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1、微生物实验室微生物实验室质量控制质量控制 质量管理是实验室检测工作的客观要求，也是实验室建设和提高能力的重要内容，是确保实验室检测数据准确、客观、真实的基本保证，也是保持实验室检测工作客观、公平、公正的基本要求,又是规范实验室检测行为的重要举措。 第一部分第一部分 概概 述述质量管理的目的质量管理的目的保证检测数据的真实性出具科学可靠的检测数据确保检测工作的公平、公正为社会提供优质服务（政府或客户）特点特点检测的目标物是动态变化的目标物受环境条件影响很大以定性半定量为主受检验者主观和能力的影响大对样本的采集和保存要求高压力大结果具有的影响大质量管理的目标质量管理的目标反映样本的真实特性维持检测
2、结果的真实、稳定、客观提供科学、客观的数据为社会提供良好的服务为政府部门决策提供科学依据和技术支撑质量管理依据质量管理依据GB/T 27025-2008检测和校准实验室能力的通用要求；各病种的实验室诊断标准；各病种监测方案（国家和省）；相关疾病的防治手册；各病种的技术指南ISO9001 -2008质量管理体系 要求ISO15189 医学实验室质量和能力特殊要求其它相关国家标准、行业标准、部门标准。主要措施主要措施1.创建组织机构,明确各自职责(成立管理组织组建 领导小组,明确部门和岗位职责)2.建立管理体系:质量手册(质量方针质量目标) 程序文件(规范工作程序) 标准操作程序(明确操作要求:标
3、准方案) 记录表格(相关过程性资料)3.国家或省级计量认证(强制法定)(资格的认可)4.通过国家实验室认可(自愿)(能力的认可和证明)5.各单项资质认可(化妆品职业病食品检验机构等)(资格的准入)主要措施主要措施6.盲样比对或考核: 室内比队(自身) 室间比对(上级)(单盲双盲)7.参与网络实验室(从标准操作程序管理规范技术能力等进行规范及职责的分工)10质量控制的质量控制的1212个环节个环节过程控制过程控制采购和采购和物存管理物存管理评估评估标准和认可标准和认可差错管理差错管理信息管理信息管理过程改进过程改进顾客服务顾客服务设施和安全设施和安全组织机构组织机构人员管理人员管理设备设备文件和
4、记录文件和记录质量控制的主要环节质量控制的主要环节 组织机构和体系建设组织机构和体系建设1.成立组织机构,明确职责分工;2.建立完善管理体系质量控制的主要环节质量控制的主要环节人员管理人员管理1.人员准入: 专业背景能力责任心工作态度2.培训: 体系程序SOP技术指南检测方案标准等;3.能力培养:实践指导学习4.继续教育质量控制的主要环节质量控制的主要环节设施设备设施设备: 1.基本设施设备条件配置; 2.设备的管理:检定校准自校 3.使用培训专人操作 4.使用记录维护保养质量控制的主要环节质量控制的主要环节方法的管理方法的管理: 1.标准:国家行业部门 2.防治手册 3.监测方案 4.技术规
5、范 5.技术指南 6.新方法确认质量控制的主要环节质量控制的主要环节采购管理采购管理 1.实验器具:符合国家标准和计量标准要求 试管移液器等 2.试剂:正规厂家符合标准的产品,纯度等级 符合要求,有效期内 3.诊断试剂:保存条件室间比对正规产品有 效期内质量控制的主要环节质量控制的主要环节信息管理信息管理 1.开发实验室信息管理系统 2.建立信息管理平台 3.规范检测报告流程 4.实现数据查询和统计分析质量控制的主要环节质量控制的主要环节差错管理差错管理 1.自然现象 2.查找分析原因,采取纠正措施 3.持续改进(不断有差错发生) 差错的原因: 违反操作程序 能力原因 方法原因 体系的原因 系
6、统原因(系统误差) 其它原因质量控制的主要环节质量控制的主要环节文件的控制和记录文件的控制和记录 程序文件 SOP 标准 文件的发放与控制 过程记录 要求:符合国家要求,保持现行有效,防止误用.质量控制的主要环节质量控制的主要环节设施与安全设施与安全1.设施环境条件:温度湿度照明通风洁净度等;2.污水处理系统3.人流物流的控制4.安全设施设备的保障.标准的管理标准的管理 标准的追踪和更新标准的追踪和更新 标准的应用和控制标准的应用和控制 避免误用避免误用 第二部分第二部分 样本的管样本的管理理Specimen Management微生物实验的样本管理微生物实验的样本管理样本是进行一切实验室检测
7、的样本是进行一切实验室检测的基础基础 所有实验室检测的结果都依赖所有实验室检测的结果都依赖于所得到样本的质量于所得到样本的质量过程控制文件过程控制文件微生物学检验过程微生物学检验过程试验试验过程控制过程控制样品采集样品采集样品标记样品标记样品运输样品运输培养基培养基染料染料仪器仪器样品接收样品接收和登记和登记检验检验分析分析研究研究准备准备临床相临床相关报告关报告试剂试剂人员人员 熟练程度熟练程度方法方法 器材器材样品种类来自动物: 组织/血液/体液/排泄物来自人体:组织/血液/体液/排泄物 临床患者 现场调查 体检人群 突发疫情空气水食品其它样品样品特点临床患者: 检测项目基本确定,目标明确
8、现场调查: 样本数量大,存在运输过程,条件 控制难度大,结果影响大体检人群: 类似临床患者,但项目集中明确突法疫情: 检测目标不明确,时间急,没有成 熟方法和质量控制措施,结果意义 重大.样本管理的重要性样本管理的重要性直接关系到实验室检测的准确性与效率影响到处置事件的评估与策略制定及决策疫情处理：疫情的判断与防控策略的制定疫情处理：疫情的判断与防控策略的制定监测与普查：流行状况的评估监测与普查：流行状况的评估病例诊断：治疗方案制定、病人预后、疾病负担病例诊断：治疗方案制定、病人预后、疾病负担政府决策的依据政府决策的依据样本管理不善导致的后果样本管理不善导致的后果延误实验室检测结果，甚至产生错
9、误的结果延误实验室检测结果，甚至产生错误的结果误导疫情处理，导致疫情控制不力甚至蔓延误导疫情处理，导致疫情控制不力甚至蔓延错误评估疾病流行状况，导致防治策略偏差错误评估疾病流行状况，导致防治策略偏差错误诊断，病人不满、失去信任错误诊断，病人不满、失去信任延误或误导治疗，造成伤害，严重者导致死亡延误或误导治疗，造成伤害，严重者导致死亡不必要的重复采样或重新检测，增加不必要人力物力浪费疫情、食物中毒样品采集时机不可重复性，无法弥补 样本管理的漏洞样本管理的漏洞责任第一责任第一责任心不强，对所有事情都敷衍或答应对标本的接受不加思索,没有认真核对为照顾各种关系，放弃了提出合理要求的权利拥有权力的人必须
10、支持、尊重实验室按制办事 必须要把服务对象利益放在第一位 对所需要技术范围不了解，工作的盲目性造成样本浪费目前主要存在的问题目前主要存在的问题缺乏相应完善的样本采集程序（缺乏相应完善的样本采集程序（SOPSOP）没有规范的标本包装（采样管、保存容器）没有规范的标本包装（采样管、保存容器）/ /运输规定运输规定标本处理不当（保存温度、贮存液等）标本处理不当（保存温度、贮存液等）标本编号混乱标本编号混乱( (现场和实验室编号不统一现场和实验室编号不统一) )标本的运输标本的运输( (制度和实际操作脱节制度和实际操作脱节) )标本管理的制度不健全标本管理的制度不健全( (不好解决私欲问题不好解决私欲
11、问题) )实验室外送标本实验室外送标本( (资料不全交接手续不到位资料不全交接手续不到位) )在实验室内部存在不协调性在实验室内部存在不协调性( (主要体现在工作安排方面主要体现在工作安排方面, ,延误诊断延误诊断时机时机) )样品的代表性问题样品的代表性问题( (采样部位采样部位 时间时间 数量和质量控制数量和质量控制) )样品量不足样品量不足疫情标本采样要求疫情标本采样要求慎重处理涉及面广、影响重大，直接关系到疫情判断、处置策略制定目的明确，有的放矢，确定采样时间、采样部位、标本采集量无目的的大范围采集标本，无助于疫情病原的诊断，反而会因为标本过多导致实验室检测时间延长，延误疫情诊断时机以
12、科学的态度，本着快速处理的原则，各个工作细节严谨一式三份一份用于实验室检测，一份用于检测结果复核，另一份保存起来留作原始标本以备需要样本不可再获得性，标本采集量应该充分血清标本：实验需要量可能大（ELISA、蛋白电泳等），但实际病人可接受的采血量较小（一般在5ml以内），在与病人、现场医务人员协调下取得人员、场所、试剂耗材准备人员、场所、试剂耗材准备与现场人员协调，安排妥当，避免混乱 采样对象做好准备，安排好采样场所按照采样要求一一准备用品 例：血液采集：各种不同的采血管 不同增菌液、保存液 低温运输设备标本包装与标识人员防护与消毒用品 避免过度防护采样表格与日志采样表格与日志样本采集记录表格
13、识别、记录标本的唯一凭证 建立标本追踪系统的第一环节样本采集记录表病人基本情况，保障能够顺利回访到病人 偏远的农村，方言沟通、文化程度很低，困难样本唯一编号：致命的、无法弥补的错误 编注流水号，编号反复从开始，导致序号混乱，无法辨识病人临床症状信息、人口学信息采样人信息，保证标本能够随时追溯到采样者，核实其他现场信息额外信息记录：在现场发现额外的重要信息，及时记录，特殊标记在采样前印刷备齐，现场及时填写，杜绝采样后补填在采样结束后，立即录入为电子版，原版表格封存备查采样日志：标本采集表的汇总记录，一直记录到标本交接到实验室现场采样现场采样严格按照指定采样要求进行携带适量物品进入现场，避免污染样
14、本采集无菌要求严格无菌(是微生物样本必须面对的问题,意义重大) 血液、脑脊液、胸水、腹水、组织活检、尸检标本 尸检标本中，所有尸检操作者必须随时具备无菌意识，尤其打开胸、腹腔后，各个脏器的采集必须严格无菌操作粪便等标本采集时的无菌要求则相对较低 需要避免不同标本之间的交叉污染样本标记样本标记标本辨识的唯一标识使用最可靠的标记方法在标本容器表面、盖上同时标记高质量的记号笔，耐水、腐蚀、低温字迹清楚有条件的情况下使用条码标签与记录表格一一对应样本现场处理与保存样本现场处理与保存床前接种(病毒细菌)血液标本处理：不同采血管要求：室温孵育、及时摇动不明原因疾病标本 无菌、无抗生素保存管 用于细菌检测：
15、避免盲目增菌、转运培养基 （污染标本：切忌无选择性增菌） 用于病毒检测：病毒保存液保存运输温度 用于病毒检测：低温（-20） 用于细菌检测：4或室温（弧菌），禁零下样本交接与核对样本交接与核对样本交接 填写交接表格，包括送样、接受的日期、时间、地点，双方签字 采样日志中标注交接信息样本核对 样本标记是否与采样记录单记录一一对应； 包装是否完整无泄漏； 样本种类是否符合检测的要求 样本现场处理是否符合要求； 标本量是否足够； 保存与运输条件是否正确等挑出不合格标本，记录原因，进行文字备案，进行恰当处理建立样本追踪系统建立样本追踪系统实验室对所有样本均要建立追踪系统实验室对所有样本均要建立追踪系统
16、 链接采样、实验室检测信息链接采样、实验室检测信息随时可了解样本的来源信息，追踪到原始出处随时可了解样本的来源信息，追踪到原始出处 每份样本能随时查询到实验室检测进度与结果每份样本能随时查询到实验室检测进度与结果 追踪系统中必须严格注明追踪系统中必须严格注明 样本基本信息：编号、样本唯一识别码、采集日期、地点、采样人等； 病人情况：基本信息、临床诊断检测结果等； 实验室检测信息：检测项目、时间、结果采样人员必须保存原始资料以利于追踪备查采样人员必须保存原始资料以利于追踪备查样本追踪系统样本追踪系统现场样本采现场样本采现场样本采现场样本采集记录表集记录表集记录表集记录表实验室实验室实验室实验室标
17、本交接记录标本交接记录标本交接记录标本交接记录实验室标本实验室标本实验室标本实验室标本接收日志接收日志接收日志接收日志检验结检验结果果标本标本存储存储 第三部分 质量控制 一、实验室检测一、实验室检测方法的选择人员选择对照设置结果分析结果判断41质量控制：免疫学质量控制：免疫学- -血清学血清学针对抗原针对抗原-抗体检测试验抗体检测试验每天至少有一次试验带上阳性和阴性对照及空白对每天至少有一次试验带上阳性和阴性对照及空白对照。包括弱阳性对照照。包括弱阳性对照 所有孵箱，摇床和离心机的功能监控所有孵箱，摇床和离心机的功能监控实验人员的经验和能力保证实验人员的经验和能力保证 病原学诊断病原学诊断定
18、性/半定量/定量主观(肉眼)客观(设备)判断实践经验的影响允许误差(12个滴度)43质量控制：分子诊断质量控制：分子诊断样品采集，运输和处理样品采集，运输和处理保证所有上述过程中核酸的充分保证所有上述过程中核酸的充分完整性完整性 控制污染控制污染在无在无DNA区域，配制试剂后进入样本处理区，再进入区域，配制试剂后进入样本处理区，再进入扩增和检测区；并保持这一单向流程扩增和检测区；并保持这一单向流程 ,更换工作服更换工作服. 阳性和阴性空白对照阳性和阴性空白对照参考：参考：感染性疾病的分子诊断方法感染性疾病的分子诊断方法 (CLSI MM3-A)44质量控制：分子生物学诊断质量控制：分子生物学诊
19、断4546实时荧光PCR Real Time PCR样品样品引物引物Taq 聚合酶聚合酶扩增目的片段扩增目的片段SYBR Green 荧光染料荧光染料定量荧光定量荧光+-In47扩增扩增 / 时间时间阳性阳性无扩增无扩增49A/H350A/H551使用使用PCRPCR的风险的风险大多大多RT-PCR试验仍是采用实验室自己试验仍是采用实验室自己研发的方法研发的方法 引物不一定已经优化引物不一定已经优化 阳性对照来自实验室内部阳性对照来自实验室内部 阴性对照来自实验室内部阴性对照来自实验室内部 实验结果的解释需慎重实验结果的解释需慎重 二、现场质量二、现场质量制定SOP采样的质量控制人员培训样本编号包装、运输、保存样本的交接、验收三、信息的管理三、信息的管理建立样本信息库实验室检测网络（样品流转信息化）实验进度和结果查询隐私保护结果报告系统
