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1、k 分类号：Q 9 3 密级： 单位代码： 学号： 1 0 4 2 2 2 0 0 8 2 0 3 4 8 博士学位论文 论文题目：红树林纤维素降解菌和菌群及其相关酶类 的研究 R e s e a r c ho nc e l l u l o l y t i cm i c r o o r g a n i s m s ，m i c r o b i a l c o n s o r t i a ，a n dr e l a t i v ec e l l u l a s e si nm a n g r o v ee c o s y s t e m s 2 0 1 1 年5 月3 1 日 覆器量尹鼍多墨 r
2、 作 专 导 ，。【眵俸hR嚏_倦h k 一 链，：矿 ：霉 摹一曩雾蠢叠罗 d磊“髻 山东大学博士学位论文 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。 对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方 式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：畔 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大
3、学可以将本学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：阳导师签名：隧日期：丝塑删 山东大学博士学位论文 目录 目录I 摘要I A b s t r a c t V 缩略词表 第一章研究背景和立题依据1 1 1 研究背景1 1 1 1 红树林生态系统。1 1 1 2 木质纤维素。4 1 1 3 纤维素酶7 1 1 4 微生物宏基因组学1 5 1 2 立题依据和研究内容2 1 1 2 1 立题依据21 1 22 研究内容2 2 第二章来自红树林的纤维素酶产生菌G 2 1 的分离与鉴定
4、2 3 2 1 引言2 3 2 2 材料与方法2 3 2 2 1 实验材料2 3 2 2 2 基本实验方法2 6 2 2 3 菌株G 2 1 的分离和保存2 9 2 2 4 菌株G 2 1 的形态特征分析2 9 2 2 5 菌株G 2 1 的生理生化特征分析2 9 2 2 6 菌株G 2 1 的全细胞脂肪酸测定3 0 2 2 7 菌株G 2 1 的G + Cm 0 1 含量测定3 l 2 2 8 菌株G 21 的D N A D N A 杂交分析3l 2 2 9 菌株G 2 1 的1 6 Sr R N A 和M L S A 基因序列扩增一3 3 2 2 1 0 菌株G 2 1 的系统发育学分析3
5、 3 2 3 结果与分析3 4 山东大学博士学位论文 2 3 1 菌株G 2 1 的分离3 4 2 3 2 菌株G 2 1 的形态特征3 4 2 3 3 菌株G 2 1 的生理生化特征3 5 2 3 4 菌株G 2 1 的全细胞脂肪酸组成。3 7 2 3 5 菌株G 2 1 的系统发育分析3 7 2 3 6 菌株G 2 1 的M L S A 分析3 9 2 4 讨论z 1 0 第三章菌株G 2 1 分泌的纤维素酶C e l 5 A 的基因克隆、表达与性质分析4 3 3 1 引言4 3 3 2 材料与方法4 4 3 2 1 实验材料4 4 3 2 2c e l 5 A 的基因克隆4 5 3 2
6、3c e l S A 的基因序列分析4 5 3 2 4C e l 5 A 的蛋白表达4 6 3 2 5C e l 5 A 的蛋白纯化。4 6 3 2 6C e l 5 A 的酶活检测4 7 3 2 7C e l 5 A 的基本酶学性质分析4 7 3 2 8C e l 5 A 的活性受金属离子和化学物质影响的分析4 8 3 2 9C e l 5 A 的底物特异性分析4 8 3 2 1 0C e l 5 A 的酶解产物分析4 8 3 2 1 1C e l 5 A 的P r o c e s s i v i t y 性质分析4 9 3 3 结果与分析4 9 3 3 1C e l 5 A 的基因克隆4
7、9 3 3 2C e l 5 A 的序列分析5 0 3 3 3C e l 5 A 的表达与纯化5 3 3 3 4C e l 5 A 的基本酶学性质分析。5 3 3 3 5C e l 5 A 的活性受金属离子和化学物质影响的分析。5 5 3 3 6C e l 5 A 的底物特异性分析5 6 3 3 7C e l 5 A 的酶解产物分析5 7 3 3 8C e l 5 A 的P r o c e s s i v i t y 性质分析5 9 山东大学博士学位论文 3 4 讨论5 9 第四章来自红树林的高稳定性纤维素降解菌群的富集与鉴定6 3 4 1 引言6 3 4 2 材料与方法6 3 4 2 1 实
8、验材料6 3 4 2 2 基本实验方法6 7 4 2 3 菌群富集和传代培养7 0 4 2 4 菌群S Q D 1 1 对各种条件下底物的降解效果分析7 l 4 2 5 菌群S Q D 1 1 的代谢产物分析7 1 4 3 6 菌群S Q D 1 1 中纤维素酶存在形式分析7 1 4 2 7 菌群S Q D 一1 1 的结构随时相的变化分析7 2 4 2 8 菌群S Q D 1 1 的结构在传代过程中的变化分析7 2 4 3 9 菌群S Q D 1 1 的结构在改变培养基后的变化分析7 2 4 3 1 0 菌群S Q D 1 1 的组成分析。7 2 4 3 1 1 菌群S Q D 1 1 中单
9、菌的分离。7 3 4 3 1 2 菌群S Q D 1 1 中分离所得单菌的酶活性检测7 3 4 3 结果与分析7 4 4 3 1 菌群富集培养7 4 4 3 2 菌群传代培养7 6 4 3 3 菌群S Q D 一1 1 对各种条件下底物的降解效果。7 6 4 3 4 菌群S Q D 1 1 的代谢产物分析7 7 4 3 5 菌群S Q D 1 1 中纤维素酶存在形式分析7 8 4 3 6 菌群S Q D 一1 1 的结构随时相的变化分析7 9 4 3 7 菌群S Q D 1 1 的结构在传代过程中的变化分析8 0 4 3 8 茵群S Q D 1 1 在改变培养基后的结构变化分析8 0 4 3 9 菌群S Q D 一1 1 的组成分析8 1 4 3 1 0 菌群S Q D 1 1 中单菌的分离。8 4 4 3 1 1 茵群S Q D 1 1 中分离所得单菌的酶活性检测8 5 4 4 讨论。8 5 第五章茵群S Q D 1 1 的宏基因组测序与分析8 9 m 山东大学博士学位论文 5 1 引言
