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种 DNA 修复方式。当 DNA 两条链的损伤邻近时，损伤不能被切除修复或重组修复，这时在核酸 内切酶、外切酶的作用下造成损伤处的 DNA 链空缺，再由损伤诱导产生的一整套的特殊 DNA 聚合酶SOS 修复酶类，催化空缺部位 DNA 的合成，这时补上去的核苷酸几乎是 随机的，但终于

9、保持了 DNA 双链的完整性，使细胞得以生存。修复结果只能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称为 错误倾向修复第四章第四章 1、重组有哪些类型、重组有哪些类型根据对 DNA 序列和所需蛋白质因子的要求可以把重组分为四种类型，即:同源重组 转座重组 位点专一性重组 异常重组 2、什么是转座子，可分为哪些种类什么是转座子，可分为哪些种类 转座子(transposon,Tn)是存在于染色体 DNA 上可自主复制和移位的基本单位。 在细菌中发现两种类型的转座子：插入序列与复合转座子 玉米中分为两类：即自主性因子 和非自主性因子 果蝇中的转座子：Copia 转座子 P 转座子

10、3、转座子有什么结构特征？比较插入序列与重复转座子之间的异同转座子有什么结构特征？比较插入序列与重复转座子之间的异同所有转座子都有两个结构特征： (1) 两端有 20-40 个核苷酸的倒转重复序列。 (2) 具有编码转座酶的基因，这种酶催化转座子插入新的位置异同(1) 简单转座子/插入序列(insertional sequence,IS) ：只带有其本身转座所必需的基因， 它们是细菌染色体或质粒 DNA 的正常组成部分，一个细菌细胞常带有少于 10 个 IS 序列。(2) 复合转座子：是一类带有某些抗药性基因或其它宿主基因的转座子，其两端往往具有 相同或高度同源的 IS 序列或残余 IS 序列

11、。这表明，当插入序列跳跃到细胞基因的两端时 就可产生复合转座子。一旦形成复合转座子， IS 序列就不能再单独移动，只能将复合体 作为整体来运动。第五章第五章 1、请说出生物体内、请说出生物体内 RNA 的种类和功能的种类和功能 mRNA 是蛋白质生物合成的直接模板 tRNA 主要起转运氨基酸的作用rRNA 是合成蛋白质的场所 2、与与 mRNA 序列相同的那条连是什么序列相同的那条连是什么 编码链或有义链 3、什么是什么是 DNA 模版及模版及 mRNA 与蛋白质产物之间共线性关系？与蛋白质产物之间共线性关系？4、转录一般被分为哪几个步骤转录一般被分为哪几个步骤 RNA 合成的起始 延伸 终止

12、 5、原核生物原核生物 RNA 聚合酶由那几个亚基组成聚合酶由那几个亚基组成 细菌的 RNA 聚合酶具有很复杂的结构。由 5 种亚基组成，即 2 ，其中 亚 基有两个，其余亚基均只有一个，总分子量为 450KDa 6、说说启动子的一般构造说说启动子的一般构造7、请说说转录终止子与翻译终止密码的结构特点请说说转录终止子与翻译终止密码的结构特点第七章第七章 基因：基因：产生一条多肽链或功能 RNA 所必需的全部核苷酸序列 基因表达基因表达 : 指某一基因指导下的蛋白质合成，即从 DNA 到蛋白质的过程 衰减子：衰减子：先导序列起到随色氨酸浓度升高降低转录的作用，这段序列就称为衰减子 反义反义 RN

13、A ：指与 mRNA 互补的 RNA 分子，它能与 mRNA 分子特异性地互补结合，从而 抑制该 mRNA 的加工与翻译，阻断该基因的表达。 操纵子：操纵子：原核基因表达调控的一种重要组织形式 增强子：增强子：能使与它连锁的基因转录频率明显增加的 DNA 序列 顺势作用元件：顺势作用元件：不编码任何产物的 DNA 片段，能影响与之相联系的同一条 DNA 链上的基 因表达。启动子、增强子属于顺式作用元件。 反式作用因子：反式作用因子：由调节基因编码，其编码产物（RNA 或蛋白质）可以扩散、控制其它基因 的表达（转录因子） 1.结合乳糖操纵子结构说明其工作原理结合乳糖操纵子结构说明其工作原理乳糖操

14、纵元含有、和3 个结构基因。基因编码 -半乳糖苷酶，催化乳糖转变为别 乳糖，再分解为半乳糖和葡萄糖；基因编码半乳糖苷透过酶，促使环境中的乳糖进入细 菌；基因编码转乙酰基酶，以催化半乳糖的乙酰化。 2.简述真核生物在翻译水平上的调控简述真核生物在翻译水平上的调控3.简述反式作用因子的基本结构特点简述反式作用因子的基本结构特点 DNA 结合域（DNA binding domain） 转录激活域（activating domain）：不与 DNA 直接结合的转录因子没有 DNA 结合域， 但能通过转录激活域直接或间接作用于转录复合体而影响转录效率。 连接区 即连接上两个结构域的部分 4.简述锌指结构

15、和亮氨酸拉链结构的特点简述锌指结构和亮氨酸拉链结构的特点 锌指结构（zinc finger）：锌以 4 个配价键与 4 个半胱氨酸、或 2 个半胱氨酸和 2 个组氨酸 相结合。每个重复的“指”状结构约含 23 个氨基酸残基，整个蛋白质分子可有 2-9 个这样 的锌指重复单位。每一个单位可以其指部伸入 DNA 双螺旋的大沟，接触 5 个核苷酸。 亮氨酸拉链（basic-leucine zipper bZIP）：这类蛋白质分子中每隔 6 个氨基酸就有一个亮氨 酸残基，结果就导致这些亮氨酸残基都在 螺旋的同一个方向出现。两个相同结构的两排 亮氨酸残基就能以疏水键结合成二聚体，二聚体的另一端的肽段富含碱性氨基酸残基，借 其正电荷与 DNA 双螺旋链上带负电荷的磷酸基团结合。 5.简述真核生物在转录水平上的调控特点简述真核生物在转录水平上的调控特点 真核基因调控主要在转录水平上进行，受大量特定的顺式作用元件和反式作用因子调控。