骨髓细胞学PPT课件

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1、骨骨 髓髓 细细 胞胞 学学 检检 查查(Bone Marrow Examination)主要内容主要内容 血细胞的生成与发育血细胞的生成与发育 正常血细胞形态正常血细胞形态 常用血细胞化学染色常用血细胞化学染色 骨髓细胞检查的临床意义骨髓细胞检查的临床意义 常见血液病血细胞特征常见血液病血细胞特征 急性白血病的急性白血病的MICM分型分型骨髓是主要造血组织(骨髓是主要造血组织(骨髓是主要造血组织(骨髓是主要造血组织(hemopoietichemopoietic tissue tissue)组成:网状组织(组成:网状组织(组成:网状组织(组成:网状组织(reticular tissuereti

2、cular tissue) 造血细胞(造血细胞(造血细胞(造血细胞(hemopoietichemopoietic cell cell) 基质基质基质基质:调节造血细胞的增殖与分化调节造血细胞的增殖与分化调节造血细胞的增殖与分化调节造血细胞的增殖与分化 观察骨髓中血细胞数量和质量的变化观察骨髓中血细胞数量和质量的变化观察骨髓中血细胞数量和质量的变化观察骨髓中血细胞数量和质量的变化 对造血系统疾病的诊断和防治都有重要意义对造血系统疾病的诊断和防治都有重要意义对造血系统疾病的诊断和防治都有重要意义对造血系统疾病的诊断和防治都有重要意义一、血细胞生成与发育一、血细胞生成与发育 造血干细胞的功能特点造血

3、组织中一类目前尚无形态学特征描述的功能细胞造血组织中一类目前尚无形态学特征描述的功能细胞造血组织中一类目前尚无形态学特征描述的功能细胞造血组织中一类目前尚无形态学特征描述的功能细胞具有高度自我更新的能力,可维持干细胞数量的恒定具有高度自我更新的能力,可维持干细胞数量的恒定具有高度自我更新的能力,可维持干细胞数量的恒定具有高度自我更新的能力,可维持干细胞数量的恒定具有多向分化的能力即可向各系列祖细胞分化,然后具有多向分化的能力即可向各系列祖细胞分化,然后具有多向分化的能力即可向各系列祖细胞分化,然后具有多向分化的能力即可向各系列祖细胞分化,然后 增殖分化为各系血细胞增殖分化为各系血细胞增殖分化为

4、各系血细胞增殖分化为各系血细胞血细胞发生示意图血细胞发生示意图血细胞发育规律血细胞发育规律血细胞发育规律血细胞发育规律 ( (原原原原 始始始始 成成成成 熟熟熟熟) ) 胞胞胞胞 体体体体 大大大大小小小小 ( (巨核细胞相反巨核细胞相反巨核细胞相反巨核细胞相反, ,早幼粒较原粒大早幼粒较原粒大早幼粒较原粒大早幼粒较原粒大) ) 胞胞胞胞 浆浆浆浆 量:量:量:量: 少少少少 多多多多 颜颜颜颜 色:深蓝色:深蓝色:深蓝色:深蓝浅蓝浅蓝浅蓝浅蓝 浅红浅红浅红浅红 颗颗颗颗 粒:无粒:无粒:无粒:无有有有有, ,非特异性非特异性非特异性非特异性特异性特异性特异性特异性 胞胞胞胞 核核核核 大大

5、大大小小小小 ( (巨核细胞相反巨核细胞相反巨核细胞相反巨核细胞相反) ) 核核核核 型:型:型:型: 规则规则规则规则不规则不规则不规则不规则 染色质:染色质:染色质:染色质: 细致疏松细致疏松细致疏松细致疏松粗糙密集粗糙密集粗糙密集粗糙密集紧缩成块紧缩成块紧缩成块紧缩成块 核核核核 仁:仁:仁:仁: 有有有有无无无无 核核核核 膜:膜:膜:膜: 不明显不明显不明显不明显明显明显明显明显 核浆比核浆比核浆比核浆比 大大大大小小小小 ( (巨核细胞相反巨核细胞相反巨核细胞相反巨核细胞相反) ) 二、正常血细胞形态二、正常血细胞形态红细胞系红细胞系红细胞系红细胞系(Erythrocyte Ser

6、ies) (Erythrocyte Series) 原原 红红 细细 胞胞( (proerythroblproerythroblastast) ) 早早 幼幼 红红 细细 胞胞(Basophilic erythroblast)(Basophilic erythroblast) 中中 幼幼 红红 细细 胞胞(Polychromatic erythroblast)(Polychromatic erythroblast) 晚晚 幼幼 红红 细细 胞胞 ( normoblast )( normoblast ) 粒细胞系粒细胞系粒细胞系粒细胞系(Granulocytic Series)(Granuloc

7、ytic Series) 原粒细胞原粒细胞(myeloblast) 早幼粒细胞早幼粒细胞(promyelocyte)中幼粒细胞中幼粒细胞(myelocyte)晚幼粒细胞晚幼粒细胞(metamyelocyte)杆状核粒细胞杆状核粒细胞(stab granulocyte ) 分叶核粒细胞分叶核粒细胞(segmented granulocyte)单核细胞系单核细胞系单核细胞系单核细胞系(Monocytic Series)(Monocytic Series)原单核细胞原单核细胞(monoblast)幼单核细胞幼单核细胞(promonocyte)单核细胞单核细胞(monocyte) 淋巴细胞系淋巴细胞系

8、淋巴细胞系淋巴细胞系(Lymphocytic Series)(Lymphocytic Series) 原淋巴细胞原淋巴细胞原淋巴细胞原淋巴细胞 (lymphoblast) (lymphoblast) 幼淋巴细胞幼淋巴细胞幼淋巴细胞幼淋巴细胞 ( (prolymphocyteprolymphocyte) ) 淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞 (lymphocyte)(lymphocyte) 巨核细胞系巨核细胞系巨核细胞系巨核细胞系(Megakaryocytic Series)(Megakaryocytic Series) 原巨核细胞原巨核细胞(megakaryoblast) 幼巨核细胞幼巨核细胞

9、(promegakaryocyte) 颗粒巨核细胞颗粒巨核细胞(granular megakaryocyte ) 产板巨核细胞产板巨核细胞 浆细胞系统浆细胞系统 (Plasmacytic Series) 原浆细胞原浆细胞原浆细胞原浆细胞 (plasmablast)(plasmablast) 幼浆细胞幼浆细胞幼浆细胞幼浆细胞 ( (proplasmacyteproplasmacyte ) ) 成熟浆细胞成熟浆细胞成熟浆细胞成熟浆细胞 ( (plasmacyteplasmacyte ) ) 三、常用血细胞化学染色三、常用血细胞化学染色血细胞细胞化学染色血细胞细胞化学染色以细胞形态学为基础,根据化学

10、反应原理,应用骨髓涂片进行固以细胞形态学为基础,根据化学反应原理,应用骨髓涂片进行固以细胞形态学为基础,根据化学反应原理,应用骨髓涂片进行固以细胞形态学为基础,根据化学反应原理,应用骨髓涂片进行固定、化学反应显色、复染等程序染色,然后在光镜下观察细胞的定、化学反应显色、复染等程序染色,然后在光镜下观察细胞的定、化学反应显色、复染等程序染色,然后在光镜下观察细胞的定、化学反应显色、复染等程序染色,然后在光镜下观察细胞的化学成分及其变化的一项检验方法化学成分及其变化的一项检验方法化学成分及其变化的一项检验方法化学成分及其变化的一项检验方法研究血细胞在生理或病理情况下细胞化学成分的变化,有助于了研究

11、血细胞在生理或病理情况下细胞化学成分的变化,有助于了研究血细胞在生理或病理情况下细胞化学成分的变化,有助于了研究血细胞在生理或病理情况下细胞化学成分的变化,有助于了解各种血细胞的化学组成及病理生理改变解各种血细胞的化学组成及病理生理改变解各种血细胞的化学组成及病理生理改变解各种血细胞的化学组成及病理生理改变可用作血细胞类型的鉴别,对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗可用作血细胞类型的鉴别,对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗可用作血细胞类型的鉴别,对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗可用作血细胞类型的鉴别,对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、发病机制探讨等均有一定价值效观察、发病机制探讨等均有一定价值

12、效观察、发病机制探讨等均有一定价值效观察、发病机制探讨等均有一定价值 血细胞化学染色血细胞化学染色=过氧化物酶过氧化物酶( POX)=非特异性酯酶非特异性酯酶( NSE)=特异性酯酶特异性酯酶 (SE)=糖原染色糖原染色 (PAS)=中性粒细胞碱性磷酶中性粒细胞碱性磷酶中性粒细胞碱性磷酶中性粒细胞碱性磷酶 ( NAP)( NAP)过氧化物酶染色过氧化物酶染色 (Peroxidase, POX) 原理:原理:原理:原理:HH2 2OO2 2 HH2 2O O OO2 2 POXPOX 联苯胺联苯胺联苯胺联苯胺 联苯胺兰亚硝基铁氰化钠联苯胺兰亚硝基铁氰化钠联苯胺兰亚硝基铁氰化钠联苯胺兰亚硝基铁氰化

13、钠 OO2 2 暗蓝色的颗粒暗蓝色的颗粒暗蓝色的颗粒暗蓝色的颗粒 结果:粒细胞结果:粒细胞结果:粒细胞结果:粒细胞(+)(+);单核细胞;单核细胞;单核细胞;单核细胞( )( ); 淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞( )( )非特异性脂酶非特异性脂酶 (Non specific esterase, NSE)原理:原理:原理:原理: NSENSE水解水解水解水解 醋醋醋醋 酸酸酸酸 奈奈奈奈 酚酚酚酚 奈奈奈奈 酚酚酚酚 有色沉淀有色沉淀有色沉淀有色沉淀 重氮染料偶联重氮染料偶联重氮染料偶联重氮染料偶联临床意义:临床意义:临床意义:临床意义: 单核、巨噬单核、巨噬单核、巨噬单核、巨噬(+)(+)

14、特异性脂酶特异性脂酶 (Specific esterase, SE) 原理:原理:原理:原理: SESE水解水解水解水解 氯醋酸奈酚氯醋酸奈酚氯醋酸奈酚氯醋酸奈酚ASASD D 奈酚奈酚奈酚奈酚ASASD D 红色沉淀红色沉淀红色沉淀红色沉淀 重氮盐偶联重氮盐偶联重氮盐偶联重氮盐偶联 临床意义:临床意义:临床意义:临床意义: 粒粒粒粒(+)(+);单;单;单;单( )( );淋;淋;淋;淋( () )中性粒细胞碱性磷酸酶染色中性粒细胞碱性磷酸酶染色 Neutrophil alkaline phosphatase, NAP 原理:原理:原理:原理: NAPNAP 甘油磷酸钠甘油磷酸钠甘油磷酸钠甘

15、油磷酸钠 磷酸钠甘油磷酸钠甘油磷酸钠甘油磷酸钠甘油 PH 9.2PH 9.2 磷酸钠氯化钙磷酸钠氯化钙磷酸钠氯化钙磷酸钠氯化钙 磷酸钙磷酸钙磷酸钙磷酸钙 硝酸钴硝酸钴硝酸钴硝酸钴 硫化钴硫化钴硫化钴硫化钴 硫化铵硫化铵硫化铵硫化铵 + + 磷酸钴磷酸钴磷酸钴磷酸钴 NAP临床意义临床意义 慢粒慢粒NAP,类白类白NAP 急粒急粒NAP,急淋急淋NAP,急单正常或急单正常或 再障再障NAP, PNH者者NAP 化脓感染化脓感染NAP, 病毒感染病毒感染NAP糖原染色糖原染色 (Periodic-schiff. PAS)原理:原理:原理:原理: 过碘酸氧化过碘酸氧化过碘酸氧化过碘酸氧化 1.21.

16、2乙二醇乙二醇乙二醇乙二醇 双双双双 醛醛醛醛 基基基基 SchiffSchiff 红色品红红色品红红色品红红色品红 紫红色紫红色紫红色紫红色 临床意义:临床意义:临床意义:临床意义: 淋粗颗粒或团块状阳性淋粗颗粒或团块状阳性淋粗颗粒或团块状阳性淋粗颗粒或团块状阳性 粒弥漫均匀状阳性粒弥漫均匀状阳性粒弥漫均匀状阳性粒弥漫均匀状阳性 单细颗粒状阳性单细颗粒状阳性单细颗粒状阳性单细颗粒状阳性铁染色:普鲁士兰反应染色法铁染色:普鲁士兰反应染色法原理:原理:原理:原理: 细胞细胞细胞细胞 铁铁铁铁+ + 亚铁氰化钾亚铁氰化钾亚铁氰化钾亚铁氰化钾 亚铁氢化铁亚铁氢化铁亚铁氢化铁亚铁氢化铁 呈兰色呈兰色呈

17、兰色呈兰色临床意义:临床意义:临床意义:临床意义: 缺铁性贫血时:细胞外、内铁依次减少缺铁性贫血时:细胞外、内铁依次减少缺铁性贫血时:细胞外、内铁依次减少缺铁性贫血时:细胞外、内铁依次减少 非缺铁性贫血时:细胞外铁多增高非缺铁性贫血时:细胞外铁多增高非缺铁性贫血时:细胞外铁多增高非缺铁性贫血时:细胞外铁多增高 铁粒幼贫血时:铁粒幼细胞增多,出现环铁铁粒幼贫血时:铁粒幼细胞增多,出现环铁铁粒幼贫血时:铁粒幼细胞增多,出现环铁铁粒幼贫血时:铁粒幼细胞增多,出现环铁内内外外H H+ +四、骨髓细胞学检查的临床意义四、骨髓细胞学检查的临床意义 适适适适 应应应应 症症症症 诊诊 断断 造造 血血 系系

18、 统统 疾疾 病病: 白白 血血 病病 贫贫 血血 血小板减少性紫癜血小板减少性紫癜 诊诊 断断 非非 造造 血血 系系 统统 疾疾 病:病: 原原 虫虫 感感 染染 代代 谢谢 性性 疾疾 病病 转转 移移 性性 癌癌 肿肿 原因不明:原因不明:原因不明:原因不明: 发热、恶病质发热、恶病质发热、恶病质发热、恶病质 肝、脾、淋巴结肿大肝、脾、淋巴结肿大肝、脾、淋巴结肿大肝、脾、淋巴结肿大 血细胞单项或多项减少、增多血细胞单项或多项减少、增多血细胞单项或多项减少、增多血细胞单项或多项减少、增多 周围血出现幼稚细胞、可疑细胞周围血出现幼稚细胞、可疑细胞周围血出现幼稚细胞、可疑细胞周围血出现幼稚细

19、胞、可疑细胞 禁禁 忌忌 症症 明显出血倾向:血友病明显出血倾向:血友病常用取材部位 髂后上棘(较易掌握分寸)髂后上棘(较易掌握分寸)髂后上棘(较易掌握分寸)髂后上棘(较易掌握分寸) 髂前上棘(较易掌握分寸)髂前上棘(较易掌握分寸)髂前上棘(较易掌握分寸)髂前上棘(较易掌握分寸) 胸骨(对向心性病变阳性率高,有一定危险性)胸骨(对向心性病变阳性率高,有一定危险性)胸骨(对向心性病变阳性率高,有一定危险性)胸骨(对向心性病变阳性率高,有一定危险性) 胫骨粗隆(胫骨粗隆(胫骨粗隆(胫骨粗隆(2 2 2 2岁以下小儿)岁以下小儿)岁以下小儿)岁以下小儿)骨髓涂片检查的内容和方法骨髓涂片检查的内容和方

20、法 低倍镜检查低倍镜检查 (1) 观察涂片的取材、制片、染色是否满意观察涂片的取材、制片、染色是否满意 (2)确定骨髓增生程度)确定骨髓增生程度( (HypercellularityHypercellularity ) ) 有核细胞、巨核细胞有核细胞、巨核细胞有核细胞、巨核细胞有核细胞、巨核细胞 (3)注意有无特殊细胞)注意有无特殊细胞 油镜检查油镜检查 (1)有核细胞分类)有核细胞分类 ( Normal rate of cells in different series )( Normal rate of cells in different series ) (Normal rate of

21、 cells at different stages ) (Normal rate of cells at different stages ) (2)计算:粒)计算:粒 红红=24 1 (3)观察细胞形态有无异常观察细胞形态有无异常 (4)观察有无特殊细胞及寄生虫)观察有无特殊细胞及寄生虫 骨髓增生程度骨髓增生程度增生程度增生程度增生程度增生程度 成熟成熟成熟成熟RBC/RBC/有核细胞有核细胞有核细胞有核细胞 有核细胞有核细胞有核细胞有核细胞(%)(%)极度活跃极度活跃极度活跃极度活跃 1 1 : 1 1 5050明显活跃明显活跃明显活跃明显活跃 10 10 : 1 101 102020增

22、生活跃增生活跃增生活跃增生活跃 20 20 : 1 21 27 7增生减低增生减低增生减低增生减低 50 50 : 1 11 1极度减低极度减低极度减低极度减低 300 300 : 1 0.51 3030M4 M4 急粒急粒急粒急粒- -单单单单 粒单两系细胞均增生粒单两系细胞均增生粒单两系细胞均增生粒单两系细胞均增生M5 M5 急单急单急单急单 原幼单原幼单原幼单原幼单30%30%M6 M6 红白血病红白血病红白血病红白血病 红系红系红系红系5050且形态异常且形态异常且形态异常且形态异常 原粒原粒原粒原粒( (原单原单原单原单) )早幼粒早幼粒早幼粒早幼粒( (幼单幼单幼单幼单)30)30

23、M7 M7 巨核白巨核白巨核白巨核白 原幼巨原幼巨原幼巨原幼巨3030急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病(L1)(L1)急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病(L2)(L2) 急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病(L3)(L3)急粒未分化型急粒未分化型 (M1)急粒部分分化型(急粒部分分化型(M2)急性早幼粒细胞白血病(急性早幼粒细胞白血病(M3)急性粒单细胞白血病(急性粒单细胞白血病(M4)急性单核细胞白血病(急性单核细胞白血病(M5)急性红白血病(急性红白血病(M6)巨核细胞白血病(巨核细胞白血病(M7)几种常见急性白

24、血病的细胞化学染色几种常见急性白血病的细胞化学染色染色方法染色方法染色方法染色方法ALLALLAMLAML(MM1 1、MM2 2)MM3 3MM4 4MM5 5MM6 6 POX POX + + + +视伴随的视伴随的视伴随的视伴随的 血细胞而血细胞而血细胞而血细胞而异异异异 NAP NAP + 同上同上同上同上 NSE NSE + + + + NaFNaF 同上同上同上同上 PAS PAS + + + +(幼红(幼红(幼红(幼红细胞)细胞)细胞)细胞) SE: 粒系阳性 单核阴性 阳性: 急粒急粒急单急单POX NSE: 粒系阴性 PAS 单核阳性 阴性: 急淋(NAP) 急粒(NAP)

25、急单 粒粒: :片状片状淋淋: :粗颗粒粗颗粒, ,环核环核 单单: :细颗粒细颗粒免疫学分型免疫学分型 急淋急淋 T细胞细胞-CD1、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8 B细胞细胞-CD9、CD10、CD19、CD20 急髓急髓 CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33、CD34细胞免疫分型细胞免疫分型 (一)急性白血病细胞免疫表型特点(一)急性白血病细胞免疫表型特点 CD CD1919 CD CD7 7 CD CD3333 CD CD1313HLADRHLADR TdTTdTBALLBALL + + + + +/ +/ TALLTALL + + /+/+ + + AML AM

26、L +/ +/ + + + + + + (二)(二)ALL的免疫表型特点的免疫表型特点系列系列亚型亚型主要的蛋白标记主要的蛋白标记 B B系列系列早期早期B B型型CDCD1919+ +CDCD1010- -普通型普通型CDCD1919+ +CDCD1010+ +前前B B型型CDCD1919+ +胞质胞质链链+ + T T系列系列B B细胞型细胞型CDCD1919+ +胞膜胞膜IgIg+ +前前T T型型CDCD7 7+ +CDCD2 2- -T T细胞型细胞型CDCD7 7+ +CDCD2 2+ +(三)(三)AML的免疫学分类的免疫学分类亚型亚型典型的蛋白标记典型的蛋白标记M0M0CD3

27、4CD34、3333、1313M1M1CD34CD34、3333、1313M2M2CD34CD34、3333、1313、1515M3M3CD34CD34、1313(HLADrHLADr阴性)阴性)M4M4CD34CD34、3333、1515、1414、1313M5M5CD33CD33、1515、1414、1313M6M6CD33 CD33 血型糖蛋白血型糖蛋白M7M7CD33CD33、4141、4242、6161IMMUNO-PHENOTYPINGmabmab M1 M1 M2M2M3M3M4M4M5M5M6M6M7M7CD13CD13+ + + + + +- - -CD33CD33+ + +

28、 + + +- - -CD14CD14- - - -+ + +- - -CD41CD41- - - - - - -+ +RetRet- - - - - -+ +- -LectoferrinLectoferrin - -+ +- -+ +- - - -CD19CD19CD7CD7HLA-DRHLA-DRCD2CD2MPO MPO T T- - + + - - + + - - B B+ + - - + + - - - -细胞遗传学和分子生物学分型细胞遗传学和分子生物学分型 M2 t ( 8 ; 21 ) AML1-ETO M3 t ( 15 ; 17 ) PML-RAR CML t ( 9 ; 2

29、2 ) BCR-ABL MECHANISM Ph CHROMOSONE9ABL q34 q11BCR22 q34Ph q11 t (9;22) (q34;q11)复习题复习题骨髓检查应用于哪些方面?骨髓检查应用于哪些方面?骨髓检查应用于哪些方面?骨髓检查应用于哪些方面?血细胞发育演变的一般规律?血细胞发育演变的一般规律?血细胞发育演变的一般规律?血细胞发育演变的一般规律?正常骨髓象各系统各阶段的正常范围?正常骨髓象各系统各阶段的正常范围?正常骨髓象各系统各阶段的正常范围?正常骨髓象各系统各阶段的正常范围?骨髓增生程度分级?骨髓增生程度分级?骨髓增生程度分级?骨髓增生程度分级?粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况?粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况?粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况?粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况?再障的骨髓象与血象特征?再障的骨髓象与血象特征?再障的骨髓象与血象特征?再障的骨髓象与血象特征?急性白血病的分类、骨髓象及血象特征?急性白血病的分类、骨髓象及血象特征?急性白血病的分类、骨髓象及血象特征?急性白血病的分类、骨髓象及血象特征?慢粒、慢淋骨髓象及血象特征?慢粒、慢淋骨髓象及血象特征?慢粒、慢淋骨髓象及血象特征?慢粒、慢淋骨髓象及血象特征?常用细胞化学染色的鉴别?常用细胞化学染色的鉴别?常用细胞化学染色的鉴别?常用细胞化学染色的鉴别?

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