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1、高二生物选修3 专题1 基因工程11 DNA重组技术的基本工具1、基因工程的原理:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外和,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在水平上进行设计和施工的,因此又叫做。2、限制性核酸内切酶(1)切割DNA的工具是,又称。(2)这类酶在生物体内能将外来的DNA切断,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保持细胞原有的遗传信息。(3)由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶(简称限制酶)。(4)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段,末端通常有
2、两种形式,即和。例1、下列关于限制酶的说法正确的是( )A、限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键3、DNA连接酶“分子缝合针”根据DNA连接酶的来源不同,可以将它分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为DNA连接酶。DNA连接酶只能将连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。另一类是从分离出来的,称为T4DNA连接酶。T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的,又可以“缝合”双链DNA片段的,但连接之间的效率比较低。例2、下图为DNA分子的切
3、割和连接过程。(1)EcoRI是一种酶,其识别序列是,切割位点是与之间的键。切割结果产生的DNA片段末端形式为。(2)不同来源DNA片段结合,在这里需要的酶应是连接酶,此酶的作用是在与之间形成键,而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是。 答案:限制酶 GAATTC 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 黏性末端 DNA 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 T4DNA连接酶4、基因进入受体细胞的载体“分子运输车”(1)基因操作过程中使用载体两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。(2)现在通常使
4、用的载体是,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状DNA,有的细菌中有一个,有的细菌中有多个。(3)质粒通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移,可以复制,也可整合细菌拟核DNA中,随着拟核DNA的复制而复制。(4)其他载体还有和等。(5)作为载体必须具备以下条件:能够在宿主细胞中复制并稳定地保存,具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;具有某些标记基因,便于进行筛选,如对抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。例3、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段,分析回答问题。(1)其中和是由一种限制酶切割形成的末端,两者要重组成一个DNA分子,所用DNA连接酶通常是。(2)和是
5、由另一种限制酶切割形成的末端,两者要形成重组DNA片段,所用DNA连接酶通常是。 答案: 平 T4DNA连接酶 黏性 DNA连接酶四、课堂巩固(一)选择题1、关于限制酶的说法中,正确的是( )A、限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列B、EcoRI切割的是GA之间的氢键C限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNAD限制酶只存在于原核生物中2、DNA连接酶催化的反应是( )ADNA复制时母链与子链之间形成氢键 B黏性末端碱基之间形成氢键C两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接 DA、B、C都不正确分析C还可能有平末端3、作为基因的运输工具载体,必须具备的条件及理由是( )A、能够在宿
6、主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因B、具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达C具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选4、质粒是基因工程最常见的载体,它的主要特点是( )能自主复制不能自主复制结构很小是蛋白质是环状RNA是环状DNA能“友好”地“借居”A、 B、 C D5、在受体细胞中能检测出目的基因是因为( )A、目的基因上有标记 B、质粒具有某些标记基因 C、重组质粒能够复制 D以上都不正确6、关于质粒的叙述正确的是( )A、质粒是能够自我复制的环状DNA分子 B、质粒是唯一的载体C、重组质粒是目的基因 D、质
7、粒可在宿主外单独复制7、基因工程中可用作载体的是( )质粒噬菌体病毒动物细胞核A、 B、 C D、8、下列关于基因工程中所选用的质粒的说法,错误的是( )A、不能没有标记基因 B、是小型链状的DNA分子C、能够自我复制 D可与目的基因重组9、下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是( )A、 B、 C、 D10、要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是( )(1)限制酶(2)连接酶(3)解旋酶(4)还原酶A、(1)(2)(3) B、(1)(2)(4) C、(1)(2) D、(1)(3)(二)填空题:11、把目的基因与质粒DNA缝合时,中间的碱基对靠连接起来,而两链上的磷酸、脱氧核糖则在 的作
8、用下连接起来。质粒是基因操作中经常用的。12、基因工程又叫做技术或技术。这种技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工和,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。 13、治疗糖尿病用的胰岛素,在过去主要是从动物(如猪、牛)体获得的。自20世纪70年代基因工程发展起来以后,人们开始采用高新技术生产胰岛素,其操作过程如图15所示:(1)图中的质粒存在于细菌细胞中,从其分子结构看,可确定它是一种。(2)请根据碱基互补配对的原则判断,在连接酶的作用下,甲与乙能否拼接起来,并说明理由。(3)细菌丙进行分裂后,其中被拼接的质粒也由一个变成两个,两个变成四个质粒的这种增加方式在遗传学上称为。目的基因通过表达后,能使细菌产生胰岛素,这是因为基因具有控制合成的功能。答案;题号12345678910答案CDACBAABBC11、氢键 DNA连接酶 载体 12、基因拼接 DNA重组 剪切 拼接13、DNA分子 能 二者具有相同的黏性末端 DNA复制 蛋白质 3用心 爱心 专心