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1、MS LCMS MS massspectrometry 基本原理 质谱分析是将样品转化为运动的带电气态离子碎片 于磁场中按质荷比 m z 大小分离并记录的分析方法 称量离子质量的工具 其整个过程类似于 12units 质谱 称量离子质量的工具 12units 基本原理 8910111213141516 质谱 称量离子质量的工具 12units 12units 基本原理 8910111213141516 质谱 称量离子质量的工具 12units 14units 基本原理 12units 8910111213141516 mass Numberofcounts 质谱 称量离子质量的工具 基本原理
2、电离装置把样品电离为离子质量分析装置把不同质荷比的离子分开经检测器检测之后可以得到样品的质谱图 基本原理 基本原理 以下为某一化合物的MS谱图 离子源 硬电离源 很多离子碎片峰 提供丰富的结构信息 主要为电子轰击源 软电离源 无碎片峰或者少量碎片峰 主要为分子离子峰 通常是M 1或M 1或加合峰 如 M 23 M 溶剂 硬电离源 电子轰击源 Electro Impactsource EI 软电离源 1 大气压电离源 AtmosphericPressureionization 2 化学电离源 ChemicalIonization CI 3 基质辅助激光解析电离 matrixassistedlas
3、erdesorption ionization MALDI 4 快原子轰击 Fastatombombardment FAB 化学电离源 1 用EIsource轰击反应气 得到反应气离子2 反应气离子与样品分子作用 使样品分子电离3 较EI能量低 碎片峰较EI少 更容易获得分子离子峰以甲烷为反应气示例 在电子轰击下 甲烷首先被电离 CH4 e C2H5 CH5 C3H7 CH3 反应气离子与样品分子反应 CH5 M M 1 CH4C2H5 M M 1 C2H6 大气压电离源 大气压电离源AtmosphericPressureionization API1 电喷雾电离源ElectrosprayIo
4、nization ESI2 大气压化学电离源AtmospherePressureChemicalIonization APCI3 大气压光致电离源AtmospherePressurePhotoIonization APPI 电喷雾电离源 1 样品溶液通过一根加有数千伏电压 高电场 的不锈钢毛细管中喷出形成静电喷雾 形成非常细小的带电雾滴2 当带电雾滴通过一个逆向的热氮气帘时 雾滴中的溶剂逐渐挥发 雾滴体积变小 表面电荷密度增加 形成强静电场使极性分子离子化 最终离子从雾滴表面溅射出来3 离子源的电压大小取决与溶剂通常电压是 2500 4500V 加正电压产生正离子 加负电压产生负离子 溶剂表面
5、张力越大 所需电压也越大 电喷雾电离源 电喷雾电离源 流出液在高电场下形成带电喷雾 在电场力作用下穿过气帘 进入质量分析器 气帘的作用 雾化 蒸发溶剂 阻止中性溶剂分子 大气压化学电离源 APCI 电晕针高压放电 使喷雾气电离 产生初级离子 喷雾气为空气或氮气初级离子立即与溶剂分子作用 形成溶剂离子 如H3O CH3OH2 溶剂离子与样品分子通过质子转移 形成 M H 正离子模式 或 M H 负离子模式 APPI的原理与此相似 以激光束代替电晕针 质量分析器 单聚焦磁偏转质量分析器 singlefocusing 双聚焦磁偏转质量分析器 doublefocusing 四极杆质量分析器 Quadr
6、upolemassanalyzer 飞行时间质量分析器 timeofflight 单聚焦磁偏转质量分析器 m z H2R2 2U是磁分析器质谱方程 是设计质谱仪的主要依据 R为一定值 因仪器条件限制 如再固定加速电位U 则m z仅与外加磁场强度H有关 扇形磁场的作用 使相同质荷比 入射方向不同的离子会聚 在讨论单聚焦分析器质量分离原理时 曾假定离子的初始能量为零 离子的动能只决定加速电压 实际上 由离子源产生的离子 其初始能量并不为零 而且其能量各不相同 经加速后的离子其能量也就不同 因此即使是质量相同的离子 由于能量 或速度 的不同 在磁场中的运动半径也不同 因而不能完全会聚在一起 这就大大
7、降低了仪器的分辨率 使相邻两种质量的离子m1和m2很难分离 单聚焦磁偏转质量分析器 双聚焦磁偏转质量分析器 Re 2U E mu2 Ez 如果电场强度E一定 离子轨道半径仅取决于离子的动能 而与离子质量无关 所以扇型电场是一个能量分析器 不起质量分离的作用 对于质量相同的离子 它是一个速度分离器 在双聚焦质谱仪中 同时采用电场和磁场组成的质量分析器 因而不仅可以实现方向聚焦 即将质荷比相同而入射方向不同的离子聚焦 而且可以实现速度聚焦 即将质荷比相同 而速度 能量 不同的离子聚焦 所以双聚焦质谱仪比单聚焦质谱仪 只能实现方向聚焦 具有更高的分辨率 双聚焦磁偏转质量分析器 这种静电分析器和磁分析
8、器配合使用 同时实现方向和能量聚焦的分析器 称为双聚焦分析器 四极杆质量分析器 由两组对角筒形构成 分别施加直流电压和射频交流电压 在一定的直流电压和交流电压比 u v 以及场半径r固定的条件下 对于某一种射频频率 只有一种质荷比的离子可以顺利通过电场到达质量分析器 这些离子成为共振离子 其它离子在运动过程中撞击在圆筒电极上而被过滤掉 飞行时间质量分析器 牵引极 加速极 检测器 常见加合离子峰 M Na M 23 加钠离子 M K M 39 加钾离子 M NH4 M 18 加铵离子 M H H2O M 19 加水 M X 这里X是指溶剂缓冲液中的阳离子 M H Solvent 溶剂加合峰 M
9、H CH3CN M 42 是CH3CN加合离子 M H CH3OH M 33 是CH3OH加合离子 常见碎片峰 二聚及多聚峰 二聚及多聚峰是化合物在质谱内形成的 样品浓度提高会增加产生多聚离子的概率 如二聚峰表现在MS谱图中经常出现 2M H 2M Na 峰等 双电荷及多电荷离子峰 有的分子结构中含杂原子 如N O S原子等 较多时 有时会带两个或多个电荷 这时可以检测到双电荷或多电荷离子峰 同位素峰 在组成有机化合物的常见元素中 大多数元素都是由具有一定自然丰度的同位素组成 含Cl 含Br 注意事项 1 精确分子量和摩尔分子量的区别 2 MS信号的强弱取决于样品的电离程度MS仅为辅助检测手段
10、 只可进行粗略判断反应液中是否有该化合物 不能从MS出峰强度来判断反应液中样品的含量 3 溶剂的选择选择极性溶剂 推荐 甲醇 乙腈 水 避免非极性溶剂 禁止使用氘代试剂 实例 例1 ExactMass 482 3 例2 ExactMass 389 2 LCMSLiquidChromatography MassSpectrum 工作原理 1 接口装置 同时也是离子源 去除溶剂 使样品离子化 2 几乎所有LC MS都用大气压电离源作为接口装置和离子源 实例 1 先看MS部分 是否有所要离子峰 必要时可通过提取离子流来进行查找 2 再看HPLC部分 含量有多少 主峰是否完全分开 3 两者结合 推测反应进行的程度和反应产生的杂质
