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1、临床医学检验主管技师考试辅导微生物检验 第 1 页其他革兰阴性杆菌及检验考点 嗜血杆菌属生物学性状临床意义微生物学检查 军团菌属、鲍特菌属、布鲁菌属【内容讲解】其他革兰阴性杆菌： 一些无动力，无芽胞，菌体小，形态近似球杆菌，对营养要求较苛刻的小杆菌。 主要包括嗜血杆菌属、鲍特菌属、布鲁菌属等。一、嗜血杆菌属 一类无动力、无芽胞的革兰阴性小杆菌，常呈球杆状，有时呈杆状、长丝状等多形态。 与临床有关的为 9 个种，即流感、副流感、溶血、副溶血、嗜沫、副嗜沫、杜克及埃及嗜血杆菌。 人工培养基中加入新鲜血液才能生长，故称嗜血杆菌。（二）流感嗜血杆菌简称流感杆菌，不是流感的病原菌。）形态与染色： 急性感
2、染标本，如脑脊液中多为短小球杆菌，恢复期病灶或长期人工传代培养呈球杆状、长杆状、丝、状等多形态性。 G -，着色较浅。石碳酸复红或美蓝单染色，两端浓染现象。 毒力株（粘液型菌株）在营养丰富的培养基上，68h 有明显荚膜，在陈旧培养物中荚膜消失。 无鞭毛，无芽胞。（2）培养特性： 需氧菌。初次分离培养时，最好在 5%10%环境中，以促进其生长。 普通培养基中须加入 X 和 V 因子，才能生长。 巧克力琼脂平板上生长较佳：圆形、光滑、湿润、边缘整齐，呈露滴状的小菌落。48h 后可形成直径 白色较大的菌落。有荚膜菌株的菌落呈轻度粘稠。 卫星现象：有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄
3、球菌在血琼脂平板上共同培养时，由于后者能合成较多的 V 因子，可促进流感嗜血杆菌的生长，在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落越远的菌落越小。 液体培养基中：有荚膜的菌株呈均匀混浊生长，无荚膜的 R 型菌株则为颗粒状沉淀生长。（3）生化反应： 对糖发酵不稳定。一般分解葡萄糖只产酸，不分解乳糖或甘露醇，对麦芽糖、蔗糖或糊精的发酵不稳定。 还原硝酸盐。有荚膜菌株产生吲哚。典型菌株不溶血。产生自溶酶，可被胆汁溶解。生物检验 第 2 页 致病物质为内毒素、荚膜、菌毛和酶类。 通过呼吸道感染，引起原发性或继发性感染。 原发性感染多由 b 型荚膜强毒株引起，为急性化脓感染，如脑膜炎、
4、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关节炎、心包炎及败血症等。 继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等后发生，多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中耳炎、鼻窦炎等。初次培养应在 50%10%环境。生长需要 X、V 因子，故在培养基中应添加此因子。应用选择性培养基，如巧克力琼脂中加一定量抗生素，嗜血杆菌分离率可达 （三）其他嗜血杆菌菌种 溶血性 致病性流感嗜血杆菌 + + - 原发性化脓性感染及继发性感染等副流感嗜血杆菌 - + - 偶可引起细菌性心内膜炎、尿道炎埃及嗜血杆菌 + + - 急性、亚急性眼结膜炎杜克嗜血杆菌 + - +/- 软性下疳嗜沫嗜血杆菌 + - - 偶引起细菌性心内膜炎或脑脓肿溶
5、血性嗜血杆菌 + + + 很少致病二、 1976 年在美国费城召开的全美退伍军人会议期间，暴发流行一种严重肺炎，与会者 149 人,有 34人死亡。从死者肺组织中分离到一种新菌，1978 年美国疾病控制中心将其命名为军团菌。 伯杰系统细菌学手册（1984）定为军团菌科，军团菌属。从人体分离的已有 19 种，其中主要致病菌为嗜肺军团菌。床医学检验主管技师考试辅导微生物检验 第 3 页 规染色不易着色，有端生或侧生鞭毛。 需氧菌。含有 %环境中生长良好。 营养要求较苛刻，且生长缓慢，初次分离需 养基中含铁盐可促进生长。 活性碳养基：35 天形成 12形凸起，灰白色有光泽的菌落。 触酶阳性，部分菌株
6、氧化酶阳性，不分解糖类，多数菌株产 具有 O、H 抗原，H 抗原无特异性，O 抗原具有特异性。 自然界广泛存在，人工管道的水源中常存在此菌，如医院空调冷却水中常有此菌，对常用化学消毒剂敏感。 直接涂片意义不大。 分离培养后的菌落进行革兰染色镜检，进行氧化酶和触酶试验，明胶液化试验及 利用 术及荧光抗体染色进行鉴定。 临床上常利用血清学诊断方法检测军团菌抗体 交叉反应，应引起注意。 引起军团病，主要由嗜肺军团菌，轻症型类似流感，病人有发烧、头痛、无力等症状。重症型是以肺部感染为主要特征，常导致多器官损害，最终导致呼吸衰竭死亡。 呼吸道标本中分离出军团菌，应确定为军团菌感染 一般治疗方案为大环内酯
7、类加利福平。三、鲍特菌属 营养要求很高，血平板及巧克力平板不生长，常用鲍 不发酵糖类，不产生 哚，不液化明胶，不能还原硝酸盐，不能利用枸橼酸盐。 该菌抵抗力弱，56 30 分钟、日光照射 1 小时可致死亡。 毒素：即百日咳毒素、丝状血细胞凝集素和腺嘌呤环化酶毒素。 百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌是百日咳的病原菌。 主要通过飞沫经呼吸道传播，引起百日咳。传染源主要是早期患者和带菌者。主要症状为阵发性剧烈咳嗽。由于病程较长，故名百日咳。 病后或预防接种后，可获得持久免疫力，再次感染少见。气管粘膜局部的 感染作用重要。四、布鲁菌属生物学性状： 动力，无芽胞和荚膜。 需氧，对营养要求较高，在血琼脂平板上
8、培养 57 天可形成微小、灰色不溶血菌落。 利用葡萄糖等糖类，尿素酶阳性，硝酸盐还原试验阳性。检测：凝集反应，测，抗体检测。临床意义：人畜共患感染性疾病的病原菌，布鲁菌可通过人类疫肤、呼吸道和消化道进入人体而感染，进入人体后首先侵犯局部淋巴结，之后入血，再进入肝、脾、骨髓等器官，患者热型呈波浪热。治疗：首选多西环素，次选 药需 46 周。临床医学检验主管技师考试辅导微生物检验 第 4 页五、弗朗西斯菌属主要有土拉弗朗西斯和新凶手弗朗西斯菌，是野生动物的自然疫源性疾病，人类多由于接触患病动物而感染。【例题】疑编号 502389210101【正确答案】B【例题】疑编号 502389210102【正确答案】B【例题】疑编号 502389210103【正确答案】E【例题】疑编号 502389210104【正确答案】生物检验 第 5 页【例题】日咳类毒素、日咳死菌苗、日咳死菌苗、日咳死菌苗、日咳类毒素、破伤风死菌苗答疑编号 502389210105【正确答案】B【例题】疑编号 502389210106【正确答案】A【例题】“卫星现象”疑编号 502389210107【正确答案】、流感嗜血杆菌生物学性状；临床意义；微生物学检查二、军团菌属、鲍特菌属、布鲁菌属
