《油茶粕固态发酵及其蛋白水解物抗氧化的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《油茶粕固态发酵及其蛋白水解物抗氧化的研究（74页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、A n t i o x i d a t i o nR e s e a r c h i n go nP r o t e i nH y d r o l y s a t e f r o m C a m e l l i aM e a lb yS o H d s t a t eF e r m e n t a t i o n b y Z h u p e i At h e s i ss u b m i t t e di np a r t i a ls a t i s f a c t i o no ft h e R e q u i r e m e n t sf o r t h ed e g r e eo f
2、M a s t e ro f A g r i c u l t u r e P r o c e s s i n ga n dS t o r a g eo f A g r i c u l t u r eP r o d u c t sE n g i n e e r i n g C e I l 仃“S o u t hU n i v e r s i t yo fF o r e s t r ya n dT e c h n o l o g y 4 9 8S h a o s h a nS o u t hR o a d ，T i a n x i nD i s t r i c t C h a n g s h aH
3、 u n a n 410 0 0 4 ，R R C H I N A S u p e r v i s o r P r o f e s s o rZ h o n gh a i y a n M a y 2 0 1 2 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研 究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文 不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品，也不包含为 获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材 料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方 式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 。 作者签名
4、：球镌 V I 1 ，年 链酶垛昧 甾婿爨 苗q 五 甾骡眦 自一 链酶柢 。一AIII时 鹾婪 k迫1qo毽吣H垒毽u铀。一日og勺盘时o)【时o_口DI尝一日au一Z-o它。盘uIl_屯II时qo对一口olI口对一时一pIIoo-o_一芦oh oI：【IInN u一声矗卜 删如露程粥酶枢每嚣摊七b葵霹铽辎ogZ随疃卖桀卷枨漂匿恃cN僻 妖器g甚隳堰器琏长皿嘲球嗡谧越怕回桀巷撩漂 仪窄爿斟书隧 硕士毕业论文 油茶饼粕固态发酵及其蛋白水解物抗氧化的研究 2 3 3 蛋白质的水溶性 不同的加工工艺都会造成蛋白质不同程度的变性。蛋白指数是衡量蛋白质 水溶性的重要指标【9 7 1 。文中将以上四种不
5、同制油工艺产出的饼粕与油茶果仁进 行对比分析，测定其蛋白指数，结果如表2 4 。表2 4 显示：果仁中的蛋白其水溶 性最大，其次为枯饼，再次为粕。这说明了在压榨、浸提加工的前处理过程中， 蛋白质出现了变性。 表2 4 不同油茶饼粕的蛋白指数( 吸光值) T a b l e2 4T h er e s u l to fp r o t e i ni n d e xo f c a k ea n dm e a lo fC a m e l l i ao l e i f e r a 2 4 结论 研究结果显示，油茶饼粕中蛋白质含量较低而纤维素含量较高，氨基酸均 衡性没有达到理想氨基酸的要求，不适合直接作为饲
6、料来使用。 不同加工工艺对油茶饼粕的成分有一定的影响，低温冷榨技术生产的油茶 饼粕，其蛋白质和多糖含量较高，油脂含量较低，并且蛋白质变性程度较低。 与传统制油工艺产出的粕相比，低温冷榨粕其蛋白质含量更高而纤维素含量较 低，更适合作为发酵饲料的原料，经过适当的发酵处理，能够成为一种蛋白质 利用率高、营养价值好的理想蛋白饲料。 1 4 硕士毕业论文油茶粕固态发酵及其蛋白水解物抗氧化的研究 3 固态发酵法制备油茶粕蛋白水解物发酵条件的研究 在第二章基础之上，我们利用低温冷榨油茶粕作为原料制备蛋白水解物。 目前，对于酶解获得蛋白水解物的研究报道很多，但很少通过发酵法制取蛋白 水解物，并且传统的正交试验
7、无法获得各影响因素与响应值之间明确的函数表 达式，即回归模型，从而无法找到各因素的最佳组合以及最优的响应值。本文 拟通过D e s i g n E x p e r t 7 1 T r i a l 统计分析软件，运用响应曲面法优化油茶粕发酵条 件，建立发酵条件与蛋白水解度的数学模型，以期获得最优的发酵工艺参数。 3 1 主要的材料和试剂 3 1 1 主要材料 低温冷榨粕：采购于湖北通城； 菌种：中南林业科技大学食品科学与工程学院自行筛选。 3 1 2 主要试剂 尿素，硫酸，硫酸钾，硫酸铜，蒸馏水，三氯乙酸等，以上药品均为分析 纯，采购于天津化学试剂有限公司，电炉，烘箱，天平。 3 1 3 主要仪
8、器 中草药粉碎机：F W l 3 5 型，天津泰斯特仪器有限公司； 精密酸度计：p H S 一3 C 型，上海雷磁仪器厂； 凯氏定氮仪：K D Y - 9 8 3 0 型，北京通润源机电有限公司 3 2 试验方法 3 2 1 总蛋白质的测定 凯氏定氮法G B T6 4 3 2 9 4 3 2 2 游离氨基酸的测定9 8 】 1 5 硕士毕业论文油茶粕固态发酵及其蛋白水解物抗氧化的研究 取原料5g 溶于蒸馏水并定容到1 0 0m L 。混匀后吸取2 0m L 置于2 0 0m L 烧杯中，加水6 0m L ，用O 0 5m o l LN a O H 调整p H 值到8 2 。加入1 0m L 甲
9、醛 溶液，混匀。再用0 0 5m o l L N a O H 标准溶液滴定到p H9 2 ，记录消耗N a O H 标 准溶液。 3 2 3 水解蛋白的测定9 9 】 把原料和发酵好的粕粉碎过1 0 0 目筛，烘干至恒重。准确称量发酵取粕5g ， 加入6 0m L 蒸馏水，用0 0 5m o l LN a O H 调整p H 值到8 2 ( 碱性) ，振荡1h 。 静置1h 后，4 0 0 0r m i n 离心1 0r a i n 。定容1 0 0m L 备用。取1 0m L 上述水解液， 缓缓加入1 0 三氯乙酸1 0m L ，边加边均匀搅拌，静置lh 后，4 0 0 0r m i n 离
10、心 5r a i n ，转移。取一定量上清液测总氮。 3 2 4 蛋白水解度( D H ) 测定【1 0 0 】 D H = 麓磊然鬻枷。 2 1 虿百顶而葡满丽x 1 U U 3 2 5 发酵配方的选择 在发酵条件相同的条件下，分别按以下配方进行固态发酵，测定不同发酵 配方得到的水解度： ( 1 ) 1 0 0g 油茶粕+ 2 0g 玉米粉+ 3 5m L 水 ( 2 ) 1 0 0g 油茶粕+ 2 0g 玉米粉+ 3 5m L 水+ 0 8g 尿素 ( 3 ) 8 0g 油茶粕+ 2 0g 玉米粉+ 2 0g 米糠+ 3 5m L 水 ( 4 ) 8 0g 油茶粕+ 2 0g 玉米粉+ 2
11、 0g 米糠+ 3 5m L 水+ 0 8g 尿素 3 2 6 单因素实验 本实验选择了影响油茶粕固态发酵主要3 个因素：发酵时间、发酵温度和 接种量，分别考察这3 个因素对蛋白水解度的影响。 ( 1 ) 发酵时间对蛋白水解度影响 固态发酵用4 5 4g 卷封式罐头瓶原料按2 ，2 5 中选择的发酵配方，发酵温度 为3 0 ，接种量1 0 进行厌氧发酵，考察发酵时间( 4d 、5d 、6d 、7d 、8d ) 对蛋白水解度的影响。 1 6 硕士毕业论文油茶粕固态发酵及其蛋白水解物抗氧化的研究 ( 2 ) 发酵温度对蛋白水解度影响 固态发酵用4 5 4g 卷封式罐头瓶原料按2 2 5 中选择的发
12、酵醪，在( 1 ) 确定的 发酵时间的条件下，按接种量1 0 。进行厌氧发酵，考察发酵温度( 2 0 “ 1 2 、2 5 、 3 0 、3 5 、4 0 ) 对蛋白水解度的影响。 ( 3 ) 接种量对蛋白水解度影响 固态发酵用4 5 4g 卷封式罐头瓶原料按2 2 5 中选择的发酵醪，在( 1 ) ( 2 ) 已经 确定的发酵时间、发酵温度的条件下，考察接种量( 6 、8 、1 0 、1 2 、 1 4 。) 对蛋白水解度的影响。 3 2 7 响应面优化发酵工艺 在单因素实验的前提下，考察发酵温度、发酵时间和接种量三者对蛋白水 解度的影响，本实验采用D e s i g ne x p e r
13、t 7 1 6 软件进行分析。 3 3 实验结果与分析 3 3 1 配方的选择 通过试验方法，每个配方可得到相应D H 值，列成下表3 1 表3 1 配方D H 值测定结果 T a b l e3 1t h ed e t e r m i n a t i o nr e s u l t so fD H 从表3 1 可以看出，配方1 的D H 值最高，表明水解蛋白质效果最好。我们把配 方1 进行单因素试验。 3 3 2 单因素试验结果 螽 羹 蔷 图3 1 发酵时间对蛋白水解度的影响 F i g 3 1t h ee f f e c to ft h ef e r m e n t a t i o nt i
14、 m eO nt h eD H 1 7 硕士毕业论文油茶粕固态发酵及其蛋白水解物抗氧化的研究 从图3 1 中可以看出，蛋白水解度随着时间的延长而增大，当时间达到6d 的时候水解度趋于稳定。 毋2 0 运1 5 羹1 0 皿5 嘲O 发酵温度对蛋白水解度的影响 1 02 03 04 05 0 发酵温度 C 图3 2 发酵温度对蛋白水解度的影响 F i g 3 2T h ee f f e c to f t h ef e r m e n t a t i o nt e m p e r a t u r eo nt h eD H 从图3 2 中可以看出，蛋白质水解度随着发酵温度的升高而升高，达到最大 值后
15、又降低。当温度为3 0 时水解度最大。 接种量蹦蛋白水解窿的影响 1 9 群 嘎1 8 5 】8 1 5 5 图3 3 接种量对蛋白水解度的影响 F i g 3 3T h ee f f e c to ft h ei n o c u l u mi n f l u e n c eo nt h eD H 从图3 3 可以看出，接种量越大，蛋白质水解度越大。考虑成本问题，本试 验采用1 0 作为最适接种量。 3 3 3 响应面分析法优化工艺设计及试验结果 本试验依据前面单因素试验的结果，依照C e n t r a lC o m p o s i t e 中心组合，设 计3 因素3 水平的试验，试验因素与
16、水平设计见表3 。2 。 表3 2 响应面分析因子及水平表 T a b l e3 2F a c t o r sa n dl e v e l so fr e s p o n s es u r f a c ea n a l y s i st a b l e 表3 3 响应面试验设计及结果 1 5 5 2 51 6 4 9 7 5 7 5 7 5 7 4 3 l 7 6 8 6 6 6 6 6 6 6 6 5 2 5 1 8 2 0 1 9 6 1 0 3 5 3 5 2 5 2 5 3 5 3 5 3 0 3 0 2 1 5 9 3 8 4 l 3 0 3 0 3 0 3 0 3 0 3 0 3 0 1 8 7 2 1 7 5 0 2 3 9 9 1 8 1 2 2 1 8 3 1 7 2 8 2 5 2 l 2
