《生物样品分析测定ppt课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生物样品分析测定ppt课件（17页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第一第一节 概述概述 生物生物药物分析的物分析的对象象药物所到之生物体的物所到之生物体的体液、器官、体液、器官、组织、排泄物等。、排泄物等。生物生物药物分析的目的物分析的目的母体母体药物和代物和代谢产物物生物生物药物分析的意物分析的意义药物物质量的正确量的正确评价价临床合理用床合理用药:第一节第一节 概述概述 生物药物分析的特点生物药物分析的特点生物样品中被测组分的存在方式多样生物样品中被测组分的存在方式多样原型药游离型、结合型、代谢物、缀合物等原型药游离型、结合型、代谢物、缀合物等被测组分浓度低被测组分浓度低10-6-10-9g/ml，变化幅度大，变化幅度大样品干扰物质多，部分样品稳定差样品
2、干扰物质多，部分样品稳定差样品量少样品量少要求较快提供结果要求较快提供结果测定数据的处置和阐明有时不太容易测定数据的处置和阐明有时不太容易:第二第二节 药物在生物体内的存在形状与生物物在生物体内的存在形状与生物转化化药物在生物体内的存在形状物在生物体内的存在形状药物代物代谢保保证临床用床用药的平安、合理的平安、合理和有效和有效药物代物代谢的部位：肝的部位：肝脏、肾、脾、肺、脾、肺、肠粘膜、胎粘膜、胎盘等等药物代物代谢反响反响第一第一阶段一相：段一相：P450等催化下的氧等催化下的氧化、复原、水解等反响，增大极性化、复原、水解等反响，增大极性第二第二阶段二相：与葡萄糖段二相：与葡萄糖醛酸、硫酸酸
3、、硫酸盐等等结合，合，进一步增大极性，随尿排出一步增大极性，随尿排出:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 常用生物样品常用生物样品生物样品的选取原那么生物样品的选取原那么可以反映出浓度与药效之间的关系可以反映出浓度与药效之间的关系易于获得易于获得便于处置便于处置根据不同目的和要求进展选取根据不同目的和要求进展选取:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 常用生物常用生物样品品常用生物常用生物样品的种品的种类、特点与采集、特点与采集 血血浆(plasma)血血样 血清血清(serum) 全血全血(whole blood)尿液尿液(urine)用于用于药物物剂量回收、量回收、药物物肾去除率及生去除
4、率及生物利用度的研物利用度的研讨 尿液尿液药物物浓度度变化大，化大，应测定一定定一定时间内尿中内尿中药 物物总量。量。 尿液与血液中尿液与血液中药物的相关性差。物的相关性差。 尿中尿中药物大多呈物大多呈缀合形状。合形状。:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 常用生物常用生物样品品常用生物常用生物样品的种品的种类、特点与采集、特点与采集唾液唾液(saliva)用于用于药物物浓度度监测和和药代代动力学研力学研讨其他其他动物物脏器器组织匀匀浆等等样本的代表性本的代表性力求取力求取样条件条件规范化范化样品的品的储存存血血样离心，冷离心，冷冻保管保管尿液立刻尿液立刻测定，否那么定，否那么应冷藏或加防腐
5、冷藏或加防腐剂:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 样品预处置样品预处置提取方法的选择根据提取方法的选择根据药物的理化性质药物的理化性质-酸碱度、极性、挥发性、能够的生物转化途径等酸碱度、极性、挥发性、能够的生物转化途径等药物的浓度范围药物的浓度范围药物测定的目的药物测定的目的生物样品的类型生物样品的类型样品处置与分析技术的关系样品处置与分析技术的关系:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 样品预处置样品预处置药物的提取药物的提取蛋白质处置蛋白质处置利用蛋白质脱水沉淀利用蛋白质脱水沉淀有机溶剂、中性盐等有机溶剂、中性盐等利用蛋白质构成不溶性盐沉淀利用蛋白质构成不溶性盐沉淀酸性沉淀剂酸性沉淀剂
6、TCA、高氯酸、苦味酸等、高氯酸、苦味酸等重金属盐重金属盐Zn2+、Cu2+其他方法其他方法加热、离心、超滤和透析、酶消化法加热、离心、超滤和透析、酶消化法:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 样品品预处置置药物的提取物的提取缀合物合物结合物水解合物水解酸水解酸水解无机酸无机酸 简便快速，但便快速，但专属性差，有能属性差，有能够呵斥被呵斥被测物分解。物分解。酶水解水解葡萄糖葡萄糖醛酸苷酸苷酶(glucuronidase)芳基硫酸芳基硫酸酯酶(arylsulfatase) 专属性属性强，普通不会呵斥被，普通不会呵斥被测物分解，但水解物分解，但水解时间长，费用高。用高。溶溶剂解解:第三第三节 生
7、物生物样品的制品的制备 样品预处置样品预处置药物的提取药物的提取冷冻枯燥冷冻枯燥适用于适用于-大批量的生物样品大批量的生物样品-水溶性很强的样品水溶性很强的样品-挥发性样品挥发性样品-对热不稳定的样品对热不稳定的样品:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 样品预处置样品预处置药物的分别与净化药物的分别与净化液液-液萃取液萃取萃取率：不低于萃取率：不低于50%影响提取率的要素影响提取率的要素pH值值提取溶剂提取溶剂离子强度离子强度离子对提取离子对提取:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 样品品预处置置药物的分物的分别与与净化化液液-固萃取固萃取固相提取柱运用硅藻土、氧化固相提取柱运用硅藻土、氧
8、化铝、离子交、离子交换树脂、脂、活性炭等填充活性炭等填充剂“干混合物萃取干混合物萃取待待测组分的富集分的富集真空真空挥发或通气流或通气流挥发衍生化衍生化处置置:第三第三节 生物生物样品的制品的制备 样品预处置样品预处置待测物的损失待测物的损失吸附、化学降解、衍生化反响、络合、蒸发吸附、化学降解、衍生化反响、络合、蒸发样品玷污样品玷污增塑剂增塑剂脂肪酸和酯类脂肪酸和酯类其他其他:第四第四节 生物生物样品内品内药物分析方法物分析方法 分析方法建立的普通步骤分析方法建立的普通步骤 以纯品进展测定以纯品进展测定 确定线性范围、最适测定浓度、灵敏度、最确定线性范围、最适测定浓度、灵敏度、最正确测定条件等
9、正确测定条件等空白样品测定空白样品测定以水替代空白样品，添加对照品后测定以水替代空白样品，添加对照品后测定 了解提取回收率和最低检测浓度的大致情况了解提取回收率和最低检测浓度的大致情况空白样品中添加对照品后测定回收率实验空白样品中添加对照品后测定回收率实验实践样品测定实践样品测定:第四第四节 生物生物样品内品内药物分析方法物分析方法 方法的方法的评价价准确度准确度accuracy回收率回收率相相对稳定定与参比如法相比与参比如法相比较相关系数相关系数r 0.95精精细度度precision 各各浓度点度点RSD不不应大于大于15%，最低定量限不，最低定量限不应大于大于20%。灵敏度灵敏度检测限限
10、(LOD)、定量限、定量限(LOQ)、最低、最低检测浓度度:第四第四节 生物生物样品内品内药物分析方法物分析方法 方法的方法的评价价方法的方法的专属性属性specificity 注重思索代注重思索代谢物、内源性物物、内源性物质和同和同时服服用用药物的干物的干扰线性范性范围-相关系数相关系数r 0.99 样品品稳定性定性调查长期期储存存(-20 /-70)、短期室温、短期室温储存存冷冷冻-解解冻循循环稳定性定性贮备液液稳定性定性:第四第四节 生物生物样品内品内药物分析方法物分析方法常用测定方法常用测定方法 光谱法光谱法紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法荧光分光光度法荧光分光光度法色谱法色谱法电泳法电泳法免疫分析法免疫分析法:
