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1、遗传密码的破译 遗传密码这一名词在1944年薛丁谔的 生 命是什么 小册中就已提出 但在1953 年沃森和克里克建立DNA双螺旋结构以前 其真实内涵乏人知晓 60年代遗传密码的 破译 使遗传物质核酸和决定细胞功能的 蛋白质两种重要的生物化学物质之间架起 了一座桥梁 这对于从分子水平了解遗传 和细胞的生物化学有着重大的影响 它大 大推进了生物科学的进展 成为奠定分子 生物学的重要基石之一 第一个提出具体设想的是俄国出生的美国物理学家伽莫夫 G Gamov 1904 1968 当他读到沃森和克里克在英国 自然 杂志上的文章之 后 立即提出一种设想 发表在1954年2月该杂志上 伽莫夫把双螺旋 结构
2、中由于氢键生成而形成的空穴用氨基酸填上 就像钥匙和锁一样 每一个空穴的四角是4个碱基 也就是说四种碱基的排列组合形成了遗传 密码 1955 1956年间 伽莫夫又发表文章 从排列组合计算 认为二 个碱基组成的密码太少 只有42 16种 四个碱基组成的密码又太多 有44 256种 而三联密码有43 64种 足够所有蛋白质合成之需 他还 以令人信服的证据证明这种密码并不重复 对DNA的研究使伽莫夫的科学想象的激情得到满足 他建立了一个RNA 俱乐部 并将该俱乐部的成员数限定为20 每一个成员代表一种氨基酸 伽莫夫是 phe 苯基丙氨酸的英语名称缩写 而克里克是 Tyr 酪 氨酸 他们经常聚会 交流
3、信息 这场讨论对揭开遗传之谜无疑产生 了一定的影响 60年代初 对DNA或RNA中核苷酸顺序尚 无法直接分析测定 对蛋白质中氨基酸顺 序所知也有限 所以没有办法直接比较二 者在顺序上的联系 第一个用实验给遗传密码以确切解答的是德国出 生的美国生物化学家尼伦贝格 M W Nirenberg 1927 1961年他和另一位德国科学家马太 Heinrich Matthaei 在美国国家卫生研究院的 实验室内发现了苯丙氨酸的密码是RNA上的尿嘧 啶 UUU 他们在用大肠杆菌的无细胞提取液 研究蛋白质的生物合成问题时发现 当向这个提 取液中加进核酸 则合成了蛋白质 当用由单一 的尿嘧啶组成的核酸长链加进
4、这个提取液中 则 产生了由单一苯丙氨酸组成的多肽长链 这个结 果立即震动了科学界 但是测定其他氨基酸的密 码需要各种各样的碱基组合 而当时这种组合并 不是很容易得到的 它需要一种多核苷酸磷酸化 酶 美国另一位西班牙血统的生物化学家奥乔亚 Ochoa Severo 1905 于1955年发现了多核 苷酸磷酸化酶 PNP酶 帮助了尼伦贝格合成了同 聚核苷酸 多聚U PolyU 奥乔亚因发现此 酶而获得1959年诺贝尔生理学或医学奖 当他 将多聚U作为模板加入到无细胞体系中时 那就是 只有加有标记苯丙氨酸所产生的那一试管蛋白质沉 淀具有放射性 而加其他标记氨基酸的各管则均无 放射性进入沉淀 于是 第
5、一个密码便被破译出来 即UUU是苯丙氨酸的密码子 用同样的方式以 其他多聚核苷酸作为模板 又测出CCC是脯氨酸 的密码子 AAA是赖氨酸的密码子 多聚G的氨基 酸密码子当时用此法测定时遇到困难 未能测出 在取得第一阶段突破性成果之后 尼伦贝格用混合的核苷酸制备人工 合成的mRNA模板 分别测试其作 用 用2种或3种不同的核苷酸制备mRNA模板 时 PNP酶合成的产物都是杂聚物 其中 核苷酸的顺序是随机的 无法预测 但各 种三联体出现的相对几率则是可以推算出 来的 在测定了各种标记氨基酸参入蛋白 质的量之后 将其相对参入量和三联体出 现的几率加以比较 即可知道每种三联体 相对应的是那一种氨基酸
6、此法的应用有局限性 密码子中不同 核苷酸的比例固然可以推测出来 但 是它们的排序却不能确定 尽管如此 编码的范围还是大大缩小了 后来又 发现有些密码子具有重复性 即一种 氨基酸可以有多种密码子 但是每一 种密码子只编码一种氨基酸 为了搞清密码子中核苷酸顺序 尼伦贝格 巧妙地设计了第三阶段的实验 他采用的 是核糖体结合法新技术 并加入的模板一 律改为具有一定顺序的单个三联体 实验 仍在无细胞体系中进行 他们的小组合成 了全部64种单个的 顺序固定的三联体密 码 实验结果能使50种密码子所对应的氨 基酸能确定下来 实验中发现 有三个密 码子并不编码任何氨基酸 后来知道它们 是终止信号 还知道甲硫氨酸的密码子可 兼作起始信号 完整的密码子表 到1963年由与尼伦贝格 共获1968年诺贝尔生理学或医学奖的霍拉 纳 Khorana Har Gobind 1922 利用其 他技术加以确定的 遗传密码表 谢谢
