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1、,临床标本的细菌学检验,第一节 血液及骨髓标本 一、 血液标本 （一）标本采集 静脉采血，应严格消毒血培养瓶盖和皮肤，用无菌采血装置采血，不换针头，直接将血液标本注入血培养瓶中，注入血液后应颠倒混匀以防凝固。采用真空采血装置可降低污染。,1、采血时间 一般应在抗菌药物治疗前，发热初期或高峰时抽血。研究表明细菌通常在寒战或发热前1h入血，因为超过发热峰值后，病原菌的检出率会随之降低。对间歇性菌血症应在寒战或体温高峰到来之前采集血培养，因为细菌流入血液与发热通常间隔1h，实际上在发热后由于细菌很快会从血液中清除，因此，应尽快抽取血培养。,2、采血部位 以无菌操作在患者肘静脉采血。儿童和婴幼儿其采血
2、的部位多为颈部和腹股沟，这两个部位皮肤皱褶多，易造成皮肤寄生菌污染，因此必须严格消毒。消毒过程同成人，但氯己定（洗必泰）不能用于2个月以下婴儿。成人不建议采集动脉血，不宜从静脉导管或静脉留置口取血，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，必须同时从外周静脉采集另外一个血培养标本，有助于对比和结果解释。静脉导管采血时，不要弃去初段血，不要用抗凝剂冲洗。,3、采血量 成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml，每瓶不少于5ml，最好为20ml血液，分注在2个血培养瓶（需氧瓶+厌氧瓶）内。2套血培养（4个血培养瓶）应至少接种20ml血液。当培养的血量从2ml增加到20ml时，血培养的阳性率增加3
3、0%50%，因为培养的血液量每增加1ml，阳性率增加3%5%，因此采血量与阳性检出率呈正比关系。 用静脉穿刺获得的血量，成人和儿童不同。儿童，特别是新生儿很难获得大量的血液，对婴幼儿和儿童，一般静脉采血15ml，当细菌浓度足够高时，血液少于1ml也足以检测菌血症。标本量1ml，细菌量也增加，对于受感染的儿童每毫升血液的含菌量比成人多。,4、血培养套数 疑似菌血症患者应至少采集2套血培养，最好为3套，每套血培养应包括1个需氧培养瓶和1个厌氧培养瓶。一个静脉穿刺点只能采集一套血培养，采集2套血培养应选择第2个静脉穿刺点。婴幼儿患者，推荐在不同部位同时采集2套。对感染性心内膜炎和真菌血症患者则应多次
4、采集。有研究表明：一套血培养的阳性率为65%，两套血培养的阳性率为80%，三套血培养的阳性率为96%。,二、骨髓标本 正常人的骨髓是无菌的。若从患者骨髓中检出细菌（排出污染），提示细菌性骨髓炎或菌血症，败血症。常见病原菌同血液培养。 （一）标本采集 1、标本采集部位和时间 一般用骨髓穿刺针从髂骨采集骨髓标本。最好在用药前、寒战前或寒战后1h发热初期或高热期采样，阳性检出率较高。 2、标本采集注意事项 严格无菌操作 标本采集后立即注入血培养瓶，送检。,第二节 脑脊液标本 （一）标本采集 由临床医师以无菌操作作腰椎穿刺，抽取脑脊液23ml，盛于无菌容器中送检。脑膜炎奈瑟菌离体后能产生自溶酶，迅速自
5、溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌离体后也易死亡。因此，脑脊液无论涂片或培养，必须于采集后立即送检，不宜将其置于冰箱保存，否则影响检出率。,第三节呼吸系统标本 一、痰标本 （一）送检指征 1、咳嗽 咳出的是脓性痰或铁锈样的痰。 2、咯血 献血和痰中带血等。 3、呼吸困难 呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛。 4、发热 伴有白细胞以及中性粒细胞升高或C反应蛋白（CRP）明显增高。,（二）标本采集 、采集时间 一般以晨痰为好；支气管扩张症患者清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰标本。 2、标本采集方法 （1）自然咳痰法 在留取痰之前，用清水反复漱口，以减少常居菌的污染，应从气管深部咳出痰，吐入无菌容器内。 （2
6、）气管镜下采集法：在病灶附近用导管吸或用支气管刷直接取得标本。 （3）气管穿刺法：在环甲膜下穿刺抽取痰液，收集标本。,二、咽拭标本 （一）标本采集 用无菌棉试子轻轻擦拭患者鼻咽部粘膜，留取标本，置无菌试管内送检。,第四节 穿刺也标本 （一）标本采集 采用无菌方法，用注射器抽取体内可疑感染部位的液体（胸腔积液、腹水、心包液、关节液或鞘膜液等）注无菌试管立即送检。如怀疑厌氧菌感染，应做床边接种。,第五节 泌尿、生殖道标本 一、 尿液标本 （一） 尿培养的临床指征 以下任何一种情况时建议采集尿标本，进行细菌培养。 尿痛、尿急、尿频等典型的尿路感染症状。 出现血尿和脓尿。 膀胱排空功能受损。 泌尿系统
7、疾病手术前。 留置导尿管时间太长，患者出现发热。 尿常规中白细胞高或（或）亚硝酸盐阳性。,（二） 标本采集与运送 （1）女性：成年女性外阴部先以肥皂水清洗，再以无菌水冲洗，用无菌纱布擦拭，以手指将阴唇分开排尿，弃去前段尿，留取中段尿57ml于无菌试管内。 （2）男性：翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，用清水冲洗，留取中段尿。,二、生殖道标本 （一）标本采集 1、女性生殖道标本 由妇产科医师用无菌棉拭采集阴道，宫颈分泌物。怀疑盆腔厌氧菌感染时，由妇产科医师用注射器从阴道后穹处穿刺抽取标本，立即床边接种于厌氧平板。 2、男性生殖道标本 翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，清水冲洗，采集尿道口分泌物。采集前列
8、腺液时，先冲洗尿道和膀胱，用手指从肛门内按摩前列腺，使前列腺液溢出。,第六节 粪便标本 （一） 标本采集 1、自然排便 采集自然排便后，挑取其脓血、粘液部分23g，液体粪便取絮状物23ml，盛于灭菌容器内或置于保存液（运送培养基）、增菌培养基中送检。 2、直肠试子 对排便困难患者及婴儿，可用直肠试子采取，即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后，插入肛门内45cm（幼儿23cm）轻轻转动取出，插入卡布运送培养基内或无菌试管内送检。,第七节 脓液及创伤感染分泌物标本 （一）标本采集 1、开放性脓肿和脓性分泌物 先以无菌盐水冲洗溃疡表面，用2支灭菌棉试取溃疡深处的分泌物后插入斯式运送培养基内送检。一支为涂片检查用，一支作培养用。,2、大面积烧伤的创面分泌物 用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内（注明采集部位）送检。 3、封闭性脓肿 要求先消毒局部皮肤或黏膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。,谢 谢,
