biochrom 30+ 氨基酸分析仪标准操作规程

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1、1.0 目的 1.1 制定 Biochrom 30+ 氨基酸分析仪的标准操作规程。1.2 确保操作人员规范操作,减少操作失误。2.0 范围2.1 适用于研究院 Biochrom 30+ 氨基酸分析仪的标准操作。3.0 基础/定义3.1 不适用。4.0 责任人4.1 研究院二所分析室负责 SOP 的起草、修订与审核,复印件的日常应用管理。4.2 研究院设备部负责 SOP 的复核与统一提交 QA,并做执行情况监管。4.3 研究院 QA 负责 SOP 的审批与签发。5.0 必读文件5.1 DP-EQ-Y0115F1 氨基酸分析仪使用记录。5.2 氨基酸分析仪自检记录。5.3 温度、相对湿度记录。6.

2、0 安全注意事项6.1 不适用。7.0 规程 7.1 工作环境7.1.1氨基酸分析仪应置于稳定的工作台上,周围无强烈的机械振动和电磁干扰,避免阳光直射;环境应整洁干净,无易燃、易爆和腐蚀性气体,室内排风良好。7.1.2氨基酸分析仪工作条件:温度 1525,相对湿度范围 45%80% ,电源电压 22020V。7.2 准备7.2.1将钢瓶的氮气调节成 0.5MPa 并送到仪器中。7.2.2打开总电源,稳定后,开电脑主机电源,指示灯亮,同时打开计算机。7.2.3将所有的缓冲液置于主机上部。7.2.4确保茚三酮的量足够或是更换一瓶新的茚三酮(茚三酮配制:由 Ultrosolve plus1.75L

3、和 Ultra Ninhydrin 250ml 组成,可混合配制,共 2L,也可按比例配制。取 Ultrosolve plus 倒入茚三酮瓶中,氮气鼓泡 10 分钟;倒入 Ultra Ninhydrin,再用氮气鼓泡 10 分钟)。7.2.5检查清洗阀门活塞的溶液瓶(PISTON WASH H2O)和清洗反应线圈的溶液瓶(50/50 IPA/H2O)内的清洗液是否足够用量。7.2.6检查废液瓶是否位于低位以及是否有空间。7.2.7打开氨基酸分析仪主机电源、自动进样器电源。7.3 使用方法7.3.1双击桌面图标 ,打开自动进样器软件。7.3.1.1 运行手动清洗,控制软件上选择【Wash Con

4、trol】下的【start】键,直到注射器中没有空气,一般需要 4-5 次。使用 20%的异丙醇。自动进样器开盖后左前方白色塑料瓶中。如用完请及时添加。7.3.1.2 勾选【Temp On】,点击【Apply】键。7.3.2双击桌面 ,打开控制软件。7.3.2.1 勾选【Reaction coil 】 ,让反应单元及柱温箱升温。7.3.2.2 如果 3 天及以上不开机请执行步骤 A-E,15 天以上不开机执行 A-G 操作:A、将【Override】前面勾上。B、打开【Bubble trap bleeding taps】,下面接一个小烧杯。C、点击【Biosys Manual】软件中【Buff

5、er】,选择【1】【Enter】,打开缓冲液【1】,使用氮气驱动缓冲液 1 流动,排去气泡,持续 1min;同样操作排去 【2】、【3】、【4】、【5】、【6】管路的气泡。之后选择【Buffer】,输入【0】【Enter】。停泵。D、打开【Bubble trap bleeding taps】,下面接一个小烧杯,持续 10 分钟。E、选择【Buffer】【1】【Enter】。将【Buffer pump bleed valve】逆时针旋开 90 度,持续 5min,排去泵后管路气泡。之后将【Buffer pump bleed valve】旋转回原位。F、将【Ninhydrin pump bleed

6、 valve】逆时针旋开 90 度,持续 5min,排去茚三酮管路里的气泡,旋回原位。7.3.2.3 勾去【Override 】前面的勾。继续下面操作。7.3.2.4 点击【view】【program control】,点击【insert】,跳出【Sample Details】界面,点击【program filename】,选择【Lithium Physiological High Performance Regen.prg】,点击【open】【OK】。7.3.2.5 点击【insert】,跳出【Sample Details】界面,点击【program filename】,选择【Lithium

7、 Physiological High Performance.prg】,点击【open】【 OK】。在【Sample ld】一栏随便输入一个数字,在【No of samples】 输入要进样的针数,在 【Vial No(s)】输入样品的进样位置(备注:如果勾选【Auto Increment】,就表示样品的进样位置在原先的基础上自动加 1)。点击【Volume】,依据实际情况输入样品的进样体积(1-100 微升)【Enter】。如果需要满量程进样 200 微升,点击 【Details】,跳出【Autosampler Details】界面,在 【Injection Mode】项下点击【Flush

8、ed Loop Injection】【OK】。返回【Sample Details 】界面,点击 【OK】。7.3.2.6 返回【Biosys Programmer】界面,点击【Run 】,开始运行程序(备注:如果对软件不熟可等到下面软件设置完后再点击【Run】)。7.3.3双击桌面 快捷图标,打开数据采集软件。7.3.3.1 点击【登录】【确定】,出现【登录对话框】,在【输入用户名】中输入操作者姓名,在【选择工程】项下选择【新工程】,也可以选择已有文件夹。7.3.3.2 出现【Instrument 1】界面,点击【文件】【打开方法】,在新打开的窗口中进入【Clarity】 文件夹,选择【生理体

9、液.MET】【确定】。7.3.3.3 在【Instrument 1】界面,点击 快捷图标,出现【Instrument 1-序列】界面。在序列编辑栏中,勾选运行。在【SV】列,按照顺序依次输入数字 1、2、3 等等。在【I/V】列,输入样品的进样针数。在【样品 ID】列,输入样品位置。在 【样品】列,输入样品名称。在【进样体积】列,输入样品的进样体积。在【文件名】列,点击要输入数字的单元格,出现 图标,点击 图标【固定数字空间】。7.3.3.4 在运行列下方的框内选勾,可以继续填写下一针运行的样品信息,注意样品信息要与前面的【Biosys manual】软件中设置的样品信息保持一致。7.3.3.

10、5 样品信息填写完毕后,点击 (运行序列)。7.3.4数据处理7.3.4.1 在【Instrument 1】界面,点击 (色谱图窗口),点击【文件】【打开色谱图】,选择需要处理的色谱图,点击【确定】。7.3.4.2 在色谱图界面,可选择 (峰起点)、 (峰终点)、 (添加正峰)、 (强制峰命名)和 (删除峰)等按钮进行手动积分。也可以选用设置一些积分参数进行自动积分。7.3.4.3 570nm 和 440nm 两个波长下的色谱图分别处理完毕后,点击 (保存色谱图)。7.3.5打印图谱报告7.3.5.1 在色谱图界面,点击【显示】【属性】,出现【图属性】界面。可分别在【时间轴】和【信号轴】中设置

11、相应的数值信息,点击【确定】。7.3.5.2 在色谱图界面,点击【文件】【报告设置】,选择需要在色谱图中体现的信息,点击【确定】。7.3.5.3 在色谱图界面,选择要打印的色谱图,点击【文件】【打印】。7.3.6仪器使用完毕,退出【Biochrom Alias Manager】自动进样器软件、【BioSys Manual】控制软件和 Clarity 数据采集软件,关闭仪器电源,关闭计算机,按要求做好仪器使用登记。7.3.7实验完毕,清洁仪器内外,保持环境整洁。7.4 注意事项7.4.1注意软件的正常交流,以防止染上计算机病毒。7.4.2本规程适用于供试品的常规测试,其他非常规的测试,如自动定量计算及数据处理,参阅仪器的使用说明书及在线帮助,按照具体情况设定操作参数。8.0 附录8.1 不适用。9.0 参考资料9.1 Biochrom 30+ 氨基酸分析仪仪器使用说明书。

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