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1、1CD44v6、CEA 在直肠癌中的表达及其临床意义【摘要 】 目的 研究直肠癌组织中 CD44v6、CEA 的表达以及两者与肿瘤转移和预后的关系。方法 应用 ELISA 法对 52 例直肠癌组织中 CD44v6、CEA 的表达进行检测，分析 CD44v6、CEA 的表达与临床病理特征间的关系。结果 新鲜直肠癌组织及距癌灶 3 cm 远处的正常直肠黏膜组织（经病理检查证实）中 CD44v6 的表达阳性率分别为 67.31%（35/52）和 25.00%（13/52） ，CEA 的表达阳性率分别为 71.4%（37/52）和 19.89%（ 12/52） ，两项前者明显高于后者(P0.01) 。
2、 CD44v6 和 CEA 的表达阳性率与直肠癌浸润深度、淋巴结转移、淋巴结远处转移及 pTNM 分期有关（P0.01） 。结论 检测直肠癌组织中 CD44v6、CEA 的表达对判断直肠癌的浸润、转移及病期进展情况有一定的价值，CD44v6、CEA 可作为预测直肠癌转移潜能和直肠癌患者预后的临床病理学指标。 【关键词】 直肠癌 CD44v6 CEA 转移 预后EXPRESSION OF CD44V6、CEA IN RETALAbstract Objective To study the relationship between expression of CD44v6、CEA in retal
3、 Cancer and neoplasm 2metastasis and prognosis. Methods Expression of CD44v6、 CEA in 52 cases of retal Cancer was assayed, and its relation with clinical pathology and prognosis was analyzed. Results In 52 cases of retalCancer tissue, the positive rate of CD44v6 expression was 67.31%(35/25). CEA 71.
4、4%（37/52） ；but the positive rate of CD44v6 expression in normal retal Cancer was 25.00%（13/52）.CEA 19.89%（12/52）. The positive rate of expression was significantly different （P 0.01). The positive rate of CD44v6、CEA expression in retal Cancer tissues was related to the depth of carcinoma infiltratio
5、n, lymph node metastasis and pTNM stage （P 0.01）. Conclusion Expression of CD44v6、CEA plays an important role in invasion, metastasis and pTNM stage of retal Cancer. It may be used as a new clinical pathology indicator to predict metastatic potential and prognosis of retal Cancer.Key words Retal can
6、cer CD44v6 CEA Metastasis Prognosis目前，寻找直肠癌中高敏感度、高特异性的可溶性肿瘤标记物成为研究的一个热点。我们选择敏感度和特异性较高的肿瘤标记物CD44v6、 CEA 进行检测和分析，以探讨其与直肠癌临床病理特征3的关系。1 资料与方法1.1 临床资料52 例直肠癌患者中男 29 例，女 23 例；年龄 3178 岁，中位年龄 54.5 岁；均经手术和病理检查证实诊断。病例为西宁市第一人民医院普外科 2003 年 3 月至 2007 年 8 月住院患者。肿瘤直径5 cm 者 30 例，5 cm 者 22 例；其中属高/ 中分化者 19 例，低分化者 33
7、例；依肿瘤生长方式（按 Ming 分型）分属肿块型 10 例，浸润型 42 例；浸润深度：T1/T2 20 例，T3/T4 32 例；淋巴结转移：阴性 18 例，阳性：34 例；静脉侵犯：阴性 31 例，阳性 21 例；淋巴管侵犯：阴性 20 例，阳性 32 例；远处转移：阴性 32 例，阳性20 例；pTNM 分期： I、II 期 18 例，III、 IV 期 34 例。1.2 主要试剂和仪器SP 试剂盒采用美国 ZYMED 公司产品。全部操作按试剂盒说明书进行。仪器采用美国雅培 AXSYM 全自动发光仪。ELX800 全自动酶标仪及其配套洗板机。41.3 方法1.3.1 检测方法将 52
8、例手术切除的新鲜直肠癌组织标本平铺，分别取 “癌灶”及距“癌灶”3 cm 远处黏膜组织，常规固定，做石蜡切片，备测CD44v6。另取同部位 0.51.0 g 组织，将其剪碎，用 300 目铜网过滤，离心（3000r/min） 5 min，分离上清液置于冰箱（-30）冷存，备测 CEA。1.3.2 结果判断CD44v6 主要分布在细胞膜，呈深黄色，按 Kainz1标准判定。阳性：20%的肿瘤区域呈强染色；大于 80%肿瘤区域呈弱染色，但细胞膜染色清晰。阴性：其他染色均为阴性。CEA 测定采用微粒子捕捉免疫发光技术（MEIA） 。酶标抗体采用碱性磷酸酶作为标记物，碱性磷酸酶是最稳定一种酶标记物，而
9、基质液采用极稳定 4-甲基磷酸伞型酮。抗体包被采用微粒子技术，可大大增加反应面积和提高特异性。待测 CEA 浓度与荧光发光强度呈正比。定标液浓度与质控液分析线性范围控制在 0500 g/L 内，批内误差4.1%，批间误差5.2% 。51.4 统计学处理方法采用 SPSS 统计软件分析数据，并行 2 检验，检验水准=0.05。2 结果2.1 直肠癌组织及正常直肠黏膜组织中 CD44v6、CEA 的表达52 例新鲜直肠癌组织及距癌灶 3 cm 远处正常直肠黏膜组织（经病理组织学检查证实）中均有 CD44v6、CEA 表达， CD44v6 的表达阳性率分别为 67.31%（35/52）和 25.00
10、%（13/52） ，CEA 为71.4%（37/52）和 19.89%（12/52） ，两项前者明显高于后者，直肠癌组织中 CD44v6、CEA 的表达水平明显高于正常直肠黏膜组织中的表达，差异有统计学意义（P0.01） 。2.2 直肠癌组织中 CD44v6、CEA 的表达水平与临床病理特征的关系（表 1）由表 1 可见，CD44v6、CEA 的表达阳性率与直肠癌浸润深度、周围淋巴结转移、远处转移及 pTNM 分期有关 (P0.05),但与性别、年龄、肿瘤大小、生长方式、分化程度、淋巴管侵犯及静脉侵犯情6况无关(P0.05) 。3 讨论细胞与细胞之间、细胞与细胞外间质之间黏附特性的异常是恶性肿
11、瘤细胞最基本的生物学特征之一，这种黏附特性的异常致肿瘤细胞具有了从原发部位脱落并向周围正常组织侵袭的能力，而正是这种侵袭能力的大小决定了肿瘤恶性程度的高低， 。凡内胚层来源的恶性肿瘤，如结肠、直肠、食道、胃、肝和胰腺等器官的癌肿患者血清中均有 CEA 存在，含量明显高于非肿瘤患者。CEA 是一个结肠癌标志物，它在监测和预后中更有意义，已达成共识。而CD44 是一个近年来倍受关注、在细胞恶性转化过程中其结构和功能均发生显著变化而影响转化后肿瘤细胞侵袭、转移行为的典型的细胞表面黏附分子。CD44v6 是一类具有高度异质性的单链膜表面糖蛋白，参与细胞黏附及迁移等一系列功能活动，并能介导淋巴细胞归巢，
12、而且又发现 CD44v6 表达水平与肿瘤的病期进展、淋巴结转移以及预后不良等均有关系2，5 。可能的机制是：当肿瘤细胞由原发部位脱落并转移到机体其他部位时，CD44v6 可能促进肿瘤细胞与血管或淋巴管内皮细胞、肿瘤细胞与基膜及肿瘤细胞穿破基膜与器官或组成细胞的粘附。可见，CD44v6 有望成为新的判断肿瘤生物学特征及预后的指标之一。 表 1 直肠癌组织中CD44v6、 CEA 的表达水平与临床病理特征的关系7本研究结果显示，直肠癌组织和正常直肠黏膜组织中CD44v6、 CEA 表达率明显增高（ P0.01，提示直肠癌细胞可能因具有 CD44v6、CEA 高水平表达而获得更强的侵袭、转移能力，而
13、且两者互补，明显提高了表达阳性率。结果还表明，CD44v6、 CEA 表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、淋巴结远处转移及 pTNM 期有密切关系，III 、IV 期直肠癌的 CD44v6、CEA 表达阳性率明显较 I、II 期高，提示检测直肠癌组织中 CD44v6、CEA的表达对判断直肠癌的浸润、转移及病期进展情况有一定的价值，CD44v6+CEA 可作为预测直肠癌转移潜能和直肠癌患者预后的临床病理学指标。【参考文献】 1 Speiser P, Kridelka F, Tempfer C ,et al. CD44v6 expressionIs an independment prognostic
14、 factor in node-negtive FIGO Stage bcervical carcinoma J.Int J Gnecol Cancer,1999，2:1602 Xin Y, Grace A, Gallagher MM, et al, CD44v6 in gastric carcinoma: a marker of tumor progression J . Appl immunohistochem Mol Morphol, 2001，9(2):13883 Joo M, Lee HK, Kang YK. Expression of E-cadherin, betacatenin
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