蛋白质双向电泳简介ppt课件.ppt

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1、 国sJ一简介国园eabz8弘一ll便、快速、高分辨率和重复性等优点。1975年,意大d胡连U5了蛋日质分离的分辨率而得以广泛应用.至今己经历了快四十年的发展双向电0匹园吴人脱5刑分离蛋白质群的技术园沥江2张SDS-PAGE电泳等步骤。双向电泳是指利用蛋白质的sssdlsgEeyapgodydzbzg引蛋自质组学(proteomics)园沥国河伟园口人根达人E宏SDS-PAGE电泳仪凝肽扫措仪尽捉园lcpze伟匹5吴a大小的差异,通过两次凑胶电泳达到分离蛋【电泳技木侬据侧个H物园【林吴国s园人a医弘吊e口林中国林第二向的st聚丙烯酰胺凝胶电永它侬据虫质分子量的不同将之分离。国圆仁人仁寸许许玟e

2、E川2一即使胶条在高电压下进行较长E不圆aaESss圆园仁水一庞匹l切割成固定大小而易操作的干胶条。第一向电泳分离闵PAGE胶E吟闵sn定。D刑沥仁IPG的塑料片机械E邦一人一1p弘脱逊加0切氏e技0合作。要用到的试剂学E兰万命许加0用侍用前2.5mlIPG溶胀液加入7mgDTT0.5%IPG缓冲液(310U少量溴酚蓝。平衡液:50mmoLIris-HCI(pH8.8),6moL尿素,30%甘油,2%8Es善eE东E沥30X丙烯酰胺贮存液:30%丙烯酰胺,0.8%申叉双丙烯酯胺,0.45um微孔滑膜过滑后,邀光贮存于棕色技中4度保存。玖膜过滑后,4度保存。团pe圆c酸,0.18%SDS0管状胶条的制备:广诊u国江汀05。两性电解质280ul国园李刑7e6心刑页生团。10%过硫酸铧20ul“刀“摇匀后水平注入内径为Imm的玻璃管内,上端留有s命不许刑SDS-PAGE均一胶各成分电沫果;C配制196mmx250mmxlnm的濮胶,用于1L垂直电泳系统-双向电泳(2DE)示意国等电聚焦,实现蛋白质按等电点进行分高EEESDS-PAGEEE子量大小排序分二量E虾白质根据其自身特性分布到凝脑的不同位置从而实现蛎白质的双向分离一人d

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