1、 打开imagej软件2、 File——open，打开图片3、 设置阈值Image——adjust——threshold——若分析内容为空洞，则点击一次apply；若分析内容为凸起，则点击两次apply使要分析的部位变为深色4、 进行标尺设定Analyse——setscale，软件会自动判断图中标尺中像素个数，在known distance中设定自己图片标尺的长度，并且将unit of length中的单位设定为自己标尺的单位如图，known distance设为5，unit of length设为μm 5、 分析并输出结果Analyze——analyze particles,在show中选取outlines，并点选display result和exclude on edges，或可根据自己的需要选择不同选项最后点击ok，即可得到结果，可把结果复制到excel中分析6、 设置输出选项在analyze—analyze measurements中设置输出选项，得到自己想要的结果比如周长、面积、灰度值等 。