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借助蒸汽释放的热使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键，特别是氢键受到破坏，引起不可逆的变性，使微生物死亡。 优点：1）蒸汽来源容易，操作费用低廉，本身无毒 2)蒸汽具有很强的穿透力，灭菌易于彻底 3）蒸汽均有很大的潜热，冷凝后的水分有利于湿热灭菌 4）蒸汽输送可借助本身的压强，调节方便，技术管理容易 缺点：1)设备费用高 2）不能用于怕受潮的物料灭菌一般来说湿热灭菌法比干热灭菌法更有效。湿热灭菌是利用热蒸汽灭菌。在相同温度下，湿热的效力比干热灭菌好的原因是：1、热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强。水分子的存在有助于破坏维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱键，更易使蛋白质变性。蛋白质含水量与其凝固温度成反比（具体数据网上可查）。2、热蒸汽比热空气穿透力强，能更加有效地杀灭微生物：3、蒸汽存在潜热当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体的温度。在湿热条件下，有水蒸汽的作用：1：高温水蒸汽导热比干空气要快；2：高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；3：高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜，直接进入细胞内破坏细胞；4：高温水蒸汽能水解一部分细胞结构，加速导热。
