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1、2005-3-212020/9/18,Slide 1,HPLC 1100 ChemStation高级操作培训,授课教师 纪学海,2020年9月18日,2005-3-212020/9/18,Slide 2,第一章 化学工作站各个工作界面介绍,化学工作站各个工作界面的切换,切换工作界面,2005-3-212020/9/18,3,化学工作站Views菜单,2005-3-212020/9/18,4,化学工作站的Change Access Level功能,2005-3-212020/9/18,5,化学工作站Scheduler的使用,2005-3-212020/9/18,6,化学工作站Scheduler的
2、使用,2005-3-212020/9/18,7,2005-3-212020/9/18,Slide 8,选择在线信号,从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗口中选择要监控的信号。,2005-3-212020/9/18,Slide 9,在线信号显示,2005-3-212020/9/18,Slide 10,查看Logbook,从View菜单选择Logbook，单击Current Logbook显示当前Logbook内容。,2005-3-212020/9/18,Slide 11,方法的概念：方法是一个参数集，它包括分析一个样品
3、所需要 的所有参数。 方法文件名：xxx.m。 方法的组成： 方法信息(Method information) 仪器参数及采集参数(Instrument/Acquisition) 数据分析参数(Data Analysis) 运行时间表(Run Time Checklist),第二章 方法编辑、保存,2005-3-212020/9/18,Slide 12,使用 Edit Entire Method 编辑一个完整的方法,编辑一个完整的方法,单击图标，也可以开始编辑一个完整的方法。,2005-3-212020/9/18,Slide 13,选择所要编辑的内容,2005-3-212020/9/18,Sl
4、ide 14,方法信息 (Method Information),2005-3-212020/9/18,Slide 15,包括：流量(Flow)，流动相组成(Solvents)，停止采集时间(Stop Time)，后运行时间(Post Time)，梯度编程(Timetable)，压力限制设定(Pressure Limits)等,泵的操作参数,2005-3-212020/9/18,Slide 16,标准自动进样器参数,标准进样过程原理示意图,准备位置,抓取样品瓶 吸取样品,进样和运行位置,2005-3-212020/9/18,17,2005-3-212020/9/18,Slide 18,标准自动
5、进样器的程序进样,2005-3-212020/9/18,Slide 19,Wellplate自动进样器参数,2005-3-212020/9/18,Slide 20,控温范围：低于室温1080 两个单独的加热区 安装切换阀可以进行柱切换 可以容纳30 cm长色谱柱 安装柱识别可以自动记录进样次数,柱温箱参数设置,2005-3-212020/9/18,Slide 21,可以选择存储 5 个信号 信号波长范围 191 - 949 nm 可变狭缝： 1, 2, 4, 8, 16 nm 可以时间编程 可以保存数张或所有光谱,DAD检测器参数设置,DAD参数优化 Step and Slit: Agilen
6、t 1100 DAD 狭缝宽度可以程序变化，变化步径1，2，4，8，16nm。如果样品浓度较高，而需要精细的光谱结构，建议使用1或2nm的狭缝宽度。如果样品浓度较稀，建议使用8或16nm宽度狭缝。采集样品的谱带宽度至少要与狭缝宽度一样。 Peak Width: 增加响应时间（峰宽）可以增加组成色谱信号中每个数据点的采集次数。因为检测器的噪音与采集次数平方根成反比，所以增加响应时间可以降低噪音。但增加响应时间（峰宽）会降低定量分析的重复性。一般对于精确的定量分析，一个色谱峰要求采集20个数据点。设置峰宽的经验：设置峰宽等于实际色谱峰的最窄峰宽。,2005-3-212020/9/18,22,Sam
7、ple Signal and Reference Signal: 设置样品吸收波长与参比波长遵从下列规则： 样品吸收波长选择在样品的最大吸收波长，而且在此吸收波长下没有流动相吸收的干扰。 选择样品信号的谱带宽度应覆盖样品吸收谱带的半峰宽（假设样品吸收谱带为高斯峰）。 参比吸收谱带应选择在尽量靠近样品吸收谱带，而且在此区域没有或尽量低的吸收强度。 参比峰谱带宽度要大于或等于样品谱带宽度。 注意：增加样品谱带宽度，会降低样品的吸收强度，但会降低噪音。 选择合适的参比吸收波长可以减小梯度洗脱过程中的基线漂移。 Peak Supression（峰抑制）: DAD检测器一个非常有趣的功能是进行峰抑制。例
8、如有两个样品没有分开，共同洗脱出来，可以设置某一个样品的等吸收波长为参比波长，则被设为参比峰的样品被抑制，而另一个样品峰被分离。不过，此样品峰的吸收强度要损失1030。,2005-3-212020/9/18,23,2005-3-212020/9/18,Slide 24,VWD检测器参数设置,2005-3-212020/9/18,Slide 25,选择在方法中要执行的项目 可以选择保存GLP数据 可以将方法和数据保存在一起,运行时间表(Run Time Checklist),2005-3-212020/9/18,Slide 26,从Method菜单选择Save Method / Save Met
9、hod as或从存贮方法工具图标存贮方法。,存储方法,单击本图标可以保存方法，务必注意不要发生方法覆盖、丢失,2005-3-212020/9/18,Slide 27,要分析单个样品，先从RunControl菜单选择 Sample Info., 输入样品信息。 样品信息包括： 操作者姓名(Operator Name)，存盘数据文件(Data File)，样品参数(Sample Parameters) 样品评述(comment)。 然后运行方法(Run Method)。,运行方法,用户图形友好界面(GUI),2005-3-212020/9/18,28,2005-3-212020/9/18,Slid
10、e 29,用户图形友好界面各个模块的控制,用户图形界面溶剂瓶的填充量,2005-3-212020/9/18,30,用户图形友好界面各种参数的显示,2005-3-212020/9/18,31,2005-3-212020/9/18,Slide 32,Instrument菜单简介,2005-3-212020/9/18,Slide 33,选择Instrument More Pump Auxiliary菜单，即可弹出下图窗口。,泵的辅助功能,在该窗口可以设置泵的最大升流速率、泵冲程大小以及设置溶剂的压缩补偿因子。,2005-3-212020/9/18,Slide 34,自动进样器的扩展功能,2005-3
11、-212020/9/18,Slide 35,色谱柱信息的输入,VWD停泵扫描采集光谱,使用VWD停泵扫描的功能，可以采集样品的吸收光谱，主要操作步骤如下： 1.在Online工作站界面的View菜单下打开VWD Scans窗口； 2.按照正常的进样方式采集样品色谱数据，并保证能够在 Online Signal窗口中观测到色谱信号； 3.进样后，色谱图上出现基线时，扫描空白吸收光谱 在Instrument菜单下，选择More VWD中的Blank Scan 4.色谱图上出现色谱峰时，扫描样品吸收光谱 在Instrument菜单下，选择More VWD中的Sample Scan 此时得到的是自动扣
12、除空白吸收后的样品吸收光谱。,2005-3-212020/9/18,36,2005-3-212020/9/18,Slide 37,可变波长检测器VWD的停泵扫描功能,进样之前选择VWD Scans菜单，打开VWD光谱扫描窗口,2005-3-212020/9/18,Slide 38,可变波长检测器VWD的停泵扫描功能,2005-3-212020/9/18,Slide 39,可变波长检测器VWD的停泵扫描功能,扫描所得的流动相吸收光谱,2005-3-212020/9/18,Slide 40,可变波长检测器VWD的停泵扫描功能,出现色谱峰时，点击Sample Scan，扫描样品峰的吸收光谱,2005
13、-3-212020/9/18,Slide 41,可变波长检测器VWD的停泵扫描功能,光谱窗口中给出扣除流动相吸收光谱后的样品峰吸收光谱,2005-3-212020/9/18,Slide 42,第三章 谱图优化,本章内容：,谱图调用 空白谱图的扣除 谱图优化 谱图加标注 谱图比较、处理,2005-3-212020/9/18,Slide 43,调用数据文件,在Data Analysis界面，File菜单下选择Load Signal。,扣除空白谱图,扣除空白谱图,选择需要扣除的空白运行色谱文件,2005-3-212020/9/18,44,2005-3-212020/9/18,Slide 45,选择、
14、规定一个方法中要进行调用、处理的信号,Signal Details,2005-3-212020/9/18,Slide 46,使用 Signal Options. 功能来优化色谱图的显示,谱图优化,在Data Analysis界面下，Graphics菜单下选择Signal Options.,2005-3-212020/9/18,Slide 47,谱图优化工具,谱图优化图标,谱图显示方式,化合物名称,保留时间显示,标题显示,轴,单独/重叠显示,基线,打印窗口,色谱图控制图标,移动标注,文字标注,设置标注格式,线形标注,删除标注,WMF图标注,拷贝,2005-3-212020/9/18,Slide
15、48,选择: 字体和字型 字体大小 字体颜色、旋转角度等,在色谱图上加标注,2005-3-212020/9/18,Slide 49,Add Annotation Draw Line in Window Move Annotation Delete Annotation,谱图处理工具,谱图处理工具,2005-3-212020/9/18,Slide 50,如何执行积分 自动积分 如何建立积分事件表 如何使用积分事件表 手动积分,本章内容：,第四章 积分优化,2005-3-212020/9/18,Slide 51,增强积分方式可以提供: 当基线波动时，基线的定位。 使用初始峰高参数去除噪音峰。 控制
16、积分开始和结束的标识。 在噪音中定位信号峰。 使用二阶导数确定肩峰。,增强积分方式,2005-3-212020/9/18,Slide 52,当调用信号时，可以通过Integrate after load选项自动积分。 您也可以通过以下方式进行积分: 从 Integration 菜单选择积分或自动积分 选择积分工具。 运行一个包括数据分析的完整方法。,如何执行积分,2005-3-212020/9/18,Slide 53,自动积分,检查开始和结束区域，确定噪音。 赋予初始Slope Sensitivity和Height Reject值. 对第一次积分赋予一个临时峰宽值。 设置Area Reject为0。 执行测试性积分，有可能重复几次。 基于较早洗脱出的色谱峰宽计算峰宽值。 优化Slope Sensitivity和Height Reject。 从初始的峰宽和噪音水平计算Area Reject。,2005-3-212020/9/18,Slide 54,积分事件,初始
