贵阳市集中空调通风系统军团菌污染状况初步调查

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1、贵阳市集中空调通风系统军团菌污染状况初步调查 廖春 安丽娜 蔡娜 黄靖宇 贵州省疾病预防控制中心 摘 要: 目的 了解贵阳市集中空调通风系统军团菌污染状况, 为加强对集中空调的管理、预防和控制军团菌感染提供参考。方法 按照公共场所集中空调通风系统卫生规范 (2006 年版) , 分别于 2014 年、2015 年的 510 月对贵阳市区部分超市、宾馆酒店、写字楼集中空调通风系统冷却水和冷凝水中军团菌污染状况进行调查。结果 集中空调通风系统中冷却水军团菌的检出率为 5.56%, 冷凝水军团菌的检出率为 25.00%, 均未检出嗜肺军团菌。军团菌阳性样品均来自宾馆酒店, 阳性检出率为 11.76%

2、。结论 贵阳市集中空调通风系统冷却水和冷凝水虽未检出致病性嗜肺军团菌, 但仍有致病风险, 需进一步加强集中空调通风系统的卫生管理。关键词: 集中空调通风系统; 冷却水; 冷凝水; 嗜肺军团菌; 作者简介:廖春 (1971-) , 女, 副主任医师, 研究方向:微生物检测作者简介:安丽娜, E-mail:基金:贵州省疾控中心科学技术基金项目 (编号 2011-4) Preliminary investigation on Legionella contamination of centralized air conditioning and ventilation system in Guiya

3、ng CityLIAO Chun AN Lina CAI Na HUANG Jingyu Guizhou Province Center for Disease Control and Prevention; Abstract: Objective To understand the contamination situation of Legionella in central air conditioning ventilation system in Guiyang City, and provide reference for strengthening management of c

4、entral air conditioning system and preventing and controlling the infection of Legionella. Methods According to“Hygienical Standards of Centralized air-conditioning ventilation System in Public Places” ( 2006 Edition) , respectively from May to October in 2014, 2015 in Guiyang City part of the super

5、markets, hotels, office buildings in the central air conditioning ventilation system of cooling water and condensate eosinophilic Legionella pollution condition investigation. Results The detection rates of Legionella were 5. 56%, 25. 00% in cooling water and condensed water respectively. Legionella

6、 pneumophila was not detected in all samples. The samples of Legionella positive were from hotel hotels, and the positive detection rate was 11. 76%. Conclusion In Guiyang City, there were potential risk in central air conditioning ventilation system, though Legionella pneumophila was not detected f

7、rom cooling water and condensed water. It is suggested that the hygiene management should be strengthened in central air conditioning ventilation system.Keyword: Central air conditioning and ventilation system; Cooling water; Condensate water; Legionella pneumophila; 军团菌广泛存在于自然环境和人工环境的水体、土壤中, 对自然界抵抗

8、力强, 在水体中存活时间长, 可以通过气溶胶的形式在空气中播散而被人体吸入导致感染, 发生对人群危害极大的军团菌病1-2。集中空调系统是军团菌理想居住繁殖场所, 冷却塔的循环水 (含无机盐、有机物和微生物) 不仅能为军团菌提供理想的生存环境, 而且能提供传播的重要载体气溶胶3。世界各地因为集中空调造成的“军团菌病”暴发时有发生, 且造成部分病人死亡。我国自 1982年在南京发现首例病人以来, 已有多起军团菌病的散发和暴发流行的报道4。据统计, 由嗜肺军团菌引起的病例占军团菌病临床病例的 80%以上1。为了解贵阳市公共场所集中空调通风系统冷却水和冷凝水的嗜肺军团菌污染状况, 笔者随机选取市区 2

9、2 家公共场所进行了冷却水和冷凝水的样品采集和检测。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 主要仪器设备赛多利斯三联过滤装置, 电热恒温培养箱, 厌氧培养盒, ABI 7500 荧光定量PCR 仪。1.1.2 培养基、试剂所用 GVPC、BCYE 培养基为英国 OXOID 公司产品;嗜肺军团菌实时荧光 PCR 检测试剂盒为深圳深科源技术有限公司产品;生化试剂为北京陆桥技术股份有限公司产品。1.2 方法1.2.1 调查对象与样品来源分别于 2014 年、2015 年的 510 月随机对贵阳市区 3 家超市、17 家宾馆酒店、2 家写字楼, 共 22 家公共场所的集中空调冷却水和冷凝水进行采集, 共

10、采集冷却水 18 份、冷凝水 4 份。被调查对象的集中空调均正常投入运行 5 年以上, 并于 2011 年开始每年年末对冷却塔及集中空调通风系统进行清洗消毒。1.2.2 样品采集与处理按照公共场所集中空调通风系统卫生规范 (WS/T 394-2012) 要求进行采样。用预先加入 Na2S203 的无菌采样袋进行样品采集, 每个采样点用无菌操作取样品约 500 ml。冷却水采样点设置在距塔壁 20 cm、液面下 10 cm 处, 冷凝水采样点设置在排水管或冷凝水盘处。样品处理:将样品用 1 000 r/min 离心 1 min 去除杂质后, 取上清液用负压过滤装置通过滤膜过滤, 取下滤膜置于 1

11、5 ml 灭菌水中, 充分洗脱, 备用。取 1ml洗脱样品, 置 50水浴加热 30 min 制成热处理样品;另取 5 ml 洗脱样品, 调 p H 至 2.2, 轻轻摇匀, 放置 5 mim 后制成酸处理样品。1.2.3 样品检测按照公共场所集中空调通风系统卫生规范 (WS/T 394-2012) 要求进行检测。1.2.4 样品的接种及培养取洗脱样品、热处理样品及酸处理样品各 0.1 ml, 分别接种 GVPC 平板, 每种样品平行接种 2 个平板。将接种的平行平板分别静置于普通培养箱和厌氧培养盒 (CO 2浓度为 2.5%) 中, 361进行培养。从孵育第 3 天开始每天观察, 孵育 10

12、 d。从平皿上挑取可疑菌落接种于 BCYE 琼脂平板和 L-半光氨酸缺失的BCYE 琼脂平板, 361培养 2 d, 凡在 BCYE 琼脂平板上生长而在 L半光氨酸缺失的 BCYE 琼脂平板不生长的为军团菌菌落。菌落鉴定:进行生化培养、血清学实验以及实时荧光 PCR 方法鉴定是否为嗜肺军团菌。生化培养:氧化酶 (-/弱+) , 硝酸盐还原 (-) , 尿素酶 (-) , 明胶液化 (+) , 水解马尿酸。血清学实验:用嗜肺军团菌诊断血清进行分型。2 结果2.1 军团菌和嗜肺军团菌检出情况共采集样品 22 份, 检出军团菌 2 株, 阳性率为 9.09%, 经鉴定均为非嗜肺军团菌。冷却水军团菌阳

13、性检出率为 5.56% (1/18) , 冷凝水军团菌阳性检出率为25.00% (1/4) , 差异无统计学意义 (=1.50, P0.05) 。结果见表 1。表 1 冷却水、冷凝水中军团菌及嗜肺军团菌检出情况 下载原表 2.2 军团菌阳性样品来源采集的 22 份样品中来自宾馆、酒店的比例最高, 达 77.27%, 超市和写字楼的样品分别占 13.64%、9.09%。军团菌阳性样品均来自宾馆酒店, 阳性检出率为11.76% (2/17) 。结果见表 2。表 2 冷却水、冷凝水不同来源样品军团菌检出情况 下载原表 3 讨论军团菌引起的军团菌病是一种死亡率较高的疾病, 其发生与集中空调冷却塔军团菌

14、污染状况密切相关2。北京、深圳、广州、青岛、绍兴等城市在 2006 年前对公共场所空调冷却塔水的军团菌污染调查显示, 阳性率高达35.7%85.7%5-9。而本次调查贵阳市公共场所集中空调冷却塔水军团菌检出率较低, 仅为 9.09%, 且未检出嗜肺军团菌, 其原因与贵州省 2011 年开始加强对公共场所集中空调通风系统的管理有关。据文献报道, 军团菌与藻类、细菌、原虫可能有共生关系, 它们为军团菌生长提供必需的营养因素, 冷却水中军团菌的有无和数量多少与水中总有机碳、硝酸盐氮含量及其藻体数有关10。要控制军团菌的滋生和繁殖, 重要的是考虑破坏集中空调冷却塔水中的军团菌微生态环境, 特别是去除冷

15、却水中体积较大的绿-蓝藻种类。本次调查采集样品的公共场所均能按省卫计委规定, 自 2011年起每年年底定期请专业清洗公司对冷却塔进行清洗消毒, 采样时所见冷却塔水池内均无明显淤泥沉积, 所采集的样品也较澄清透明, 故样品中军团菌检出率较低。本次调查结果虽然军团菌的检出率在数值上冷凝水较冷却水高, 但其差异无统计学意义, 这应该与采集的两类样品数量差异较大有关。本次调查样品冷却水和冷凝水所占比例分别为 81.82%、18.18%, 冷却水为冷凝水的 4.5 倍, 这主要是因为大型的公共场所使用的集中空调系统多采用冷却塔, 同时冷凝水需要空调系统运行一段时间后才能产生, 量不多, 且不易收集, 故

16、较难采集到检测所需样品量。此次调查检出的 2 株军团菌均采自宾馆酒店, 这与采集样品主要来源有关, 提示贵阳市公共场所集中空调冷却塔及分体式空调的军团菌污染仍然存在。建议加强对环境水中军团菌的监测, 加强对各类公共场所集中空调的清洗消毒管理11;同时开展健康人群军团菌抗体水平调查, 以了解本市人群中军团菌的感染情况, 为今后对军团菌感染的预防研究提供参考资料。参考文献1徐瑛, 侯常春, 刘洪亮.集中空调系统及其他生活环境水中军团菌污染状况J.环境与健康杂志, 2007, 24 (2) :95-97. 2卫生部卫生监督局, 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所.集中空调污染与健康危害控制M.北京:中国标准出版社, 2006:6-7, 86-89, 112-113. 3于恩庶, 宋干, 原寿基, 等.新发现的传染病M.福州:福建教育出版社, 1997:197-217. 4马小燕, 王玉琴, 彭晓文,

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