江苏地产白首乌c21甾苷抗衰老及抗炎药理学实验研究

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1、徐州医学院 硕士学位论文 江苏地产白首乌C甾苷抗衰老及抗炎药理学实验研究 姓名:张士侠 申请学位级别:硕士 专业:药理学 指导教师:张洪泉 20070501 徐州医学院硕士学位论文 缩略词表 A b b r e v i a t i o n 缩略词 英文全称中文全称 A a b s o r b a n c e 吸光度 A A A d j u v a n ta r t h r i t i s 佐剂关节炎 C S G C 2 1S t e r o i d a lG l y c o s i d eC 2 l 甾苷 D g a lD g a l a c t o s e D 一半孚L 糖 E L I S

2、A e n z y m e l i n k e di m m u n o s o r b e n ta s s a y 酶联免疫吸附测定 F C AF r e u n d sc o m p l e t ea d j u v a n t完全弗氏佐剂 H E h e m a t o x y l i na n de o s i n 苏木精一伊红 i g i n t r a g a s t d cg a v a g e 灌胃 I FI n t e r f e r o n 干扰素 I L 一6i n t e d e u k i n - 2白细胞介素一6 I N O SI n d u c i b l en

3、 i t r o g e l l诱生型一氧化氮合成酶 L DL e t h a ld o s e致死剂量 M D A M a l o n d i a l d e h y d e 丙二醛 N F KBN u c l e a rf a t o rk a p p a - - B核因子K B N Kn a t u r a lk i l l i n gc e l l自然杀伤细胞 N O N i t r o g e n 一氧化氮 P G E 2P r o s t a g l a n d i n前列腺素E 2 R AR h e u m a t i s ma r t h r i t i s类风湿关节炎 S I

4、 s p l e e ni n d e x 脾脏指数 S O D S u p e r o x i d ed i s m u t a s e 超氧化物歧化酶 T I t h y m u si n d e x 胸腺指数 T N F - a t l l r f l o rn e c r o s i s f a c t o r - a l p h a 肿瘤坏死因子一a l 徐州医学院硕士学位论文 论文独创性声明 本论文兰三蔓幻警产鱼萱鱼鱼丛釜董堑毋良耋至拄盖造型堑龇我个人 在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致 谢的地方外,不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。

5、其他同志对本 研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。 作者签名: 论文使用授权声明 本人完全了解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保 留送交论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的 全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在 解密后遵守此规定。 作者签名:j 兰1 2 多一导师签名:璐同期:上蚀扯 徐州医学院硕士学位论文 论文审阅认定书 研究生玉量 ;显- i 3 蒸z 在规定的学习年限内,按照研究生培养方案的要求,完 成了研究生课程的学习,成绩合格;在我的指导下完成本学位论文,经审阅,论 文中的观点

6、、数据、表述和结构为我所认同,论文撰写格式符合学校的相关规定, 同意将本论文作为学位申请论文送专家评审。 导师签名:蓦摒日期:三学 j 徐州医学院硕士学住论文 江苏地产白首乌C :,甾苷 抗衰老及抗炎药理学实验研究 中文摘要 自首乌为传统补益类中药,功效为补肝肾,强筋骨,益精血,健脾消食,解毒 疗疮,主产于江苏。现代药理学研究表明具有抗肿瘤、调节免疫功能、抗氧化等 多方面作用,自首乌c 2 。甾苷( C :。S t e r o i d a lG l y c o s i d e ,C S G ) 是白首乌主要有效部 位。 1 抗衰老作用研究 目的以维生素E ( 1 0 0 m g k g d )

7、 为对照,观察高( C H ) 、中( C M ) 、低( C L ) 剂量组( 2 0 、4 0 、8 0 m g k g d ) 抗氧化、耐缺氧、抗疲劳等抗衰老作用。 方法采用健康小鼠常压耐缺氧模型、健康小鼠负重游泳模型和D g a l 亚急 性衰老小鼠模型,观察C S G 对健康小鼠常压耐缺氧和负重游泳时间和D g a l 亚急 性衰老小鼠体内抗氧化酶和端粒酶活性以及脂质过氧化产物M D A 含量变化的影 响。测定健康小鼠在常压钠石灰密闭容器中耐缺氧时间和常温水槽负重游泳时间, 并取D g a d 衰老模型小鼠血清、心、肝、脑组织,黄嘌呤氧化酶法测定S O D 活 性,T B A 法测定

8、M D A 含量,E L I S A 法检测端粒酶活性。 结果研究结果表明与正常对照组相比,C S G 能够延长健康小鼠常压耐缺氧 ( P O O 5 ) ;在脑组织中,端粒酶活性变化均无显著差异( P O o s ) 。见表5 I = - 立堡竺雩翌旦二望型遭坠竺燮! 塑垫璧鱼呈! 兰:! 三! : 兰一一 心( n m o l ! ) 肝( n m o I J ) i 忑蕊一 1了08士z7二=:42 N 2 o l 。0 4 4 - 0 2 7 。i 磊赢F V E 0 4 - o 3 7 。 O 4 3 0 2 0 。 3 6 6 0 5 2 c L O 7 5 :1 :0 2 0 。

9、 O 4 9 + - 0 2 2 。 3 6 8 n 6 l c M I 3 5 + 0 5 2 O 5 9 0 2 7 。 3 9 3 o 6 4 c I I l 4 8 + 0 1 9 。”6 “0 5 4 - - + 0 2 3 。 4 5 7 o 6 9 竺 ! :竺圭! :! ! : O - 4 4 - + 0 1 4 “ 3 6 9 + 06 l 徐州医学院硕士学位论文 讨论 自由基是人体正常代谢的产物,它在代谢过程中连续不断的产生,但同时机 体存在相应的防御系统,如抗氧化酶系统,故在正常情况下机体的自由基水平可 保持动态平衡。一旦机体的自由基平衡由于某种原因遭到破坏,大量积累的自

10、由 基,特别是氧自由基,将诱发机体内一系列脂质氧化连锁反应,造成生物膜结构 和功能损伤,破坏核酸,蛋白质等生物分子,引发衰老和疾病的发生。针对自由 基学说,若能通过适量补充外源性抗氧化剂,增强机体自由基防御系统的机能, 如提高超氧化物歧化酶 O 0 5 ) 。见表7 表7c s c x C d 、鼠毛细血管通透性、小鼠耳廓肿胀的影响( 五s ,n = 1 0 ) 。P 0 0 5 “5 P 0 0 1 与N 组比较;P o 0 5 P o 0 1 和模型组相比;P 0 0 5 “P o 们和阳性对 照组相比 4C S G 棉球诱导大鼠肉芽肿的影响 和M 组相比,C L 、C M 、C H 和P

11、 C 组棉球肉芽肿干重显著减轻;和P C 组相比, C H 组无显著差异,C M 、C L 组肉芽肿较重,C H 组抑制肉芽肿生长作用强于C L 、 C M 组。见表8 徐州医学院硕士学位论文 表8C S G 对4 、鼠棉球肉芽肿的影响( 五s ,n = 1 0 ) 竺竺篓墨 M C L C M C H P C 5 78 “ 1 1 6 4 鞴1 3 士1 0 蚰“ 4 8 帖士9 1 3 “ 4 1 孵1 02 6 。 3 9 “1 0 ,o P ( o 0 5 P o 0 1 和模型组相比;P o 0 5 “P ( o O l 和阻性对照组相比 5C S G 对大鼠佐剂性关节炎的影响 5

12、1C S G 对A A 大鼠体重的影响 和N 组相比,造模后1 5 天、2 5 天的从大鼠体重增长幅度较小,显著低于N 组;和M 组相比,造模后1 5 天C L 、C M 、C H 组和P C 组体重无差异,造模后2 1 天( 给药l 周后) 体重出现差异,C L 、C M 、C H 组小鼠平均体重大于M 组,P C 组无差异;和P C 组相比,造模后2 l 天、2 9 天后C L 、C M 、C H 组小鼠平均体重 均较高。见表9 ,图2 表9 对A A 大鼠体重的影响( x s ,n 2 1 0 ) 组别造模前体重g 造模后体重g 第1 4 天 第2 l 天 第2 9 天 M C L C

13、M C H P c 2 0 7 4 0 6 5 7 2 0 6 7 0 士6 5 3 2 0 7 1 0 7 2 0 2 0 7 0 6 9 2 6 2 0 7 3 0 1 1 2 0 2 1 4 8 士6 3 2 “o 2 1 3 6 5 = 5 1 5 4 0 2 1 4 8 5 = 6 3 2 2 0 2 1 4 2 + 7 1 9 “ 2 1 3 3 1 2 9 2 0 2 0 9 6 5 = 5 9 9 2 0 2 1 9 6 5 = 1 1 1 8 8 0 “ 2 2 3 0 0 5 = 6 船8 “ 2 2 4 4 5 = 1 0 9 4 0 。+ 1 2 1 0 5 5 = 1

14、 4 8 7 2 5 2 1 1 8 5 = 9 1 0 2 2 3 0 6 士1 2 ,2 I “ 2 3 3 1 1 0 9 2 + “ 2 5 4 0 土1 4 “ 2 0 5 6 1 2 ,黯8 0 N2 0 6 9 0 5 9 72 2 4 2 7 2 22 4 2 1 0 4 6 52 5 0 8 1 0 3 7 对照组相比 5 2C S G 对A A 大鼠免疫器官指数的影响 和N 组相比,其它各组1 r I 和S I 有明显下降;和M 组相比,C L 、C M 、C H 组 T I 明显提高,P C 组小鼠1 1 明显下降,各组S I 无差异;和P C 组相比,C L 、C M

15、、 C H 组明显提高。C S G 能提高n ( 0 0 5 ) 。见表1 0 表1 0C S G 对A A 大鼠胸腺、脾脏指数的影响( x :l :s ,n 2 1 0 ) 组别 1 “ 1 ( r n g 1 0 0 9 )S 1 ( m e , 1 0 0 9 ) M C L C M 伽 P C 1 0 8 7 6 4 “ 2 6 3 4 “ 1 2 8 5 7 5 :2 9 6 7 + “ 1 3 1 4 9 _ + 3 6 6 6 “。“ 1 2 5 5 9 + 4 4 8 9 。+ 。“ 4 7 ,6 7 4 - 1 2 8 1 。 3 0 6 3 7 4 - 3 3 2 I “ 3 1 1 1 2 4 - 5 5 , 1 5 “ 2 9 6 9 8 + 1 8 7 6 “ 2 4 2 4 8 8 9 1 5 “ 2 2 3 7 4 5 :6 9 3 5 “3 N1 5 5 3 0 4 - _ 4 7 3 3 4 1 6 8 7 - + 4 7 ,5 7 x i 万爵啜i 面磊鬲磊赫百订;= 贾了诵赢荔而石瓦i 百耳c0 o 和 阳性对照组相比 5 3C S G 对从大鼠关节评分的影响 各组小鼠1 4 ,2 0 ,2 4 ,2 8 天关节评分见表l l ,和M 组相比,C L

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