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1、外周血细胞形态检验,赣州市妇幼保健院 丁克文, 外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化；寄生虫,讲 授 内 容,外周血细胞检验程序,血涂片的制备, 器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。 操作 在玻片近一端1/3处，加一滴血液，握住另一张边缘光滑的推片，以3045角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。,血涂片染色, 原理 瑞氏（Wright）染色法（经典染色法） 瑞氏
2、染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理 吸附作用。 试剂 瑞氏染液 瑞氏染料 0.1 g 甲醇 （AR） 60ml,pH6.8磷酸盐缓冲液（pH6.46.8） 磷酸二氢钾（KH2PO4） 0.3g 磷酸氢二钠（Na2HPO4） 0.2g 加少量蒸馏水溶解，再加至1000ml。, 操作 加瑞氏染液数滴，固定血膜约1min。 滴加约等量的缓冲液与染液混合， 室温下染色510min。 用流水冲去染液,待干燥后镜检。, 注意事项 PH对细胞染色有影响。 未干透的血膜不能染色。 染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。 不能先倒掉染液，用流水冲去。 血膜上有染料颗粒沉积，可加少许甲醇。,先在低倍镜下浏
3、览全片，了解染色好坏和 细胞分布情况，观察有无异常细胞。 选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在 油镜下计数100个白细胞，按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。,血 涂 片 镜 检, 注意事项 分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。 白细胞数明显减少的血片，应检查多张血片。 分类见有核红细胞，不计入100个白细胞内，以分类100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告，并注明所属阶段。,除慢淋外，破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别，如破碎的嗜酸性粒细胞，应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别
4、细胞作适当描述。 分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异常所见。 白细胞形态变化较大，遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实，以减少错误。,异常红细胞形态检查,大小异常,正常红细胞大小较为一致，直径69um 在各种贫血时，红细胞可出现大、小不 一。直径10um为大红细胞，15um为 巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾病等， 直径6um为小红细胞，多见于缺铁性贫 血等。 直径相差1倍以上为大小不均 右图：大红细胞（上） 小红细胞（下） (中央苍白区扩大）,形 态 异 常,RBC直径通常2.6 um，呈小圆形，细胞中心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增多
5、症（25%以上）、自身免疫性溶贫和异常Hb病（HBS、HBC病等）。,球形红细胞,红细胞呈椭圆形，横短，长大，有时呈畸形。正常人可见到， 3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，提示预后不良。,核右移,毒性变化,严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等，中性粒细胞可出现形态变化。具体表现为： 细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。 中毒颗粒：细胞质中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小等，可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致,可在细胞质或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪
6、变性后未能着色所致。,空 泡,细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨形或云雾状，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现,杜勒小体,胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重的放射损伤等有关。,核棘突,退行性变,表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行性变是细胞衰老死亡的表现。,淋巴细胞的异常变化,异形淋巴细胞：细胞大小为1025l，形态各异，呈圆形，卵圆形或不规则形。细胞核形各异，呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形，核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒；副染色质无或少量，核仁无或偶见，大小和染色性各异。细胞质中等至大量；染灰色、淡蓝色或深蓝色；可见细胞边缘染色深，核周淡染；浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝；有时可见细小嗜天青颗粒；偶见空泡。,异形淋巴细胞可见于各种病毒感染，如传染性单核细胞增多症时最为常见。此外，可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。 按形态学特征分为型： I型：空泡型或浆细胞型 II型：不规则型或单核细胞型 III型：幼稚型,欢迎批评指正 谢 谢！,
