《甘氨酸亚铁在缺铁仔猪模型内生物学效应研究及对肠道铁相关吸收蛋白的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《甘氨酸亚铁在缺铁仔猪模型内生物学效应研究及对肠道铁相关吸收蛋白的影响（58页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、浙江大学硕士学位论文 1 分类号： S816.72 单位代码：10335 密 级： 学 号： 21017015 硕硕 士士 学学 位位 论论 文文 甘氨酸亚铁在缺铁仔猪模型内生物学效应研究及甘氨酸亚铁在缺铁仔猪模型内生物学效应研究及 对肠道对肠道铁相关吸收蛋白的影响铁相关吸收蛋白的影响 Biological Effects of Iron Glycine Chelate and Its Impact on the Relevant Transport Protein in Iron-Deficiency Weanling Piglets 作者姓名作者姓名: : 冯国强冯国强 指导老师：指导老师
2、： 冯杰冯杰 研究员研究员 学学 科：科： 动物营养与饲料科学动物营养与饲料科学 研究方向：研究方向： 有机有机微量元素微量元素 所在学院：所在学院： 动物科学学院动物科学学院 提交日期：提交日期： 二零一二年二零一二年五五月月 中国杭州 浙江大学硕士学位论文 2 甘氨酸亚铁在缺铁仔猪模型内生物学效应研究及对甘氨酸亚铁在缺铁仔猪模型内生物学效应研究及对 肠道铁相关吸收蛋白的影响肠道铁相关吸收蛋白的影响 论文作者签名论文作者签名: : 指导教师签名指导教师签名: : 论文评阅人 1： 评阅人 2： 评阅人 3： 答辩委员会主席： 委员 1： 委员 2： 委员 3： 答辩日期： 浙江大学硕士学位论
3、文 3 Biological Effects of Iron Glycine Chelate and Its Impact on the Relevant Transport Protein in Iron-Deficiency Weanling Piglets Authors signature: Supervisors signature: External Reviewers: Examining Committee Chairperson: Examining Committee Members: Date of oral defence： 浙江大学硕士学位论文 4 浙江大学研究生学位
4、论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得 浙江大学浙江大学 或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与 我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 浙江大学浙江大学 有关保留、使用学位论文 的规定， 有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘， 允许论文被查阅和借阅。本人授权 浙江大学浙江大学
5、可以将学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存、汇编学位论文。 （保密的学位论文在解密后适用本授权书） 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 浙江大学硕士学位论文 5 致谢致谢 值此硕士论文完成之际，谨向两年来关心和帮助我的人表示衷心的感谢，特 别向我的指导老师冯杰教授致以最诚挚的谢意。 本论文的选题、论证、试验和撰写，是在导师的悉心指导和全面关怀下完成 的。两年来，导师为我的成长倾注了大量的心血和精力，在生活、学习和科研中 给予了无微不至的关怀和教诲；导师渊博的知识、严谨的治学态度、高尚的为人 品格、
6、 对学科前言敏锐的洞察力、良好的工作作风和不断进取的开拓创新精神深 深的影响着我，将使我受益终身。借此机会再次表示衷心的感谢和崇高的敬意。 本论文的完成也离不开浙江大学饲料科学研究所优良的学习环境、 先进的实 验设备和良好的学术氛围，得益于各位老师、同学对我的关心和帮助。在此我要 感谢研究所汪以真、 占秀安、 李卫芬、 刘波静、 胡彩虹等各位老师的支持和帮助。 感谢师兄周源、孙宏、熊吉敏、胡鹏、刘伟龙、袁栋，师姐高彦华、徐娥、王永 侠、刘倚帆、任洋、朱琳娜、袁章琴，同窗李丹丹、夏磊、谭莉、马玉娥，师弟 方翠林、李斌、郭孝烨、史明雷，师妹吴静、郑兰、徐丽，感谢室友杜勇杰、郝 柱、曹广添，感谢栾兆
7、双、刘连龙、李雅丽、尹娜、李艳玲、陈学秋、薛现凤， 感谢饲料所硕士 10 班以及动科院 10 研博会的同学们， 感谢所有帮助过我的兄弟 姐妹们，感谢你们在这两年的硕士生涯中对我学习和生活上的关心与帮助，使我 拥有两年愉快的生活。 在此，我还要深深感谢父母，感谢他们多年来的养育之恩，感谢他们无私的 爱和默默的支持，感谢亲人们在我求学之路上所给予的鼓励和关心，家人和朋友 的关心是我前进的动力。 同时，向参加本次论文评阅和答辩的全体老师致以诚挚的谢意。 最后，向所有关心和帮助过我的人致以衷心的感谢和诚挚的祝福！ 冯国强 二零一二年五月 于浙大紫金港 浙江大学硕士学位论文 6 英文缩略表英文缩略表 英
8、文缩写 英文全称 中文名称 Fe- Gly Iron glycine 甘氨酸铁 FeSO4 Ferrous sulfate 硫酸亚铁 GAPDH glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 DMT1 Divalent metal transporter 1 金属离子转运蛋白 FP1 Ferroportin1 膜铁转运蛋白 PepT1 Peptide transporter 1 小肽转运蛋白 Hb Hemoglobin 血红蛋白 TIBC Total iron-binding capacity 总铁结合力 SOD Superoxide
9、 dismutase 超氧化物岐化酶 XOD Xanthine oxidase 黄嘌呤氧化酶 CAT Catalase 过氧化氢酶 SDH Succinate dehydrogenase 琥珀酸脱氢酶 AKP Alkaline phosphatase 碱性磷酸酶 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 Rpm Round per minute 每分钟转数 RBC Red blood cell 红细胞数 PCV Packed cell volume 红细胞压积 HCT Red blood cell specific volume 血小板计数 浙江大学硕士学位论
10、文 7 中文摘要中文摘要 本试验选取 12 头 25 日龄 杜长大三元杂交仔猪 （6.500.52kg）为研究对 象，按试验要求分为 3 个处理组， 对照组、硫酸亚铁组和甘氨酸亚铁组，每个 处理 4 个重复，每个重复 1 头仔猪。各组饲喂基础缺铁日粮 19d，以建立临界缺 铁动物模型。然后补充 120mg/kg 硫酸亚铁和甘氨酸亚铁（以铁计） ，饲喂 10d。 研究甘氨酸亚铁在缺铁仔猪模型内生物学效应，主要测定生长性能、肉色、免疫 性能、血液生化指标、抗氧化性能、组织铁含量等相关指标；通过荧光定量 PCR 方法，研究甘氨酸亚铁对仔猪肠道内铁相关转运蛋白 PepT1、DMT1、FP1 基因 表达
11、水平的影响， 初步探讨甘氨酸亚铁在肠道内的吸收机制。 主要研究结果如下： 1.1. 建立缺铁仔猪模型建立缺铁仔猪模型 25 日龄断奶仔猪饲喂 19d 缺铁日粮，血液中血红蛋白含量降到 85g/L，血清 铁含量大幅下降，总铁结合力显著提高，表明断奶仔猪缺铁模型建立。 2.2. 甘氨酸亚铁对仔猪甘氨酸亚铁对仔猪生产性能的影响生产性能的影响 补充甘氨酸亚铁一定程度上提高仔猪平均日增重和料肉比，与对照组相比， 仔猪平均日增重增加了 9.24%，料肉比降低了 10.47%。与硫酸亚铁相比，仔猪 平均日增重增加了 4%，料肉比降低了 3.75%。 3. 3. 甘氨酸亚铁对仔猪肉色的影响甘氨酸亚铁对仔猪肉色
12、的影响 与对照组相比，日粮中添加铁源能够显著提高肉色红度值（a*） （P0.05） 。硫 酸亚铁组血小板计数最高，红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积、平均红细 胞压积于甘氨酸亚铁组最高。 浙江大学硕士学位论文 8 5 5. .甘氨酸亚铁对甘氨酸亚铁对仔猪仔猪免疫功能的影响免疫功能的影响 1）器官免疫 添加铁源对仔猪免疫器官影响不显著（P0.05） 。与硫酸亚铁相比，甘氨酸 亚铁一定程度上提高了脾脏指数、胸腺指数和淋巴结指数，分别提高 14.49%、 11.86%和 3.31%。 2）体液免疫 与对照组和硫酸亚铁组相比， 日粮中添加甘氨酸亚铁显著提高血清中 IgG 水 平（P0.05） 。 1
13、.1.8 8 本研究的目的和意义本研究的目的和意义 氨基酸络合铁是第三代铁源添加剂，具有生物学效价高、吸收率高、化学结 构稳定、增强免疫力、利于环保等特点，是当前国内外研制和开发应用的热点。 甘氨酸亚铁螯合物是由可溶性铁盐与氨基酸按 1:2 摩尔比以共价键结合而成的 金属氨基酸螯合物，甘氨酸为分子量最小的氨基酸，理论上在体内更容易被吸收 利用（Ashmead et al.， 2001） 。本研究以断奶仔猪缺铁模型为研究对象，分别补 充硫酸亚铁和甘氨酸亚铁两种铁源，通过测定仔猪生产性能、免疫性能、血液生 化指标、抗氧化指标、组织中铁含量等指标，评定甘氨酸亚铁的生物学利用率。 研究表明，氨基酸微量
14、元素螯合物高生物学效价与其高效的吸收转运机制有关。 铁调节吸收转运蛋白对于机体肠道铁吸收具有至关重要的作用， 研究铁调节吸收 转运蛋白的变化对阐明不同形式铁的吸收途径具有较为重要的意义。 本研究利用实时荧光定量 PCR 技术，研究甘氨酸亚铁对十二指肠和空肠内铁相 关转运蛋白 DMT1、PepT1、FP1 mRNA 含量变化的影响，对甘氨酸亚铁的吸收 机制进行初步探讨。 浙江大学硕士学位论文 33 2 2 材料与方法材料与方法 2 2.1 .1 材料材料 2.1.1 主要试剂 硫酸亚铁（分析纯，购自华东医药公司） 甘氨酸亚铁（食品级，购自 Pancosma S.A） Trizol（Invtrog
15、en 公司） ； M-MLV Reverse Transcriptase cDNA synthesis kit（Promega 公司） SYBR Premix Ex-TaqTM Kit（TaKaRa 公司） 铁代谢指标测定试剂盒（购自南京建成生物工程研究所） 2.1.2 主要试验仪器 可见分光光度计（UV-2100，美国 Unico 公司） 原子吸收光谱仪（日本岛津，AA6501） 凝胶成像系统（BioDoc-It Imaging System，美国 UVP 公司） 超速冷冻离心机 （Eppendorf centrifuge 5804R，德国 Eppendorf 公司） 荧光定量 PCR 仪（Applied Biosystems Stepone Plus，美国 Applied Biosystems 公 司） 超纯水净化装臵器（Milli-Q，美国 Millipore 公司） 电热恒温水槽（DK-8D，上海森信实验仪器有限公司） 2.1.3 试验动物和饲粮 25 日龄杜长大三元杂交断奶仔猪，由宁波振宁牧业有限
