骨巨细胞瘤原发与继发灶的dna倍体分析与肿瘤复发关系研究

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1、B Q l 目B 旦! 丛堡墨Q 至丕班旦l 避基挝笪皿Q 挝曼出Q 丝鱼幽墨曼Q B 墨王巨l 堕Q 坠塑= 旦星! 塾挝鱼Q 垒蟹l 幽星 N o v e m b e r4 - 8 , B e i i i n gC H I N A 骨巨细胞瘤原发与继发灶的D N A 倍体分析与肿瘤复发关系研究 于顺禄徐瑾魏典刘志刚孙卫民 王瑞林臣圜李瑞宗 天津市天津骨科医院骨研所3 0 0 21 1 摘要 目的:总结经随访的骨巨细胞瘤病例,按有无临床复发而分组,进行肿瘤细胞的D N A 倍体含量测量,观 察复发与无复发及复发前后的D N A 含量变化,探讨D N A 倍体含量与骨巨细胞瘤复发的关系。 材料

2、方法:将I 陆床随访的2 0 0 余例骨巨细胞瘤病例中资料完整者,按有无复发与复发次数分为七组,其 中无复发的3 2 例,单次复发病例的原发灶3 2 例,首次复发灶3 6 例及两次以上的复发灶1 9 例,总计7 5 例1 1 9 个标本。均找出组织蜡块再次切片,进行F e u l g e n 染色( D N A 染色) 、利用M P I A S 5 0 0 彩色图文分 析系统进行D N A 倍体及其它相关指标分析,所得数据经统F 及q 计学处理。 结果:I 临床随访无复发组肿瘤细胞核的D N A 倍体含量( u 值- - - 0 9 8 5 + 0 2 1 7 ) 与复发组D N A 含量(

3、u 值 = 1 3 1 1 0 6 0 5 ) 问存在显著性差异( p 5 年的1 4 例) 。病人平均病程为1 1 3 5 个月( 1 3 6 个月) 。发病部位为:肋骨1 例,桡骨下端5 例,股骨 下端1 2 例,胫骨上端l o 例,腓骨上端3 例和腓骨下端1 例。参照E n n e k i n g 等n u 良性肿瘤的外科分期本 组病例分为:T l G o M o9 例,T l G l M o1 5 例,T 1 G 2 M o4 例,T 2 G I M o2 例和T 2 G 2 M 0 2 例。按J a f f e - L i c h t e n s t e i n 三级 病理分级:I

4、级9 例,级1 7 例,级6 例。原发灶的手术方式为:刮除植骨6 例,刮除加骨水 泥填充4 例,单纯切除5 例,切除加人工关节置换置换1 5 例和截肢术2 例。 2 、单次复发和多次复发的原发灶( B O - t C O ) B Q ! 婴卫竖S 篮2 珏H 墅避墼i 卫婴坚昌Q 盥鱼豳堡S 殴B 墨避Q 丛硷Y :基垦迦垒堑Q 翘垄堕巡基 N o v e m b e r4 - 8 , B e i i i n gC H I N A 单次复发组原发灶( B 0 ) 2 5 例( 5 0 个标本) ,多次复发组原发灶( C 0 ) 7 例( 1 4 个标本) 。共3 2 例 中,男性1 4 例,女

5、性1 8 例。平均年龄3 5 7 2 岁( 2 3 - 6 0 岁) ,2 1 “ - - 3 0 岁年龄组有1 7 例,占总例数的5 3 1 2 ;次之为3 1 - - 4 0 岁组为8 例。本组平均发现复发时间为1 5 6 5 个月( 3 4 0 个月) ,术后1 2 个月内复发的有 1 5 例占4 6 8 7 。病人平均病程为9 4 8 个月( 纠8 个月) 。发病部位为:坐骨支l 例,桡骨下端7 例,股 骨上端3 例,股骨下端l o 例,胫骨上端6 例,胫骨下端2 例和腓骨上端3 例。肿瘤的外科分期为:T l G o M o 6 例,T I G I M o1 0 例,T I G 2 M

6、 o4 例,T 2 G l M o7 例和T 2 G 2 M 0 3 例,T 2 G 2 M 1 2 例。J a f f e - L i c h t e n s t e i n 病理分级:I 级6 例,级2 0 例,级6 例。原发灶的手术方式为:单纯刮除1 2 例,刮除植骨或骨水泥填充1 0 例, 单纯切除3 例,切除加人工关节置换置换6 例和截肢术1 例。复发后的治疗手术术式为,刮除加骨水泥填 充填充7 例,人工关节置换9 例,截肢9 例和软组织复发灶清除术7 例。 3 、有多次复发组的继发灶( C 2 + C 3 ) 1 1 例2 3 个标本( 病例来我院就诊就是复发病例缺少原发灶标本,但

7、有复发两次以上的标本) 其中有 大于两次的复发,首次复发标本4 例,二次复发1 l 例,其中另有5 个三次、2 个四次和1 个五次复发。男 性7 例,女性4 例。平均年龄3 6 1 岁( 2 6 - - 5 6 岁) ,2 l 一3 0 岁6 例( 占5 4 5 5 ) 。本组平均首次发现复发时 间为1 7 个月( 1 卅0 个月) ;第二次复发时间平均为2 3 个月( 3 8 4 个月) ;第三次及其以上的复发时间平均 为2 8 个月( 2 5 0 个月) 。病人平均病程为1 2 个月( 扣1 8 个月) 。发病部位为:桡骨下端3 例,股骨上端1 例,股骨下端2 例,胫骨上端4 例,腓骨上端

8、1 例。肿瘤的外科分期为:T l G o M o4 例,T l G l M 0 5 例,T l G 2 M o 1 例,T 2 G l M o1 例。J a f f e L i c h t e n s t e i n 病理分级:I 级4 例,级5 例,级2 例。原发灶的首次手术方式 为:单纯刮除8 例,刮除植骨或骨水泥填充2 例,人工关节置换1 例。二次手术术式为,刮除植骨或骨水 泥填充4 例,单纯切除1 例,切除人工关节置换3 例,软组织复发灶清除术3 例。三次手术术式为,刮除 植骨或骨水泥填充2 例,切除人工关节置换4 例,软组织复发灶清除术2 例,截肢3 例。第四次及四次以 上手术术式,

9、软组织复发灶清除术3 次,截肢2 例。 以上各组资料统计对比资料见表1 “。 表1 、一般临床资料数据统计表 裂 铡数男女年龄范围最好发年龄组病程范围 分组l 平均年龄) 次好发年龄组( 平均病程) A 03 21 51 71 6 - 5 9 岁 3 1 4 0 岁1 1 例( 3 4 5 7 ) 1 3 6 个月 ( 3 1 3 2 岁)2 1 3 0 岁9 例( 5 3 1 2 ) ( 1 1 3 5 月) B 0 峥C O3 2 1 41 8 2 3 6 0 岁2 1 3 0 岁1 7 例2 4 8 个月 ( 3 5 7 2 岁) 3 1 4 0 岁8 例( 9 4 8 月) C 2 +

10、 C 3 1 1 2 6 - 5 6 岁 2 1 - - 3 0 岁6 例( 5 4 5 5 ) 4 1 8 个月 (361岁)(12月) 表2 、病例随访复发时间数据统计表 淤 例数随访时闻复发时间( 平均时间 分组 平均时间)首次2 次苎次 A O3 2 2 1 1 年 ( 平均6 年) B 呲O 3 2 3 4 0 个月( 1 5 6 5 月) 1 2 月1 5 例( 占4 6 8 7 ) C 2 牛C 3 1 l 1 4 0 月3 8 4 月2 5 0 月 ( 1 7 个月)( 2 3 个月) ( 2 8 个月) 1 1 2 表3 、各组病例发病部位 发病 总肋坐肱桡股股胫胫腓腓 郭岔

11、例骨骨骨骨骨骨骨骨骨骨 数枝上F 上下上下上下 分组 端端端端端端端端 A O 3 2l51 2 1 031 B O L I C O 3 21731 0623 C 2 + C 3 1 131241 表4 、各组病例病理分级和外科分期 疬例分级例数病理分级 原发灶外科分期 氖 T lT lT l T 2 分组I 级级级T 2 T 2 、 G oG lG 2 G 1 G 2G 2 M oM oM oM o M oM 1 3 291 7691 5422 3 262 0 66l O4732 1 14524511 表5 、原发灶组采用的手术方式一览表 怠原发灶手术方式 例单纯刮除水泥单纯人工截肢 分组

12、数刮除植骨填充切除关节术 3 24 2451 52 3 21 2553 6l 1 1821 表6 、继发灶组采用的手术方式览表 ,总继发灶手术力式 例首复发术式次复发术式= 以上术式 数水单人截软水单人截软 水单人截软 泥纯工肢组泥纯工肢组 泥纯工肢组 分组填切关术切填切关术切 填切关术切 充除节除充除节 除充除节除 A o3 2( 五次 1 ) B 0 牛C O3 2799 7 ( 四次12 ) C 2 + C 3 1 14l334l 33 l22 l 1 1 3 里基Q 垦垦旦! 丛鱼SQ 丕! H ! 丛塑必卫Q 丛b Q 趟鱼B 垦墨SE Q B 墨亚R 星Q L Q 鱼Y :旦垦!

13、! 丛鱼Q 避B 星丛基 N o v e m b e r4 - 8 , B e i j i n gC H I N A 二、D N A 倍体分析 将选中病例切片进行复习,按J a f f e 分级,找出无肿瘤坏死及脱钙等情况的蜡块,均重新进行5 m 切 片,分别行H E 、M a s s o n 、F o o t 和经典的F e u l g e n 染色( D N A 染色) 叭如。切片在M P I A S - - 5 0 0 彩色病理图 文分析仪上利用同济医大清平影像工程公司软件进行逐个肿瘤细胞核的D N A 的U 值分析,并打印出肿瘤 细胞D N A 含量直方图及所选各组数据。所有操作步骤均

14、参照D N A 测量要点,严格校正,以保证每次结果 的一致性K 1 3 , 1 4 。 三、资料分组与统计学处理 为便于分析将前述7 组资料再分成A 0 组( 无复发组原发灶) 、B 0 + C 0 组( 复发组和多次复发组的原 发灶) 、B I + C 1 ( 复发组和多次复发组的首次继发灶) 和C 2 + C 3 ( 多复发组二次和三次及以上的继发灶) 四组。利用计算机S P S S 软件( 美国S t a t i s t i c a lP a c k a g ef o r t h eS o c i a lS c i e n e 公司) 将所获各组数据首先进行 组问方差分析( F 检验)

15、,再依次进行组间的两两比较( q 检验) 。 结果 一、无复发组与复发组间方差分析结果 表7 中列举了各组D N A 测量的u 值( 积分光密度值) 的X S :S D 方差检验结果。图1 4 为各组份D N A 倍体含量的直方图百分比。 表7 、各组肿瘤细胞核D N A 检测U 值方差分析结果 图1 、A 0 组各倍体的百分比图2 、B O + C 0 组各倍体的百分比 1 1 4 B Q 基星卫巡墨Q 里X 基坠里堕垒丑Q 垒当山Q 垒堑幽墨Q B 墨匹l 堕Q l 堑Y :垦亘堡毯堡堡Q 挝旦垦踅M 蛋 N o v e m b e r 4 ,- 8 ,, B e i i i n g ,C H I N A 图3 、B I + C 1 组各倍体的百分比图4 、C 2 + C 3 组各倍体的百分比 二、无复发组与复发组间q 检验结果 表8 1 0 为4 组间比较q 检验结果。 表8 、各组间肿瘤细胞核D N A 检测u 值q 检验表 表9 、各组间肿瘤细胞核D N A 检测2 C 倍体值q 检验表 对比组两均值数差 处理数q 值P A 0 与B 0 + C 0 2 2 5 5 5 924 6 4 2 2 0 0 5 O 0 5 表1 0 、各组间肿瘤细胞核D N A 检测C 3 - 4 C 倍体值q 检验表 1 1 5 B Q 星l 塑! 丛鱼SQ

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