第07章临床专用自动生化分析仪分析技术

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1、第七章第七章 临床临床专用生化分析仪分析技术专用生化分析仪分析技术广州医学院广州医学院医学检验系医学检验系 刘忠民刘忠民全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)1全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术教学目标与要求教学目标与要求v掌握:掌握:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术的基本原理和方法。的基本

2、原理和方法。v熟悉:熟悉:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组成特点,仪器的维护保养,质量控制和临床应用。成特点,仪器的维护保养,质量控制和临床应用。v了解:了解:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。2全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术目目 录录浊度自动化分析技术浊度自动化分析技术1电解质自动化分析技术电解质自动化分析技术2血气自动化分

3、析技术血气自动化分析技术3电泳自动化分析技术电泳自动化分析技术4小结与展望小结与展望5返回总目录返回总目录3全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第一节第一节浊度自动化分析技术浊度自动化分析技术4全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术前言前言y浊度分析浊度分析通过检测溶液浊度

4、通过检测溶液浊度, ,对物质含量进行分析的方法。对物质含量进行分析的方法。临床上多用于特定蛋白的分析。临床上多用于特定蛋白的分析。y特定蛋白特定蛋白在机体内具有某种生理功能,疾病状态时又有着在机体内具有某种生理功能,疾病状态时又有着特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定蛋白(特定蛋白(special protein)。)。5全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术一、浊度分析的基本原理和

5、方法一、浊度分析的基本原理和方法6全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)浊度分析的基础理论(一)浊度分析的基础理论y1.1.胶体溶液胶体溶液粒子对光具有反射、折射、散射和吸收等作用。粒子对光具有反射、折射、散射和吸收等作用。y2.2.光透射理论光透射理论朗伯朗伯- -比尔(比尔(Lambert-Beer)定律:)定律:y3.3.光散射理论光散射理论雷莱(雷莱(Rayleigh)公式:)公式:7全国高等医药院校医学检验专业规划教材

6、全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非偏振光源的散射作用公式为:偏振光源的散射作用公式为:公式可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。公式可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。8全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学

7、检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y雷莱公式与修正公式雷莱公式与修正公式雷莱公式雷莱公式v仅适合直径仅适合直径110入射光波长的小颗粒入射光波长的小颗粒Debye修正公式修正公式v适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液Mie修正公式修正公式v适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液9全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用

8、自动生化分析仪分析技术y4.4.免疫浊度分析免疫浊度分析在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异结在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异结合,形成有一定大小的抗原合,形成有一定大小的抗原- -抗体免疫复合物颗粒,抗体免疫复合物颗粒,使反应液出现浊度;使反应液出现浊度;当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的吸当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的吸收、透射、散射和折射;收、透射、散射和折射;通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出被通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出被测物的量。测物的量。10全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物

9、化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)浊度分析的基本方法(二)浊度分析的基本方法y浊度分析方法的分类浊度分析方法的分类根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:v透射免疫浊度法(透射免疫浊度法(turbidimetry immunoassay)v散射免疫浊度法(散射免疫浊度法(nephelometry immunoassay)根据复合物形成速度和测定方式分:根据复合物形成速度和测定方式分:v终点浊度法终点浊度法v速率浊度法速率浊度法根据根据浊度形成的原理浊度形成的原理分分

10、:v沉淀反应免疫浊度法沉淀反应免疫浊度法:灵敏度低:灵敏度低v胶乳凝集比浊(或粒子强化免疫浊度法):灵敏度高胶乳凝集比浊(或粒子强化免疫浊度法):灵敏度高11全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.透射免疫浊度法透射免疫浊度法指在光源的光路指在光源的光路0o角方向上测量透射光强度,并角方向上测量透射光强度,并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。y2.2.散射免疫浊度法散射免疫浊度法指在光

11、路的指在光路的5o90o角的方向上测量散射光强度,角的方向上测量散射光强度,并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。12全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术免疫浊度分析法测定光路图免疫浊度分析法测定光路图 13全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化

12、分析仪分析技术y1.1.终点散射浊度法终点散射浊度法检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终点检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终点测定法。测定法。y2.2.速率散射浊度法速率散射浊度法所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中,单位时所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中,单位时间内两者结合成复合物的量。间内两者结合成复合物的量。速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测定速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量,该峰值的高低与抗原的量成正其复合物形成的量,该峰值的高低与抗原的量成正比。比。14全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床

13、生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y粒子强化免疫浊度法粒子强化免疫浊度法为一种带载体的免疫浊度法,其敏感度较高。该为一种带载体的免疫浊度法,其敏感度较高。该方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒,方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒,吸附或交联抗体;当遇到相应抗原时,则发生聚吸附或交联抗体;当遇到相应抗原时,则发生聚集。集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过。单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过。当两个或更多胶乳颗粒凝聚时,透过光减少,光当两个或更多胶乳颗粒凝聚时,透过光减少,光减少的程度与

14、胶乳凝集量成正比。减少的程度与胶乳凝集量成正比。 15全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术二、浊度分析仪的分类和基本结构二、浊度分析仪的分类和基本结构16全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)浊度分析仪分类(一)浊度分析仪分类y1.1.分光光度仪分光光度仪采用终点法作

15、免疫浊度分析的测定仪。采用终点法作免疫浊度分析的测定仪。y2.2.自动生化分析仪自动生化分析仪目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多专门编有或可自编透射浊度分析程序。专门编有或可自编透射浊度分析程序。y3.3.散射浊度分析仪散射浊度分析仪应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。17全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术

16、第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)自动散射浊度分析仪的结构(二)自动散射浊度分析仪的结构y主要由分析系统、计算机系统组成。主要由分析系统、计算机系统组成。分析系统分析系统v用于加样、稀释、保温和测试等;用于加样、稀释、保温和测试等;v包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样品转包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样品转盘、卡片阅读器以及软盘驱动器等;盘、卡片阅读器以及软盘驱动器等;计算机系统计算机系统v用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和储存测试结果;线和储存测试结果;v包括计算机主机、包括计算机主机、CRT显示屏和键盘等。显示屏和键盘

17、等。18全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术散射浊度分析仪散射浊度分析仪光路示意图光路示意图 19全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术三、浊度分析仪的保养三、浊度分析仪的保养20全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床

18、生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术常规保养常规保养y1.日保养日保养关机前冲洗管道,以防止管道阻塞。关机前冲洗管道,以防止管道阻塞。开机前应检查注射器,防止漏液。开机前应检查注射器,防止漏液。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查废液桶中的废液是否已经装满。检查废液桶中的废液是否已经装满。在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。y2.周保养周保养更换流动比色杯和小磁棒。更换流动比色杯和小磁棒。用纱布蘸用纱布蘸 10%漂白溶液清洁探针的

19、外部。漂白溶液清洁探针的外部。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。21全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术常规保养常规保养y3.月保养月保养更换注射器插杆顶端;更换注射器插杆顶端;空气过滤网冲洗;空气过滤网冲洗;疏通标本和抗体探针的内部。疏通标本和抗体探针的内部。y4.半年保养半年保养更换钳制阀上管道和泵周管道;更换钳制阀上管道和泵周管道;给机械传动部分的螺丝上润滑油。给机械传

20、动部分的螺丝上润滑油。22全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术四、浊度分析的质量控制四、浊度分析的质量控制23全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)抗原过剩校正(一)抗原过剩校正y免疫浊度分析的基本要求:免疫浊度分析的基本要求:始终保持反应体系中抗体适量过剩。始终保持

21、反应体系中抗体适量过剩。y抗原过剩的检测方法:抗原过剩的检测方法:连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,反应曲线呈现异常。反应曲线呈现异常。反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提示抗原过剩。示抗原过剩。待测标本用两种稀释度测定,浓度高的样本浊待测标本用两种稀释度测定,浓度高的样本浊度反而降低则提示抗原过剩。度反而降低则提示抗原过剩。24全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用

22、自动生化分析仪分析技术(二)减少伪浊度(二)减少伪浊度y伪浊度:伪浊度:在反应体系中,除待测抗原抗体免疫复合物产生在反应体系中,除待测抗原抗体免疫复合物产生的浊度外,其它可引起透射光或散射光发生变化的的浊度外,其它可引起透射光或散射光发生变化的浊度都称为伪浊度。浊度都称为伪浊度。y减少产生伪浊度的方法:减少产生伪浊度的方法:1.标本:采用新鲜、合格标本。标本:采用新鲜、合格标本。2.检测体系:保持比色杯和稀释杯清洁。检测体系:保持比色杯和稀释杯清洁。3.试剂:使用合格的抗体试剂。试剂:使用合格的抗体试剂。4.增浊剂浓度:严格控制增浊剂的浓度。增浊剂浓度:严格控制增浊剂的浓度。25全国高等医药院

23、校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(三)选择合适的入射光波长(三)选择合适的入射光波长y无论是散射比浊还是透射比浊,入射光波长的选择无论是散射比浊还是透射比浊,入射光波长的选择原则:原则:除了抗原抗体免疫复合物外,反应体系中的其除了抗原抗体免疫复合物外,反应体系中的其他成分对入射光的干扰应为最小,因为如果反他成分对入射光的干扰应为最小,因为如果反应体系中其他成分吸收了部分入射光,透射比应体系中其他成分吸收了部分入射光,透射比浊法测定结果将使抗原

24、浓度偏高,而散射比浊浊法测定结果将使抗原浓度偏高,而散射比浊法测定将使抗原浓度偏低。法测定将使抗原浓度偏低。26全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(四)仪器校正(四)仪器校正y1.1.选择合适的校准品选择合适的校准品y2.2.校准曲线的绘制校准曲线的绘制校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的选择,也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校选择,也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校准品的质量有

25、关。准品的质量有关。多推荐多推荐5 5点或点或6 6点定标。点定标。选择适当的数学方法进行曲线拟合。选择适当的数学方法进行曲线拟合。27全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术五、特定蛋白浊度分析的五、特定蛋白浊度分析的临床应用临床应用28全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术

26、特定蛋白临床常规项目特定蛋白临床常规项目29全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术免疫功能监测免疫功能监测y项目项目免疫球蛋免疫球蛋白(白(IgG、IgM、IgA)、补体()、补体(C3、C4)y临床意义临床意义IgG、IgA、IgM检测有助于了解机体抗感染能力,有检测有助于了解机体抗感染能力,有助于疾病的正确诊断和有效治疗。助于疾病的正确诊断和有效治疗。在免疫复合物疾病中,在免疫复合物疾病中,C3、C4检测可以了解其消耗检测可以了解

27、其消耗程度。程度。y适应症适应症免疫力低,反复感染病人;免疫力低,反复感染病人;自身免疫性疾病;自身免疫性疾病;多发性骨髓瘤;多发性骨髓瘤;慢性肝病;慢性肝病;非何杰金氏淋巴瘤;非何杰金氏淋巴瘤;白血病;白血病;良性单克隆免疫球蛋白病;良性单克隆免疫球蛋白病;先天性或先天性或获得性低免疫球蛋白血症;获得性低免疫球蛋白血症;对白、球蛋白比例异常对白、球蛋白比例异常者的随访;者的随访;术后感染、移植排斥反应。术后感染、移植排斥反应。返回章目录返回章目录30全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自

28、动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第二节第二节电解质自动化分析技术电解质自动化分析技术31全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术前言前言y电解质电解质在溶液中能解离成带电离子而具有导电性能的一类在溶液中能解离成带电离子而具有导电性能的一类物质。物质。主要指体液中最主要指体液中最常测定的常测定的Na+、K+、Cl-、Ca2+、Mg2+、HCO3-和无机磷等。和无机磷等。y电解质分析仪(电解质分析仪(electrol

29、yte analyzer)是采用是采用ISE测量溶液中离子浓度的仪器。测量溶液中离子浓度的仪器。广泛应用于各级临床实验室,可直接测量患者血液、广泛应用于各级临床实验室,可直接测量患者血液、脑脊液、稀释尿等体液中的电解质脑脊液、稀释尿等体液中的电解质离子浓度。离子浓度。32全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术一、电解质分析的原理和方法一、电解质分析的原理和方法33全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材

30、 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)离子选择电极电位分析理论(一)离子选择电极电位分析理论y离子选择性电极(离子选择性电极(ion selective electrode,ISE)是一类用特殊敏感膜制成,对溶液中某种特定是一类用特殊敏感膜制成,对溶液中某种特定离子具有选择性响应的电化学传感器。离子具有选择性响应的电化学传感器。在临床实验室,常用于测量离子的活度或浓度。在临床实验室,常用于测量离子的活度或浓度。34全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学

31、检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术1.1.ISE基本结构基本结构y通常由电极管、内电极、电极内充溶液和电极膜通常由电极管、内电极、电极内充溶液和电极膜(或称敏感膜)四个部分组成。(或称敏感膜)四个部分组成。35全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术2.2.电极电位产生电极电位产生y大多数电极膜电位的产生是基于膜材料与溶液界面发生的离大多数电极膜电位的产生是

32、基于膜材料与溶液界面发生的离子交换反应。子交换反应。当电极置于溶液中时,由于离子交换和扩散作用,改变当电极置于溶液中时,由于离子交换和扩散作用,改变了二相中原有的电荷分布,因而形成双电层,其间产生了二相中原有的电荷分布,因而形成双电层,其间产生一定的电位差即膜电位。一定的电位差即膜电位。ISE的电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系。的电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系。Nernst方程式:方程式: :阴离子时为,阳离子时为:阴离子时为,阳离子时为 36全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章

33、临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术3.3.电极电位测量电极电位测量yISE的的EISE值不能直接测定值不能直接测定必须将必须将ISE与参比电极共同浸入待测样品中组与参比电极共同浸入待测样品中组成一个原电池,通过测量成一个原电池,通过测量E电池电池来测定来测定E EISEISE值。值。y电池的电动势电池的电动势在一定条件下,原电池的电动势与被测离子在一定条件下,原电池的电动势与被测离子活度的对数呈线性关系。活度的对数呈线性关系。37全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章

34、临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)(二)ISEISE电位分析方法电位分析方法y1.1.定量方法定量方法(1 1)标准比较法(或直读法)标准比较法(或直读法)v指在指在pH计或离子计上直接读出数值的方法,适计或离子计上直接读出数值的方法,适用于少量样本的分析。用于少量样本的分析。(2 2)标准曲线法)标准曲线法v适用于大批量的试样分析。适用于大批量的试样分析。(3 3)标准加入法)标准加入法v当待测溶液组分较复杂,很难控制相同的离子强当待测溶液组分较复杂,很难控制相同的离子强度时,选用标准加入法。度时,选用标准加入法。38全国高等医药院校医学检验专业规划教材

35、全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)(二)ISEISE电位分析方法电位分析方法y2.2.样本测定方式样本测定方式直接法直接法v指样本不经稀释直接由电极测量离子活度;指样本不经稀释直接由电极测量离子活度;v优点是可采用全血测定,它迅速方便,结果准确,不会因血清中优点是可采用全血测定,它迅速方便,结果准确,不会因血清中水体积所占比例改变而影响结果。水体积所占比例改变而影响结果。间接法间接法v指样本经一定离子强度缓冲溶液稀释后由电极测量离子活度。指样本经一定离子强度缓

36、冲溶液稀释后由电极测量离子活度。v与直接法相比,间接法样品用量少;由于样品预先进行稀释,不与直接法相比,间接法样品用量少;由于样品预先进行稀释,不易堵塞管道;降低了血脂、不溶性蛋白质对电极的污染,以及对易堵塞管道;降低了血脂、不溶性蛋白质对电极的污染,以及对电极的损耗,使寿命延长。电极的损耗,使寿命延长。直接法比间接法测定结果高直接法比间接法测定结果高35 ,因为血脂及蛋白质等不包含,因为血脂及蛋白质等不包含有有K、Na。39全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章

37、临床专用自动生化分析仪分析技术二、电解质分析仪分类和结构二、电解质分析仪分类和结构40全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)电解质分析仪的分类(一)电解质分析仪的分类y1.1.按自动化程度分类按自动化程度分类分为半自动和全自动电解质分析仪。分为半自动和全自动电解质分析仪。y2.2.按工作方式分类按工作方式分类分为湿式和干式电解质分析仪。分为湿式和干式电解质分析仪。y3.3.按仪器的功能分类按仪器的功能分类可分为电解质分析仪、含电

38、解质分析的血气分析可分为电解质分析仪、含电解质分析的血气分析仪、含电解质分析的自动生化分析仪等。仪、含电解质分析的自动生化分析仪等。41全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)电解质分析仪的基本结构(二)电解质分析仪的基本结构y湿式电解质分析仪湿式电解质分析仪一般由离子选择性电极组、液路系统、电路系统、程一般由离子选择性电极组、液路系统、电路系统、程序控制模块和显示操作系统等组成序控制模块和显示操作系统等组成42全国高等医药院校医

39、学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.离子选择性电极组离子选择性电极组电极组包括指示电极和参比电极。电极组包括指示电极和参比电极。ISE的构成的构成v通常采用流动式毛细管结构,即在毛细管的侧臂通常采用流动式毛细管结构,即在毛细管的侧臂开多个小孔,孔里插入各种离子选择性电极。开多个小孔,孔里插入各种离子选择性电极。v在真空泵的负压作用下,待测样被吸入毛细管中,在真空泵的负压作用下,待测样被吸入毛细管中,与各个插入电极接触,并将溶液浓度的变化转换

40、与各个插入电极接触,并将溶液浓度的变化转换成电极电位的变化。成电极电位的变化。v一次进样可完成多个参数的测量。一次进样可完成多个参数的测量。43全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术电极结构示意图电极结构示意图44全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y钠、钾、氯电极钠、钾、

41、氯电极钠电极是一种含铅硅酸钠的玻璃膜电极;钠电极是一种含铅硅酸钠的玻璃膜电极;钾电极为由缬氨霉素和聚氯乙烯钾电极为由缬氨霉素和聚氯乙烯(PVC)等组成的膜电极;)等组成的膜电极;氯电极由一个银氯化银电极组成。氯电极由一个银氯化银电极组成。45全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.液路系统液路系统通常由标本盘、溶液瓶、驱动电机、采通常由标本盘、溶液瓶、驱动电机、采样针、电极系统、蠕动泵、三通阀、管道样针、电极系统、蠕动泵、三通

42、阀、管道等组成。等组成。主要用于将检测样品、定标液和缓冲稀主要用于将检测样品、定标液和缓冲稀释液等按工作要求吸取和输送至电极管道释液等按工作要求吸取和输送至电极管道中,并完成冲洗电极管道、排除废液的工中,并完成冲洗电极管道、排除废液的工作。作。46全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.电路系统电路系统一般由微处理器模块、信号放大及数据采一般由微处理器模块、信号放大及数据采集模块、蠕动泵和三通阀控制模块、输入集模块、蠕动泵和三

43、通阀控制模块、输入输出模块、电源电路模块等五大模块组成。输出模块、电源电路模块等五大模块组成。共同完成对仪器各部件的动作进行控制,共同完成对仪器各部件的动作进行控制,并对前置放大器采集的电极并对前置放大器采集的电极mVmV值进行处理值进行处理和计算,完成仪器设定的工作程序,并将和计算,完成仪器设定的工作程序,并将运算、处理后结果送显示单元显示或打印运算、处理后结果送显示单元显示或打印输出。输出。47全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技

44、术y4.4.程序控制系统程序控制系统主要包括仪器微处理系统程序、仪器设定程序、主要包括仪器微处理系统程序、仪器设定程序、仪器测定程序和自动清洗程序等。仪器测定程序和自动清洗程序等。y5.5.显示操作系统显示操作系统轻触键盘用于控制仪器工作和输入数据。轻触键盘用于控制仪器工作和输入数据。液晶显示器用于显示输出测量结果,仪器操作提液晶显示器用于显示输出测量结果,仪器操作提示等。示等。在分析检测样品时,操作者可以通过按键操作控在分析检测样品时,操作者可以通过按键操作控制分析检测过程。制分析检测过程。48全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物

45、化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术三、电解质分析仪的维护和保养三、电解质分析仪的维护和保养49全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)日常维护(一)日常维护yl.l.每日维护每日维护检查试剂量,如不足检查试剂量,如不足14液面,应及时更换;清液面,应及时更换;清洁仪器表面灰尘及吸样探针,保持探针的畅通;洁仪器表面灰尘及吸样探针,保持探针的畅通;及时弃去废液瓶中的废

46、液。及时弃去废液瓶中的废液。y2.2.每周维护每周维护清洗仪器流路,除去蛋白质、脂类沉积和盐类结清洗仪器流路,除去蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。晶。50全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.每月维护每月维护用酒精棉球清洁泵管和不锈钢转轴,在用酒精棉球清洁泵管和不锈钢转轴,在泵管的弯处涂硅油或白色凡士林等润滑泵管的弯处涂硅油或白色凡士林等润滑剂。剂。y4.4.每季度进行每季度进行MV值试验值试验电极的电极的MV值由仪器使用说明书

47、给出。值由仪器使用说明书给出。51全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)仪器的保养(二)仪器的保养y1.1.电极系统的保养电极系统的保养定期更换电极膜和电极内充液。定期更换电极膜和电极内充液。定期进行去蛋白清洗及电极的活化。定期进行去蛋白清洗及电极的活化。y2.2.流路系统的保养流路系统的保养 保证流路中没有蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。保证流路中没有蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。每天工作结束关机前,都要进行管路的清洗。每天工作结束

48、关机前,都要进行管路的清洗。冲洗完毕,应当对仪器进行重新定标。冲洗完毕,应当对仪器进行重新定标。52全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术四、电解质分析的质量控制四、电解质分析的质量控制53全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)分析前质量控制(一)分析前质量控制y1.样

49、本的采集与处量样本的采集与处量采血用器材必须干燥、清洁,最好选用一次性用品。采血用器材必须干燥、清洁,最好选用一次性用品。减少输液对结果减少输液对结果的影响。的影响。采血中应避免溶血。采血中应避免溶血。应尽快送检,不能剧烈振荡,不能长时间被日光照射;应尽快送检,不能剧烈振荡,不能长时间被日光照射;不能立即测定时应分离血清,置于不能立即测定时应分离血清,置于4冰箱中保存。冰箱中保存。当血样与空气接触时,可造成血样中的当血样与空气接触时,可造成血样中的CO2浓度偏低,浓度偏低,pH值升高,进而使钙离子浓度降低。值升高,进而使钙离子浓度降低。54全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医

50、学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.抗凝剂与药物的影响抗凝剂与药物的影响抗凝剂抗凝剂v血样不能血样不能使用使用EDTA、柠檬酸盐或草酸盐等抗凝剂。、柠檬酸盐或草酸盐等抗凝剂。v即使用肝素,其浓度通常也不超过即使用肝素,其浓度通常也不超过20U/ml血样。血样。药物对测量结果的影响有两方面药物对测量结果的影响有两方面:v药物或它的代谢产物,能引起患者体内被测物的浓度药物或它的代谢产物,能引起患者体内被测物的浓度发生改变。如利尿剂促进发生改变。如利尿剂促进K+、 Na+、Cl-从尿中

51、排出。从尿中排出。v药物直接对药物直接对ISE的响应产生影响。如水杨酸盐对的响应产生影响。如水杨酸盐对Cl-电电极响应有干扰,维生素极响应有干扰,维生素C对对K+电极响应有干扰等电极响应有干扰等。55全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.仪器安装仪器安装仪器要求安装在干净、平稳的工作台上,仪器要求安装在干净、平稳的工作台上,尽可能避免潮湿和阳光直射;尽可能避免潮湿和阳光直射;实验室的供电必须符合要求,必要时需连实验室的供电必须符

52、合要求,必要时需连接稳压电源;接稳压电源;周围不得有强的电磁干扰源(如离心机等)周围不得有强的电磁干扰源(如离心机等),并确保仪器外壳接地良好。,并确保仪器外壳接地良好。56全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)分析中质量控制(二)分析中质量控制y1.定标校正液定标校正液各厂家的定标校正液基本上都不能互换使各厂家的定标校正液基本上都不能互换使用。用。y2.电极保养电极保养电极使用一段时间后就需要保养。电极使用一段时间后就需要保养

53、。y3.质控品质控品选用质量好、性能稳定和对离子选择性电选用质量好、性能稳定和对离子选择性电极响应没有干扰的质控血清,作为实验室极响应没有干扰的质控血清,作为实验室内的质控品。内的质控品。57全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.评价分析性能评价分析性能仪器、试剂、方法等整个检测系统一旦确定仪器、试剂、方法等整个检测系统一旦确定之后,必须对整个系统的不精密度、不准确之后,必须对整个系统的不精密度、不准确度、病人结果的可报告范围、

54、分析灵敏度、度、病人结果的可报告范围、分析灵敏度、分析干扰和参考范围等分析性能进行评价;分析干扰和参考范围等分析性能进行评价;并建立严格的质量控制规范(包括选用质控并建立严格的质量控制规范(包括选用质控品,设定靶值、标准差,绘制质控图,失控品,设定靶值、标准差,绘制质控图,失控情况处理及原因分析等);情况处理及原因分析等);然后才能正式用于检测病人样品。然后才能正式用于检测病人样品。58全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(三)分析

55、后的质量控制(三)分析后的质量控制y异常结果的分析取舍:异常结果的分析取舍:如葡萄糖、碳酸氢根过低,同时钾离子过高往往如葡萄糖、碳酸氢根过低,同时钾离子过高往往是血样未经分离放置时间过长所致。是血样未经分离放置时间过长所致。多项检测结果过低,往往提示样品稀释比例不对、多项检测结果过低,往往提示样品稀释比例不对、样品中有纤维蛋白凝块或吸样针部分堵塞导致吸样样品中有纤维蛋白凝块或吸样针部分堵塞导致吸样量不足所致。量不足所致。y对某些急诊检验项目:对某些急诊检验项目:如血钾、血钙等遇到特别异常结果时,应及时与如血钾、血钙等遇到特别异常结果时,应及时与临床医生联系,以便对患者进行紧急处置。临床医生联系

56、,以便对患者进行紧急处置。59全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术五、电解质分析技术的临床应用五、电解质分析技术的临床应用y血钠测定在临床的表现为低钠血症和高钠血血钠测定在临床的表现为低钠血症和高钠血症;症;y血钾测定在临床的表现为血清钾增高和血清血钾测定在临床的表现为血清钾增高和血清钾降低;钾降低;y血氯测定在临床的表现也是增高和减低。血氯测定在临床的表现也是增高和减低。y详细应用情况见第十三章体液与酸碱平衡紊详细应用情况见第十三

57、章体液与酸碱平衡紊乱。乱。返回章目录返回章目录60全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第三节第三节血气自动化分析技术血气自动化分析技术61全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术前言前言y血气分析仪血气分析仪( (blood gas analyzer) )是应用电化学分析技术

58、和原理,采用电极对是应用电化学分析技术和原理,采用电极对血液中的血液中的pH值、值、PCO2和和PO2进行测定的临床进行测定的临床分析仪器。分析仪器。近年来,血气分析仪又增加了新功能,如电近年来,血气分析仪又增加了新功能,如电解质,尿素氮、肌酐、葡萄糖、乳酸等代谢解质,尿素氮、肌酐、葡萄糖、乳酸等代谢物及血氧系统定量测定,现代血气分析仪又物及血氧系统定量测定,现代血气分析仪又称为全自动血气电解质代谢物血氧分称为全自动血气电解质代谢物血氧分析仪。析仪。62全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用

59、自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术一、血气分析的原理和方法一、血气分析的原理和方法63全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)(一)血气分析仪的工作原理框图血气分析仪的工作原理框图64全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)电极的工作原理(二)

60、电极的工作原理y电极的工作原理即电化学分析原理。电极的工作原理即电化学分析原理。y电化学分析电化学分析( (electrochemical anaIysis) )是建立在溶液电化学性质基础上并利用这是建立在溶液电化学性质基础上并利用这些性质,通过电极这个变换器,将被测物些性质,通过电极这个变换器,将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法。法。65全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.

61、pH电极电极属玻璃膜电极,由钠或锂玻璃熔融吹制而成。属玻璃膜电极,由钠或锂玻璃熔融吹制而成。通常需与参比电极构成一个电化学电池,通过通常需与参比电极构成一个电化学电池,通过测量该电池的电动势测量该电池的电动势E E而获得相应溶液的而获得相应溶液的pH。在一定温度下,玻璃电极的电极电位在一定温度下,玻璃电极的电极电位E玻玻与待测与待测溶液的溶液的pH有线性关系:有线性关系: 66全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术pH电极与甘汞电极结

62、构图电极与甘汞电极结构图 67全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.PCO2电极电极属气敏电极,是由属气敏电极,是由pHpH玻璃电极和银玻璃电极和银- -氯化银电极组装在氯化银电极组装在一起形成的复合电极。一起形成的复合电极。由内电极、渗透膜、尼龙网和外缓冲液组成,内电极由内电极、渗透膜、尼龙网和外缓冲液组成,内电极为为pH玻璃电极和银玻璃电极和银- -氯化银参比电极。氯化银参比电极。渗透膜只允许血液样品中渗透膜只允许血液样

63、品中CO2分子通过。分子通过。气体气体CO2分子在内溶液中酸化后使分子在内溶液中酸化后使pH下降,再通过下降,再通过pH电极测定。电极测定。待测溶液中待测溶液中pH值的变化与值的变化与lg PCO2有线性关系。有线性关系。68全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术 PCO2 2电极结构图电极结构图 69全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章

64、临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.PO2电极电极是一种气敏电极、是一种气敏电极、极谱电极极谱电极,属氧化还原电极,它基于,属氧化还原电极,它基于电解氧的原理实现对氧的测量。电解氧的原理实现对氧的测量。PO2电极由铂丝阴极与银电极由铂丝阴极与银- -氯化银阳极组成。铂丝被封氯化银阳极组成。铂丝被封闭在玻璃柱中,玻璃柱装在一个有机玻璃套内,套的一闭在玻璃柱中,玻璃柱装在一个有机玻璃套内,套的一端覆盖着端覆盖着O2渗透膜,套内空隙充满渗透膜,套内空隙充满PO2电极缓冲液。电极缓冲液。O2渗透膜为聚丙烯膜或聚四氟乙烯膜或聚乙烯、聚酯。渗透膜为聚丙烯膜或聚四氟乙

65、烯膜或聚乙烯、聚酯。70全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术在在0.65V的极化电压下,电极电流的大小取决于铂的极化电压下,电极电流的大小取决于铂阴极表面阴极表面O2量。量。O2在铂阴极表面发生的反应如下:在铂阴极表面发生的反应如下:极限扩散电流的大小决定于渗透到阴极表面氧的多极限扩散电流的大小决定于渗透到阴极表面氧的多少,后者又取决于膜外的少,后者又取决于膜外的PO2。vPO2电极电流与电极电流与PO2成正比,过成正比,过0点的一

66、条直线,点的一条直线,只需要只需要1点定标(校准)。而其他电极的电压与点定标(校准)。而其他电极的电压与含量(或对数含量)关系都不过含量(或对数含量)关系都不过0点,所以需要点,所以需要两点定标,且偏差不能大于两点定标,且偏差不能大于5% 。71全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术PO2电极结电极结构图构图 72全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第

67、二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(三)血气分析的基本方法(三)血气分析的基本方法y血气分析的基本方法血气分析的基本方法包括直接计算法、标准曲线法和标准加包括直接计算法、标准曲线法和标准加入法。入法。y具体内容具体内容参见离子选择电极电位分析方法一节。参见离子选择电极电位分析方法一节。73全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术二、血气分析仪的基本结构二、血气分析仪的基本结构74全国高等医药院

68、校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y血气分析仪的结构血气分析仪的结构由电极系统、管路系统和电路系统三大由电极系统、管路系统和电路系统三大部分组成。部分组成。电极系统基本结构参见本节仪器工作原电极系统基本结构参见本节仪器工作原理部分。理部分。75全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(

69、(一一) )管路系统管路系统y通常由溶液瓶、气瓶、正压泵、负压泵、电磁通常由溶液瓶、气瓶、正压泵、负压泵、电磁阀、转换装置和连接管道等部分组成。阀、转换装置和连接管道等部分组成。y1.1.气路系统气路系统主要用来提供主要用来提供PO2和和PCO2两种电极定标时两种电极定标时所需的两种标准气体。所需的两种标准气体。依据配气方式,气路系统可分两种类型:依据配气方式,气路系统可分两种类型:v(1) (1) 外配气方式,又叫压缩气瓶供气方式。外配气方式,又叫压缩气瓶供气方式。v(2) (2) 内配气方式,又叫气体混合器供气方式。内配气方式,又叫气体混合器供气方式。76全国高等医药院校医学检验专业规划教

70、材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y(1) (1) 外配气方式外配气方式仪器由两个压缩气瓶提供定标气,一个含有仪器由两个压缩气瓶提供定标气,一个含有5CO2和和20O2;另一个含;另一个含10CO2,不含,不含O2。y(2) (2) 内配气方式内配气方式仪器本身配备有气体混合器,以产生定标气。来仪器本身配备有气体混合器,以产生定标气。来自空气压缩机产生的压缩空气和气瓶送来的纯自空气压缩机产生的压缩空气和气瓶送来的纯CO2气体由气体混合器进行配比、混合,产生符气体由

71、气体混合器进行配比、混合,产生符合要求的定标气体。合要求的定标气体。77全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.液路系统液路系统液路系统具有两种功能:液路系统具有两种功能:为为pH电极系电极系统提供定标缓冲液;统提供定标缓冲液;管道冲洗。管道冲洗。该系统一般需要四个溶液瓶,分别盛放缓该系统一般需要四个溶液瓶,分别盛放缓冲液冲液1 1、缓冲液、缓冲液2 2、冲洗液和废液。、冲洗液和废液。78全国高等医药院校医学检验专业规划教材全

72、国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术 ( (二二) )电路系统电路系统y血气分析仪电路系统将仪器测量信号进行放血气分析仪电路系统将仪器测量信号进行放大和模数转换,对仪器实行有效控制、显示大和模数转换,对仪器实行有效控制、显示和打印结果,通过键盘输入指令。和打印结果,通过键盘输入指令。y现在也有试剂包式,每盒可测现在也有试剂包式,每盒可测4050例,包例,包含电极、定标液、定标气体(类似质控)含电极、定标液、定标气体(类似质控)试剂包式血气分析仪试剂包式血气分析仪79全国

73、高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术三、血气分析仪的保养三、血气分析仪的保养80全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术 ( (一一) )仪器的保养仪器的保养y每天检查大气压力、钢瓶气体压力;检查定标液、每天检查大气压力、钢瓶气体压力;检查定标液、冲洗液是否过期,检查气泡室是否有

74、蒸馏水;冲洗液是否过期,检查气泡室是否有蒸馏水;y每周更换一次内电极液,定期更换电极膜;冲洗每周更换一次内电极液,定期更换电极膜;冲洗管道系统,擦洗分析室;管道系统,擦洗分析室;y若电极使用时间过长,电极反应变慢,可用电极若电极使用时间过长,电极反应变慢,可用电极活化液对活化液对pH、PCO2电极活化,对电极活化,对PO2电电极进行轻轻极进行轻轻打磨,除去电极表面氧化层。打磨,除去电极表面氧化层。81全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析

75、技术( (二二) )电极的保养电极的保养y1.1.pH电极电极血液中的蛋白质容易黏附在电极表面,必血液中的蛋白质容易黏附在电极表面,必须经常按血液须经常按血液缓冲液缓冲液( (或生理盐水或生理盐水)水水空气的顺序进行清洗。若清洗后仍不能空气的顺序进行清洗。若清洗后仍不能正常工作,应更换电极。正常工作,应更换电极。无论使用与否,无论使用与否,pH电极的使用寿命一般都电极的使用寿命一般都为为12年。年。如果如果pH电极在空气中暴露电极在空气中暴露2h以上,应将其以上,应将其放在缓冲液中浸泡放在缓冲液中浸泡6h24h才能使用。才能使用。82全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验

76、专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.PCO2电极电极电极要经常用专用清洁剂清洗,如果经清电极要经常用专用清洁剂清洗,如果经清洗、更换缓冲液后仍不能正常工作时,应洗、更换缓冲液后仍不能正常工作时,应更换半透膜。更换半透膜。多数电极的缓冲液密封在电极内,但有些多数电极的缓冲液密封在电极内,但有些型号的要更换缓冲液。型号的要更换缓冲液。y3.3.PO2电极电极PO2电极中干净的内电极端部和四个铂丝电极中干净的内电极端部和四个铂丝点应该明净发亮。点应该明净发亮。每次清洗时,都应该用电极膏对

77、每次清洗时,都应该用电极膏对PO2电极电极进行研磨保养。进行研磨保养。83全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.4.参比电极参比电极参比电极套需要定期更换。内电极部分不需参比电极套需要定期更换。内电极部分不需要保养。要保养。在更换盐桥或电极内的在更换盐桥或电极内的KCl溶液时,除加入溶液时,除加入室温下饱和的室温下饱和的KCl溶液外,还需要加入少许溶液外,还需要加入少许的的KCl结晶,使其在结晶,使其在37恒恒温条件下也达到温条

78、件下也达到饱和。饱和。同时防止参比电极存在气泡,否则会严重影同时防止参比电极存在气泡,否则会严重影响电极的功能。响电极的功能。84全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术四、血气分析仪的质量保证四、血气分析仪的质量保证85全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术( (一一) )

79、定标定标y定标或校准定标或校准( (calibration) )制作或校正制作或校正pH、PCO2和和PO2电极系统工作曲电极系统工作曲线的线的过程。过程。y1.1.定标方式定标方式两点定标:对于不两点定标:对于不过过0点的直线点的直线,需要测量,需要测量2 2个标准的检测信号,以确定个标准的检测信号,以确定斜率和截距斜率和截距;一点定标:对于不一点定标:对于不过过0点的直线点的直线,通过测量,通过测量1 1个标准的检测信号,以确定个标准的检测信号,以确定斜率斜率。 定标后,根据标准比较法测定血样含量。定标后,根据标准比较法测定血样含量。86全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校

80、医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.标准物质标准物质pH、PCO2电极为两点定标,电极为两点定标,PO2电极电极为为1 1点定标。点定标。pHpH系统:使用系统:使用7.3837.383和和6.8406.840两种标准缓冲液。两种标准缓冲液。O2和和CO2系统分别用系统分别用1 1种、两种混合气体来进行定种、两种混合气体来进行定标。标。y3.3.定标频率定标频率可以手动或自动执行,其频率由所用仪器类型及仪可以手动或自动执行,其频率由所用仪器类型及仪器状态而定。器状态而定。当

81、仪器开机时,必须进行两点定标;仪器连续运转当仪器开机时,必须进行两点定标;仪器连续运转过程中,应多次进行一点标定,或重复进行两点定过程中,应多次进行一点标定,或重复进行两点定标,以保证结果的可靠性。标,以保证结果的可靠性。现代血气分析仪有自动校正程序。现代血气分析仪有自动校正程序。87全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术( (二二) )质量控制质量控制y1.1.质控物的使用质控物的使用血气分析的参考试剂按基质不同分为水剂缓血气分析的

82、参考试剂按基质不同分为水剂缓冲液、全血、血液基质、血代氟碳化合物冲液、全血、血液基质、血代氟碳化合物4 4种,种,使用最多的是水剂缓冲液,该质控物用安瓿使用最多的是水剂缓冲液,该质控物用安瓿封存,具有稳定、使用方便等优点。封存,具有稳定、使用方便等优点。y2.2.质控要求质控要求临床实验室每天应测定质控液,并绘制质控临床实验室每天应测定质控液,并绘制质控图,检测仪器的运行状态和精密性。图,检测仪器的运行状态和精密性。主动参加各省市临检中心或卫生部临检中心主动参加各省市临检中心或卫生部临检中心组织的室间质评活动。组织的室间质评活动。88全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验

83、专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y水剂质控物水剂质控物用用Na2HPO4、KH2PO4及及NaHCO3配成不同配成不同的的pHpH缓冲液,再与不同浓度的缓冲液,再与不同浓度的CO2和和O2平衡,平衡,加入防腐剂贮存,有高、正常、低加入防腐剂贮存,有高、正常、低3 3种水平种水平规格。规格。质控物用安瓿装,液体并未充满整支安瓿,质控物用安瓿装,液体并未充满整支安瓿,液相为水及缓冲物质,气相则液相为水及缓冲物质,气相则由由O2、N2、CO2及汽水组成。及汽水组成。使用时,需在室温平衡后,再用

84、力振摇使用时,需在室温平衡后,再用力振摇2 2min3 3min,使气相与液相重新平衡。,使气相与液相重新平衡。89全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术五、血气分析的临床应用五、血气分析的临床应用y血气分析在呼收系统疾病和酸碱平衡紊乱中血气分析在呼收系统疾病和酸碱平衡紊乱中的应用十分广泛。的应用十分广泛。y临床应用详见第十三章体液和酸碱平衡紊乱。临床应用详见第十三章体液和酸碱平衡紊乱。返回章目录返回章目录90全国高等医药院校医学检验

85、专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第四节第四节电泳自动化分析技术电泳自动化分析技术91全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术前言前言y电电泳泳(electrophoresis)带电粒子在电场中的移动现象。带电粒子在电场中的移动现象。y电泳技术电泳技术利用这种现象对化学或生物化学组分进利用这种现象

86、对化学或生物化学组分进行分离分析的技术。行分离分析的技术。已广泛用于各种生物分子分离分析。已广泛用于各种生物分子分离分析。92全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术一、电泳技术的基本原理一、电泳技术的基本原理93全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术( (一一) )电泳的基本

87、原理电泳的基本原理y1.1.荷电性与移动方向荷电性与移动方向机体中的许多生物分子都是两性物质,其荷机体中的许多生物分子都是两性物质,其荷电性质受介质电性质受介质pH的影响。的影响。当当pH在生物分子等电点(在生物分子等电点(isoelectric point,pI)以下时,带正电荷,否则带负电荷。)以下时,带正电荷,否则带负电荷。物质带电性质不同,在电场强度中移动的方物质带电性质不同,在电场强度中移动的方向不同。向不同。在某个设定的电场中,带电粒子在支持介质在某个设定的电场中,带电粒子在支持介质中可向与其所带电荷相反的电极方向移动。中可向与其所带电荷相反的电极方向移动。94全国高等医药院校医学

88、检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.移动的速度与迁移率移动的速度与迁移率粒子恒定移动速度粒子恒定移动速度 v=QE6r迁移率(迁移率()指单位电场强度下带电粒子的)指单位电场强度下带电粒子的运动速度,它与带电粒子关系为:运动速度,它与带电粒子关系为:粒子带净电荷量愈多、直径愈小、愈接近球粒子带净电荷量愈多、直径愈小、愈接近球形,在电场中移动速度愈快。形,在电场中移动速度愈快。95全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业

89、规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术( (二二) )影响电泳的因素影响电泳的因素y1.1.待分离物质的性质待分离物质的性质一般来说,粒子带的电荷量越大、直径越小、一般来说,粒子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快。形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快。y2.2.缓冲液的性质缓冲液的性质(1 1)溶液的)溶液的pH值:决定了待分离生物分子值:决定了待分离生物分子的解离程度,影响其带电性质、净电荷量。的解离程度,影响其带电性质、净电荷量。(2 2)缓冲液离子强度一般在)缓冲

90、液离子强度一般在0.020.20molkg之间。之间。96全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.电场强度电场强度电场强度也称电位梯度,它是指单位长度的电位降电场强度也称电位梯度,它是指单位长度的电位降(V/cm)。电压越高,电场强度越大,迁移率越大,)。电压越高,电场强度越大,迁移率越大,带电粒子移动越快。带电粒子移动越快。y4.支持介质的性质支持介质的性质包括支持介质的黏性吸附对泳动的阻碍作用,支持包括支持介质的黏性吸附对泳动

91、的阻碍作用,支持介质的分子筛和电渗作用。介质的分子筛和电渗作用。y此外,此外,温度升高时,介质黏度下降,分子运动加剧,引温度升高时,介质黏度下降,分子运动加剧,引起自由扩散加快、区带变宽和分辨率下降。起自由扩散加快、区带变宽和分辨率下降。97全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术 二、电泳仪的分类和基本结构二、电泳仪的分类和基本结构98全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化

92、学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)电泳技术的分类(一)电泳技术的分类y1.1.依据工作原理的不同分依据工作原理的不同分移动界面电泳、区带电泳移动界面电泳、区带电泳( (zone electrophoresis) )、稳态电泳或称置换电泳、稳态电泳或称置换电泳等。等。y2.2.依据有无支持物分依据有无支持物分自由电泳和支持物电泳(区带电泳)。自由电泳和支持物电泳(区带电泳)。y3.3.依据电源控制的不同分依据电源控制的不同分恒压电泳、恒流电泳、恒功率电泳。恒压电泳、恒流电泳、恒功率电泳。99全国高等医药院校医学检验专业规划教

93、材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.4.依据自动化程度的不同分依据自动化程度的不同分手工操作、半自动电泳、全自动电泳、全手工操作、半自动电泳、全自动电泳、全自动电泳分析系统。自动电泳分析系统。y其他分类方式其他分类方式依据支持载体的装置形式,区带电泳可分依据支持载体的装置形式,区带电泳可分成水平平板电泳、垂直板状电泳、垂直柱成水平平板电泳、垂直板状电泳、垂直柱状电泳、状电泳、U型管电泳、倒型管电泳、倒V字字形电泳、毛形电泳、毛细管电泳等。细管电泳等。100全国

94、高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)电泳仪的基本结构(二)电泳仪的基本结构y1.手工电泳仪手工电泳仪自动化程度低,其电源、电泳槽,以及自动化程度低,其电源、电泳槽,以及电泳条带分析装备电泳条带分析装备(或扫描仪或扫描仪)三部分的结三部分的结构分离,加样、电泳、电泳后的染色和脱构分离,加样、电泳、电泳后的染色和脱色等均需手工操作,人工设置参数完成电色等均需手工操作,人工设置参数完成电泳。泳。101全国高等医药院校医学检验专业规划教材

95、全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.自动电泳分析仪自动电泳分析仪将电源、电泳槽、烘箱、染色缸等组合将电源、电泳槽、烘箱、染色缸等组合在一起,采用计算机对电泳过程进行控制,在一起,采用计算机对电泳过程进行控制,部分乃至全部操作由电泳仪完成;部分乃至全部操作由电泳仪完成;依据自动化程度分半自动或全自动电泳依据自动化程度分半自动或全自动电泳仪。仪。y全自动电泳仪组成全自动电泳仪组成迁移烘干培养模块、迁移烘干培养模块、染色去染色去色烘干模块、色烘干模块、键盘、荧光屏

96、、键盘、荧光屏、电源电源装置、装置、PCPC主板等组成。主板等组成。102全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术全自动电泳仪外型图全自动电泳仪外型图 103全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术三、自动电泳仪的使用和保养三、自动电泳仪的使用和保养104全国高等医药院校医学检验

97、专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术 ( (一一) )自动电泳仪的操作使用自动电泳仪的操作使用y自动自动电泳仪就是模拟手工电泳的过程,支持电泳仪就是模拟手工电泳的过程,支持物准备、加样、搭桥、电泳(迁移)、固定物准备、加样、搭桥、电泳(迁移)、固定染色、漂洗、脱色、染色、漂洗、脱色、烘干、烘干、扫描、计算、打扫描、计算、打印等印等依次按程序自动进行。依次按程序自动进行。y光密度扫描仪的操作同样全部程控。光密度扫描仪的操作同样全部程控。105全国高等医药院校

98、医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)自动电泳仪的保养(二)自动电泳仪的保养y每天保养的重点应当是电极的维护,每天电每天保养的重点应当是电极的维护,每天电泳工作完成后,应当用干滤纸擦净电极,避泳工作完成后,应当用干滤纸擦净电极,避免缓冲盐沉积于电极上或酸碱对电极的腐蚀。免缓冲盐沉积于电极上或酸碱对电极的腐蚀。y每月保养的重点应是扫描系统的比色滤镜及每月保养的重点应是扫描系统的比色滤镜及光源。光源。106全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高

99、等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术四、电泳分析的质量控制四、电泳分析的质量控制107全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)电泳分析前质量控制(一)电泳分析前质量控制y1.1.电泳分析方法的选择电泳分析方法的选择在进行电泳分析前,加强实验室与临床医在进行电泳分析前,加强实验室与临床医生的沟通,宣传实验室所开展

100、的电泳技术及生的沟通,宣传实验室所开展的电泳技术及应用,全面了解电泳仪的结构和原理、电泳应用,全面了解电泳仪的结构和原理、电泳结果的意义,合理使用电泳分析方法。结果的意义,合理使用电泳分析方法。108全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.标本的采集与保存标本的采集与保存 (1 1)标本采集:宜采集新鲜血液,分离血清作为电)标本采集:宜采集新鲜血液,分离血清作为电泳标本;避免标本溶血,否则导致电泳分析异常。泳标本;避免标本溶血

101、,否则导致电泳分析异常。脑脊液脑脊液( (CSF) )标本也应以新鲜采集为最佳;在做标本也应以新鲜采集为最佳;在做CSF免疫固定电泳时,必须是对同一病人同时采集免疫固定电泳时,必须是对同一病人同时采集CSF标标本和血清标本。尿液标本以新鲜的晨尿为佳。本和血清标本。尿液标本以新鲜的晨尿为佳。(2 2)标本保存:不能立即进行电泳分析的标本血液,)标本保存:不能立即进行电泳分析的标本血液,应先分离血清,再保存。血清、脑脊液和尿液标本,应先分离血清,再保存。血清、脑脊液和尿液标本,在在28冷藏保存可稳定冷藏保存可稳定1 1周,周,- -20冰冻至少可保冰冻至少可保存存1 1个月,个月,- -40保存可

102、长达保存可长达5 5年。如血清标本加入年。如血清标本加入0.2gL的叠氮钠,冷冻保存的稳定性更好。的叠氮钠,冷冻保存的稳定性更好。109全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.电泳试剂的保存电泳试剂的保存应遵照试剂使用说明书的要求保存电泳试剂,避应遵照试剂使用说明书的要求保存电泳试剂,避免因电泳试剂产生误差。免因电泳试剂产生误差。大多数厂家的电泳载体使用的是琼脂糖凝胶,其大多数厂家的电泳载体使用的是琼脂糖凝胶,其保存期至少在半

103、年以上。保存期至少在半年以上。凝胶片通常在干燥的室温条件下保存,具有生物凝胶片通常在干燥的室温条件下保存,具有生物活性的试剂活性的试剂( (如抗体、酶等如抗体、酶等) )需严格按要求保存,需严格按要求保存,其他配套保存试剂应在有效期内使用。其他配套保存试剂应在有效期内使用。110全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)电泳分析中的质量控制(二)电泳分析中的质量控制y1.1.标本准备和使用标本准备和使用标本是否需要稀释或浓缩,应根据

104、不同电泳要标本是否需要稀释或浓缩,应根据不同电泳要求而定。一般来说,血清蛋白电泳标本不需稀释;求而定。一般来说,血清蛋白电泳标本不需稀释;但免疫固定电泳标本一般需要稀释;尿液电泳分但免疫固定电泳标本一般需要稀释;尿液电泳分析时,如果尿中蛋白的浓度达不到析时,如果尿中蛋白的浓度达不到15 gL20gL,应对尿标本进行浓缩处理。,应对尿标本进行浓缩处理。由于冷冻后的血清标本有时会变得黏稠或混浊,由于冷冻后的血清标本有时会变得黏稠或混浊,影响血清的扩散,所以冷冻的标本在电泳分析前影响血清的扩散,所以冷冻的标本在电泳分析前要置室温平衡。要置室温平衡。111全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医

105、药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术由于冷冻标本蛋白或脂蛋白可能降解,解由于冷冻标本蛋白或脂蛋白可能降解,解冻后应予以标记,以便在结果分析时观察是冻后应予以标记,以便在结果分析时观察是否存在否存在- -脂蛋白向阴极漂移;越陈旧的血清脂蛋白向阴极漂移;越陈旧的血清标本,电泳时这种漂移更明显。标本,电泳时这种漂移更明显。标本量的要求尽可能做到严格和精确,否标本量的要求尽可能做到严格和精确,否则所定出的区带可能不一致或不清。则所定出的区带可能不一致或不清。112全国高等医药院校医学检

106、验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.电泳操作电泳操作自动化电泳与手工法电泳操作一样,应自动化电泳与手工法电泳操作一样,应注意加样、电泳、染色等因素对电泳结果注意加样、电泳、染色等因素对电泳结果的干扰,如样品是否同时的干扰,如样品是否同时“点点”在凝胶片在凝胶片上,电泳方式的选择是否正确,染色液是上,电泳方式的选择是否正确,染色液是否足够,扫描胶片是否否足够,扫描胶片是否“对号入座对号入座”等。等。113全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高

107、等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.质控物正确应用质控物正确应用质控物应每天插入病人标本中进行操作,以判断电质控物应每天插入病人标本中进行操作,以判断电泳过程的可靠性。泳过程的可靠性。自动化电泳分析的质控品已商业化,目前较成熟的自动化电泳分析的质控品已商业化,目前较成熟的商业性质控物主要用于血清蛋白电泳分析。商业性质控物主要用于血清蛋白电泳分析。在无合适商品化质控物的情况下,也可以考虑用正在无合适商品化质控物的情况下,也可以考虑用正常人血清。常人血清。114全国高

108、等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(三)电泳分析后的质量控制(三)电泳分析后的质量控制y电泳后的质量控制主要包括电泳结果的及电泳后的质量控制主要包括电泳结果的及时发送、对分析结果的正确解释和应用以时发送、对分析结果的正确解释和应用以及电泳分析后自动电泳仪的维护和保养等。及电泳分析后自动电泳仪的维护和保养等。115全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版

109、)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术五、电泳分析技术的临床应用五、电泳分析技术的临床应用116全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)蛋白质电泳(一)蛋白质电泳y1.1.血清蛋白电泳血清蛋白电泳许多疾病可使血清蛋白浓度和组分比例发生改变,许多疾病可使血清蛋白浓度和组分比例发生改变,形成具有一定特征的血清蛋白电泳图谱。形成具有一定特征的血清蛋白电泳图谱。详见第十章血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱

110、。详见第十章血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱。y2.2.免疫固定电泳免疫固定电泳可对各类可对各类Ig及其轻链进行分型,最常用于临床常及其轻链进行分型,最常用于临床常规规M蛋白的分型与鉴定。一般用于单克隆蛋白的分型与鉴定。一般用于单克隆Ig增殖增殖病、本周氏蛋白和游离轻链病、多组分单克隆病、本周氏蛋白和游离轻链病、多组分单克隆Ig病、多克隆病、多克隆Ig病的诊断和鉴别诊断。病的诊断和鉴别诊断。117全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术

111、免疫固定电泳免疫固定电泳 118全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.脂蛋白电泳脂蛋白电泳主要用于高脂血症的分型、冠心病危险性估主要用于高脂血症的分型、冠心病危险性估计,以及动脉粥样硬化性及相关疾病的发生、计,以及动脉粥样硬化性及相关疾病的发生、发展、诊断和治疗效果观察的研究等。发展、诊断和治疗效果观察的研究等。y4.4.尿蛋白电泳尿蛋白电泳尿蛋白电泳的主要目的:尿蛋白电泳的主要目的:确定尿蛋白的来确定尿蛋白的来源;源;了解

112、肾脏病变的严重程度。了解肾脏病变的严重程度。119全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术尿蛋白电泳尿蛋白电泳 y1.非选择性肾小球蛋白尿;非选择性肾小球蛋白尿;2. 肾小管蛋白尿;肾小管蛋白尿;3. 生理性蛋白生理性蛋白尿;尿;4.混合性蛋白尿;混合性蛋白尿;5. 部分选择性肾小球蛋白尿部分选择性肾小球蛋白尿120全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第

113、二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)同工酶电泳(二)同工酶电泳y1. 1. 肌酸激酶同工酶电泳分析肌酸激酶同工酶电泳分析通过电泳分析,通过电泳分析,CKCK同工酶可分为同工酶可分为CK-MMCK-MM、MBMB及及BBBB三种三种组分。组分。当颅骨损伤时,电泳图上出现明显的当颅骨损伤时,电泳图上出现明显的CK-BBCK-BB峰,一般峰,一般超过总超过总CKCK的的2 2。中度心肌梗死时,。中度心肌梗死时,CK-MBCK-MB峰变得明峰变得明显,占总显,占总CKCK的比例在的比例在5 51212之间。之间。典型肝癌、肺癌病人典型肝癌、肺癌病人CKC

114、K同工酶图谱明显的特征是同工酶图谱明显的特征是CK-CK-MMMM峰表现出峰表现出“双峰双峰”现象,这个峰除了现象,这个峰除了MMMM组分外,组分外,还存在还存在“巨巨CKCK组分,组分,MMMM的比例由原来的比例由原来9595以上降到以上降到20203030左右。左右。121全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术CK同工酶电泳图谱同工酶电泳图谱 122全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物

115、化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.CK同工酶亚型电泳同工酶亚型电泳CK-MM亚型亚型(CK-MM1、CK-MM2、CK-MM3)和和CK-MB亚型亚型(CK-MB1、CK-MB2)可采用琼脂糖凝可采用琼脂糖凝胶高压电泳进行快速分析,主要用于胶高压电泳进行快速分析,主要用于AMI的早期诊的早期诊断,也可用于确定心肌再灌注、溶栓治疗后的病情断,也可用于确定心肌再灌注、溶栓治疗后的病情观察。观察。y3.3.乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶( (LDLDH) )同工酶电泳同工酶电泳主要用于急性心肌梗死主要用于急性心肌梗死(

116、(AMI)()(LD1LD2) )、肺梗死、肺梗死和急性肝炎等的诊断和鉴别诊断。和急性肝炎等的诊断和鉴别诊断。123全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术LDH同工酶电泳图谱同工酶电泳图谱 返回章目录返回章目录124全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术【小结】【小结】y通过

117、检测浊度的大小通过检测浊度的大小,对溶液中某种物质含量进行分析的,对溶液中某种物质含量进行分析的方法称为浊度分析。浊度分析法可分为透射免疫浊度法方法称为浊度分析。浊度分析法可分为透射免疫浊度法和散射免疫浊度法两大类。和散射免疫浊度法两大类。y散射浊度分析仪主要由分析系统、计算机系统组成。质量散射浊度分析仪主要由分析系统、计算机系统组成。质量控制包括抗原过剩校正、减少伪浊度、选择适宜的入射控制包括抗原过剩校正、减少伪浊度、选择适宜的入射光波长和校正仪器等。光波长和校正仪器等。y浊度分析多用于特定蛋白含量的测定,主要应用于免疫功浊度分析多用于特定蛋白含量的测定,主要应用于免疫功能、风湿及类风湿、肾

118、脏功能、炎症状况、营养状况的能、风湿及类风湿、肾脏功能、炎症状况、营养状况的检测等。检测等。125全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y电解质和血气分析是应用电化学分析技术和原理,采电解质和血气分析是应用电化学分析技术和原理,采用电极对血液中用电极对血液中Na+、K+、Cl-等电解质,或等电解质,或pH值、值、PCO2、PO2进行测定的分析技术。基本定量方法有进行测定的分析技术。基本定量方法有标准比较法、标准曲线法、标准加入法。标准

119、比较法、标准曲线法、标准加入法。y分析仪一般由电极组、液路系统、电路系统等组成;分析仪一般由电极组、液路系统、电路系统等组成;仪器的维护保养主要是电极系统和流路系统的保养。仪器的维护保养主要是电极系统和流路系统的保养。质量控制包括分析前、分析中和分析后的质量控制。质量控制包括分析前、分析中和分析后的质量控制。y电解质和血气分析主要用于机体电解质平衡、呼吸功电解质和血气分析主要用于机体电解质平衡、呼吸功能和酸碱平衡状态的临床实验诊断。能和酸碱平衡状态的临床实验诊断。126全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版

120、)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y电泳技术主要用于各种生物分子的分离分析。影响电泳技术主要用于各种生物分子的分离分析。影响电泳的因素包括待分离物质、缓冲液、支持介质的电泳的因素包括待分离物质、缓冲液、支持介质的性质和电场强度等。依据自动化程度,电泳分析分性质和电场强度等。依据自动化程度,电泳分析分为手工、半自动或全自动电泳。为手工、半自动或全自动电泳。y电泳仪的维护的重点是电极。与其他临床检验一样,电泳仪的维护的重点是电极。与其他临床检验一样,电泳分析也应开展全程质量控制。电泳分析也应开展全程质量控制。y临床实验室常见的电泳主要有血清、尿液和脑脊液临床

121、实验室常见的电泳主要有血清、尿液和脑脊液样本的蛋白质电泳、同工酶电泳等。样本的蛋白质电泳、同工酶电泳等。127全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术【展望展望】y未来临床检验仪器发展的方向:未来临床检验仪器发展的方向:仪器设计机器人化。从送入标本、条码输入、完成检仪器设计机器人化。从送入标本、条码输入、完成检测、数据存储输出、连接网络测、数据存储输出、连接网络, 由计算机控制仪器一次由计算机控制仪器一次完成完成,速度更加快捷。速度更加快捷。仪器模块化。仪器采用先进的控制技术仪器模块化。仪器采用先进的控制技术, 按照模块化按照模块化结构设计开发,形成一个高质量多功能的检验系统。结构设计开发,形成一个高质量多功能的检验系统。即时床旁检验仪器。仪器向携带便捷、无需专业人即时床旁检验仪器。仪器向携带便捷、无需专业人员操作、结果即时可得的员操作、结果即时可得的“即时检验即时检验”或或“床旁检验床旁检验”仪器仪器方向发展。方向发展。128返回章目录返回章目录129

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