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1、不同蔬菜叶的叶绿素含量差异的研究学生：王艳萍 褚立婷 刘慧敏 指导老师：张小冰摘要 叶绿素存在于各种果蔬等绿色植物中，而且不同的蔬菜中含量不同，叶绿素分a、b两种，两者都易溶于乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂。本实验采取分光光度计测定法【1】测定植物组织中叶绿素a，叶绿素b及总叶绿素含量，方便且直观。选取的材料是芹菜、白菜、小油菜，结果显示小油菜中叶绿素含量最高，其次是芹菜，最少的是白菜。所以我们在平时的饮食中多吃一些小油菜，更加有益于健康。Abstract Chlorophyll exists in all kinds of fruits and vegetables such as green
2、plants, and different content of different vegetables, chlorophyll a, b two, both soluble in ethanol, acetone, ether and other organic solvents. This experiment adopted spectrophotometer assay determination of chlorophyll in plant tissue. A, chlorophyll b and total chlorophyll content, convenient an
3、d intuitive. Selection of material is small celery, cabbage, rape, results show that the small rape chlorophyll content in the highest, followed by the celery, is the least amount of cabbage. So we in the usual diet to eat more a few small rape, more conducive to health 关键词 蔬菜；叶绿素含量；分光光度计1引言 1.1叶绿体色
4、素的医疗作用叶绿体色素包括叶绿素a，叶绿素b，叶黄素，胡萝卜素，叶绿体色素不仅是一类与光合作用有关的最重要的色素，同时还具有很多医疗作用，概括起来有：1.1.1消炎、抗溃疡作用现代医学发现，叶绿素可促进溃疡伤口肉芽新生加速伤口愈合。特别是久治难愈的胃溃疡，叶绿素的作用比传统的抗溃疡胃药还要好。叶绿素还有保护胃壁和抗胃蛋白酶的作用，对慢性胃炎、结肠炎有良好的辅助食疗效果，对肠部炎症伤口也有极好的消炎、促进愈合作用。1.1.2具有脱臭作用叶绿素的另一作用就是脱臭。叶绿素对脚臭、腋臭、以及由于消化不良引起的口臭都有良好的除臭作用。其作用机理在于叶绿素可抑制代谢过程中产生硫化物。目前，叶绿素广泛用于口
5、香糖中，以增强消除口臭的效果。日常生活中，只要多喝点含叶绿素的蔬菜汁，就能使口腔、鼻腔、身体散发出的口臭、汗味、尿味、粪便味等异味消失。1.1.3抗氧化作用叶黄素是一种性能优异的抗氧化剂，人体代谢过程中产生的一些有害的超氧化物自由基，它们会破坏细胞，引起衰老。而叶黄素能保护机体免受超氧自由基的侵害，可预防细胞衰老和机体器官衰老，同时还可预防老年性眼球视网膜黄斑退化引起的视力下降与失明，叶黄素具有改善体质，祛病强身，增强机体的耐受力，抗衰老，防止基因突变等作用，是人体健康的健康卫士。所以，饮食绿色蔬菜，对身体保健很重要。通常蔬菜中，叶绿素和叶黄素比例 为3：1，也就是说，叶绿素含量高，叶黄素含量
6、也高。1.2实验的目的和意义叶绿素是绿色植物进行光合作用的基础物质是研究果蔬生长特性生理变化和氮素营养状况的重要指标2。叶绿素含量直接影响果蔬的光合作用能力和干物质的积累，并且最终影响果蔬产量，所以测定果蔬叶片叶绿素含量，为研究不同品种系果蔬生理特性、挖掘生产潜力和品种资源提供科学依椐。植物叶绿素含量的测定大致可分为分光光度计法和活体叶绿素仪法，其中应用最广泛的是分光光度计法。蔬菜中叶绿素含量高低，是蔬菜的食用品质之一。本实验比较白菜、芹菜、小油菜中叶绿素含量，为饮食提供参考依据。2研究方法2.1 实验材料白菜、芹菜、小油菜2.2试剂和仪器丙酮、碳酸钙、石英砂、高级型分光光度计、台天平、剪刀、
7、研钵、漏斗、移液管、玻璃棒、量筒、烧杯、滤纸。2.3原理和方法2.3.1原理叶绿素a、b在长波光的最大吸收峰分别位于663nm和645nm。同时在该波长时，叶绿素a、b的比吸收系数K为已知，可以根据LambertBeer定律，列出质量浓度与光密度A之间的关系式：A66382.04a9.27b （1）A64516.75a45.60b （2）（1）、（2）式中的A663、A645为叶绿素溶液在波长663nm和645nm时的光密度。a、a为叶绿素a、b的质量浓度，单位为g/L82.04、9.27为叶绿素a、b在波长663nm时的比吸收系数16.75、45.06为叶绿素a、b在波长645nm时的比吸收
8、系数。解方程式（1）（2），则得：a =12.7A6632.69A645 (3)b =22.9A6454.68A663 (4)a十b相加即得叶绿素总量TTa十b 8.02A663+20.21 A645 (5)3(3)(4)(5)式中的质量浓度，单位为mg/L利用上面（3）（4）（5）式，即可以计算a、b及总叶绿素的质量浓度。2.3.2实验步骤提取叶绿素取新鲜叶，于天平上称取0.5g鲜重，剪碎后置于研钵中，加碳酸钙少许及适量的石英砂，纯丙酮5mL，仔细研磨成匀浆， 再加入80丙酮约5mL，将匀浆转入离小烧杯，并用适量80丙酮洗涤研钵，一并转入小烧杯中，离心或过滤后，上清液用80丙酮定溶至20 m
9、L，做测定用。测量光密度取一光径为1cm的比色杯，注入上述叶绿素丙酮溶液，另以80丙酮作为空白对照，分别测定663nm和645nm波长下的光密度值4。在测定时由于芹菜和小油菜的OD值大于1，所以将芹菜稀释了3倍，小油菜稀释了4倍后再次进行了测定。结果计算根据测量得到的光密度A663 、A645，代入（3）式计算溶液中叶绿素a的浓度；代入（4）式中计算得到叶绿素b的浓度，代入（5）式计算得到叶绿素总浓度。根据稀释倍数，计算每克鲜重叶绿素含量5。含量=v / m叶绿素质量浓度 mg/LV 提取液体积 mL m 样品鲜重 gFW 3 结果与分析3.1实验结果三种蔬菜叶的叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素质
10、量浓度见表1，叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量见表2表1 三种蔬菜叶的叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素质量浓度材料A663A645a/mg/Lb/mg/LT mg/L白菜0.1330.0601.52770.751562.27926芹菜0.3400.1473.922571.77515.69767小油菜0.4700.1905.45792.15147.6093表2 三种蔬菜叶的叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量/ mg/gFW材料叶绿素a叶绿素b总叶绿素白菜0.0611080.03006240.0911704芹菜0.47070840.2130120.6837204小油菜0.8732640.3442241.
11、2174883.2 分析由上表可以明显看出白菜的叶绿素含量相当低，而小油菜的叶绿素含量很高，芹菜当中的叶绿素居中，同时也可以看出蔬菜叶子越绿的蔬菜，叶绿素含量越高。4讨论与结论4.1在实验时为了提高实验的准确性，我们要注意很多细节问题，例如研磨叶片时，注意要避开粗大的叶脉并且用力要均匀，否则提取的色素不充分；当测得的OD值大于1时，应用80%丙酮稀释并记录稀释倍数。4.2我们采取分光光度计法来测定蔬菜中叶绿素含量时尽量在避光条件下，防止叶绿素被破坏。4.3不同果蔬中所含叶绿素的量是不同的，叶绿素含量也是我们判断一种果蔬营养价值的重要指标，通过本实验获得的数据可以知道相比白菜和芹菜，小油菜所含的
12、叶绿素更高，所以它的营养价值更高，这次实验对我们的生活来说还是意义很大的。4.4生活当中我们不能利用这些办法来测定叶绿素含量，但是通过本实验可以看出颜色较绿的蔬菜叶绿素含量较高，由此我们可以通过观察蔬菜的颜色来选择营养价值高的蔬菜。 参考文献1杨善元.关于测定叶绿素含量及a:b值等若干问题J.植物生理学通讯，1983，11（4）:61622朱春利,张桂荣,蔡爱军等.植物隐花色素结构与功能研究进展J.基因组学与应用生物学,2009,28(1):1741783叶济宇.关于叶绿素含量测定中的Arnon计算公式J，植物生理学通讯，1985，8（6）：69714李合生主编.现代植物生理学(第2版)M.北京:高等教育出版社, 2006,1301345王萍，刘立云.槟榔叶绿素测定影响因子研究J.安徽农业科学，2010，9(5):145147
