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1、第二节、分配色谱法,组员:梁国鹏麻托弟席宁,主讲人:郭鹏翔,一.分离原理:将液体均匀地涂渍在惰性物质(载体)表面上作为固定相,利用被分离组分在固定相与流动相中的溶解度差别所造成的分配系数差别而被分离。,狭义分配系数,注:K与组分的性质、流动相的性质、固定相的性质以及柱温有关,图示,分离机制利用组分在流动相和固定相间溶解度差别实现分离,二、载体作用:负载固定向要求:1、惰性、没有吸附能力、能吸留较大量的固定相液体2、纯净、颗粒大小均匀常用载体:硅胶、硅藻土、纤维素,三、固定相及其选择,正相分配色谱:极性固定相流动相极性小的组分先流出,极性大的组分后流出。应用于分离极性及中等极性物质固定相有水、各
2、种缓冲溶液、稀硫酸、甲醇、甲酰胺、丙二醇等强极性溶液及它们混合液等按一定比例与载体混匀后,填装于色谱柱,用被固定相饱和的有机溶剂做洗脱剂进行分离,被分离成分中极性大的亲水性成分移动慢,反相分配色谱:极性流动相固定相极性大的组分先流出,极性小的组分后流出。应用广泛,用于分离非极性至中等极性物质常用硅油、液体石蜡等极性较小的有机溶剂作为固定液,而以水、水溶液或与水混合的有机溶剂作为流动相。此时,被分离成分的移动情况与正相分配色谱相反,离子对反相色谱:在流动相中加入有机离子对试剂,用于有机酸、碱、盐的分离离子抑制色谱:调整流动相ph,抑制组分的解离,四、流动相及其选择,一、正相色谱常用的流动相有石油醚、醇类、酮类、酯类、卤代烷及苯等。二、反相色谱常用的流动相有水、各种水溶液、低级醇类固定相和流动相的选择要根据被分离物中各组分在两相中的溶解度之比即分配系数而定,即在流动相中加入一些别的溶剂,以改变各组分被分离的情况与洗脱速率。,