动物细胞工程之细胞培养及克隆课件

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1、离体的植物器官、组织或细胞,愈伤组织,脱分化,再分化,过程,芽、根,植物体,植物组织培养,动物细胞工程,动物细胞培养和核移植技术,动物细胞培养,定义,从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。,动物组织块,剪碎,制成细胞悬浮液,将动物组织消化后的初次培养,原代培养,胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理分散成单个细胞,将贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶 处理,分瓶继续培养的过程,传代培养,接触抑制现象: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖。,培养器皿,动物细胞培养瓶内表面为什么 要光滑、无毒?,动物细胞培养,左图显示了创面愈合过程中一个

2、十分有趣的现象。当周边的上皮向创面中央爬行时,一旦上皮细胞互相接触,就停止分化和增殖。该现象就叫接触抑制。因此,创面上不会出现多余的皮赘。这是一种十分巧妙和神秘的调控现象。,幼龄与老龄动物的组织细胞相比较,分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较,哪一种更易于培养?思考一下,这是什么道理?,提示:细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系,细胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物则相反。所以,一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样,组织细胞的分化程度越低,则增殖能力越强,所以更容易培养。,动物细胞的培养过程,幼龄动物,取动物器官 和组织,

3、剪碎组织,胰蛋白酶处理,细胞培养,单个细胞,动物组织块,剪碎,制成细胞悬浮液,将动物组织消化后的初次培养,原代培养,胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理分散成单个细胞,将贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶 处理,分瓶继续培养的过程,传代培养,在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 ( ) A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,A,(2010年高考浙江卷)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是() A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D恶性细胞系的细胞可进行传代培养 【解答】D,多细胞动物和人体的细胞都生活在

4、内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质? 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件?,讨 论,葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和 动物血清等。,适宜温度、PH和气体环境;无菌无毒环境,在动物细胞的培养过程中,下面哪种物质,不是必需的? A单糖 C氨基酸,B核苷酸 D无机盐,【解析】动物细胞体外培养需要有糖、氨基酸、生长因子、 无机盐、微量元素等。 【答案】B,大规模的生产有重要价值的生物制品 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体为基因工程技术提供受体细胞 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植有毒物质的检测细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药

5、物等,为治疗和预防癌症及其他疾病提供依据,动物细胞培养技术的应用,1997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛,平均每年产量为十几吨,而我国平均水平仅有34吨。你能想办法繁殖卢辛达的后代,使年产奶量为30.8t吗?,卵细胞,苏格兰黑面母羊,芬兰白面母羊,乳腺细胞,细胞质,细胞核,细胞核移植,早期胚胎,另一头母绵羊子宫,胚胎移植,多利羊,多利羊的培育过程,重组细胞,动物体细胞核移植技术和克隆动物,阅读与思考,以概念图的形式表示体细胞核移植过程?,取供体细胞,取卵母细胞,供体细胞培养,培养到 M中期,

6、卵母细胞去核,供体细胞注入去核的卵母细胞,供体细胞和受体卵母细胞融合,重组胚胎,代孕母牛,生出与供体遗传物质基本相同的个体,卵细胞,苏格兰黑面母羊,芬兰白面母羊,乳腺细胞,细胞质,细胞核,细胞核移植,早期胚胎,另一头母绵羊子宫,胚胎移植,多利羊,多利羊的培育过程,重组细胞,动物体细胞核移植技术和克隆动物,思考题,2、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程,找出操作过程的不同点?,多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞,而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞;多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞,而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。,3、讨论分析上述哪一种措施更科学?并说明理由?,卵母

7、细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高,用它作受体更容易成功,将供体细胞注入受体细胞,使克隆动物更像供体动物,操作也方便,思考题,4、核在进行体细胞核移植之前,为何要去掉受体卵母细胞的核?,为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。,5、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,为什么?,10代以内的细胞保持一般保持正常二倍体的核型,未突变,6、细胞核移植生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?,不是,克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核,但核外还有少部分DNA(如线粒体DNA)来自受体卵母细胞,将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物,核移植,胚胎细胞核移植,体细胞核移植(难度高),受体细胞:M期的卵母细胞,跟踪训练如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能来源于() A乳腺细胞B卵细胞 C胃腺细胞 D囊胚时期的胚胎细胞 答案:B,克隆动物的研究意义,1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病,作为供体 4.保护濒危动物,体细胞核移植技术存在的问题:,许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大,异常肥胖,发育困难,脏器缺陷,免疫失调等。,

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