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1、临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查 华中科技大学同济医学院华中科技大学同济医学院 同济医院诊断学教研室同济医院诊断学教研室 钟钟 强强临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查l血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白（immunglobulin，Ig）测定测定l血清补体测定血清补体测定l细胞免疫检测细胞免疫检测l感染免疫检测感染免疫检测l自身免疫检查自身免疫检查l肝炎病毒标志物检测肝炎病毒标志物检测l肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测血清免疫球蛋白分类血清免疫球蛋白分类lIg通常是指具有抗体活性和（或）抗体样结构通常是指具有抗体活性和（或）抗体样结构的球蛋白。的球蛋白。l应用免疫电泳与超速离心分析可将应用免疫电泳
2、与超速离心分析可将Ig分分5类：类： IgG、IgA、IgM、 IgD、 IgE。lIgG：含量最多或最主要的含量最多或最主要的Ig（75%），），唯一唯一能够通过胎盘的能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成与分泌。浆细胞合成与分泌。lIgA：约占约占10%，SIgA在局部免疫中起重要作在局部免疫中起重要作用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白lIgM：分子量最大，由分子量最大，由5个个IgM单体通过单体通过J链连接。是最早出现的链连接。是最早出现的Ig，是抗原刺激是抗原刺激后最早出现的抗体，
3、其杀菌、溶菌、溶后最早出现的抗体，其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比血、促吞噬以及凝集作用比IgG高高5001000倍。倍。l测定方法：单向免疫扩散法（测定方法：单向免疫扩散法（RID）或免或免疫比浊法。疫比浊法。血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白测定参考值测定参考值l参考值：参考值： IgG：7.616.6g/L （RID法）法） IgA：7103350mg/L IgM ：0.482.12 g/L .l临床意义临床意义 免疫球蛋白增高免疫球蛋白增高多克隆增高多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病
4、，如疾病，如SLE、类风湿关节炎等。类风湿关节炎等。单克隆增高单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病，如主要见于免疫增殖性疾病，如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。 l免疫球蛋白降低：免疫球蛋白降低：常见于各类先天性免疫缺陷常见于各类先天性免疫缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。期使用免疫抑制剂的病人。l血清血清IgD测定测定 免疫扩散法：免疫扩散法：062mg/L 已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗腺抗体和抗“O”抗体等均属抗体等均
5、属IgD，但但活性甚低。活性甚低。 血清血清IgE：主要由鼻咽部、支气管、胃肠主要由鼻咽部、支气管、胃肠道等粘膜固有层的浆细胞分泌，为亲细道等粘膜固有层的浆细胞分泌，为亲细胞抗体，能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞胞抗体，能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜上的膜上的FceR结合，产生结合，产生I型变态反应。型变态反应。 ELASA：0.10.9mg/L 临床意义：临床意义： 1. I型变态反应型变态反应 2. IgE型骨髓瘤、寄生虫感染等型骨髓瘤、寄生虫感染等 3. 慢性肝炎、慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。类风湿性关节炎等。 l是一种单克隆是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的淋巴细胞异常增殖时产生的
6、IgG分子分子或片段，一般不具有抗体活性。或片段，一般不具有抗体活性。l参考值：参考值：蛋白电泳法，免疫电泳法：阴性蛋白电泳法，免疫电泳法：阴性l意义：意义：1.多发性骨髓瘤（多发性骨髓瘤（MM），），占占35%65%，其，其中中IgG型占型占60%左右；左右； IgA型占型占20%左右；左右； 轻链型轻链型占占15%左右；左右； IgD、 IgE型罕见。型罕见。2.巨球蛋白血症。巨球蛋白血症。3.重链重链病（病（HCDs）。）。4.半分子病。半分子病。5.恶性淋巴瘤。恶性淋巴瘤。6.良性良性M蛋白血症。蛋白血症。血清血清M蛋白测定蛋白测定（M protein，monoclonal immun
7、oglobulins）血清补体测定血清补体测定l补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白，分补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白，分3组：组：9种补体成分（种补体成分（C1C9）；）；B、D、P、H、I 因子；补体调节蛋白，如因子；补体调节蛋白，如C1抑制物、抑制物、C4结合结合蛋白、促衰变因子等。蛋白、促衰变因子等。l总补体溶血活性（总补体溶血活性（CH50）测定测定l参考值参考值 试管法：试管法：50000100000U/L 意义：意义：增高增高 见于急性炎症、急性组织损伤、恶见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠。性肿瘤及妊娠。降低降低 见于急性肾小球肾炎、见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病
8、、亚急性感染性心内膜炎、慢自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。严重烧伤等。 血清补体测定血清补体测定l血清血清C3：主要由巨噬细胞和肝脏合成，在经典主要由巨噬细胞和肝脏合成，在经典激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。 参考值：参考值：免疫比浊法免疫比浊法0.851.70g/L 增高增高 作为急性时相蛋白，在急性炎症、传染病作为急性时相蛋白，在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。反应时增高。降低降低 补体合成能力降低；合成原补体
9、合成能力降低；合成原料不足；消耗或丢失太多；先天性补体缺乏。料不足；消耗或丢失太多；先天性补体缺乏。 血清补体测定血清补体测定l血清血清C4测定：测定：由肝脏、吞噬细胞合成，由肝脏、吞噬细胞合成，参与补体的经典激活途径。参与补体的经典激活途径。l参考值：参考值：单向免疫扩散法：单向免疫扩散法：0.197+/-0.109/L。l临床意义临床意义基本与基本与C3相似，降低还见于多相似，降低还见于多发性骨髓瘤、发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性肾病、遗传性C4缺乏症缺乏症等。等。血清补体测定血清补体测定l补体补体C1q测定测定l参考值：参考值：0.1790.04g/L l临床意义：临床意义：与与C3相似
10、，降低还见于活动相似，降低还见于活动性混合性结缔组织病、重度营养不良、性混合性结缔组织病、重度营养不良、肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。lB因子测定因子测定-C3激活剂前体激活剂前体细胞免疫检查细胞免疫检查l淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l T淋巴细胞表面标志物检测：淋巴细胞表面标志物检测：E玫瑰花玫瑰花形成试验、免疫荧光法（形成试验、免疫荧光法（IFA）、）、荧光激荧光激活细胞分类法（活细胞分类法（FACS）、）、免疫金银法以免疫金银法以及免疫酶染色法等。及免疫酶染色法等。lE玫瑰花形成试验玫瑰花形成试验 SRBC+CD2l参考值参考值 Et
11、 64.4%6.7%l免疫荧光法免疫荧光法T淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l意义意义 可用于可用于T淋巴细胞计数，淋巴细胞计数， T淋巴细胞亚淋巴细胞亚群的分类以及判断群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。淋巴细胞的活化程度。lCD3 分子表达于所有成熟分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面，淋巴细胞的表面，是总是总T淋巴细胞的重要标志，淋巴细胞的重要标志，CD3+ 常见于甲状常见于甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力以及器官移植后排斥反应。力以及器官移植后排斥反应。 CD3+ 主要见于主要见于免疫缺陷病，如免疫缺陷病，如AIDS、先
12、天性胸腺发育不全先天性胸腺发育不全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性肿瘤、肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。免疫抑制剂治疗等。T细胞分化抗原测定l白细胞分化抗原（白细胞分化抗原（cluster differentiation，CD）lCD3代表总代表总T淋巴细胞，淋巴细胞，CD4是是辅助、诱导辅助、诱导T细胞的标细胞的标志，志，CD8是抑制、杀伤性是抑制、杀伤性T细胞的标志。应用单抗和荧细胞的标志。应用单抗和荧光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。的百分率。l参考值参考值 ：免疫荧光
13、法（：免疫荧光法（IFA）：）： CD3为为63.1%10.8%； CD4 为为42.8%9.5%；CD8 19.6%5.9%；CD4 /CD8为（为（2.20.7）/1。流式细胞术：流式细胞术：CD3 61%85%；CD4 28%58%；CD8 19%48%；CD4 /CD80.92.0/1。T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定l临床意义临床意义lCD3lCD4+T细胞下降细胞下降 常见于某些病毒感染性疾病，如常见于某些病毒感染性疾病，如AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等；免疫抑制剂等； 升高升高见于类风湿性关节炎活动期。见于类风湿性
14、关节炎活动期。lCD8+ T细胞下降细胞下降 常见于类风湿性关节炎、常见于类风湿性关节炎、Sjogren综合综合征、重症肌无力、征、重症肌无力、DM（II型）以及膜型肾小球肾炎等；型）以及膜型肾小球肾炎等； 升高升高见于传染性单核细胞增多症急性期、见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢以及慢性乙肝。性乙肝。lCD4 +/CD8+比值下降，比值下降，常见于常见于AIDS、瘤型麻风病、恶瘤型麻风病、恶性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传染性单核细胞增多症、染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等；血吸虫病等；增高增高见于见于类风湿性关节炎
15、活动期、类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症综合征、重症肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。淋巴细胞功能检测淋巴细胞功能检测lT细胞转化试验细胞转化试验l形态学法：形态学法： T细胞转化率细胞转化率60.1%7.6%l3H-TdR掺入法：掺入法：培养淋巴细胞用液体闪乐培养淋巴细胞用液体闪乐烁仪测量，记录每分钟脉冲数烁仪测量，记录每分钟脉冲数（cpm）。）。lSI（刺激指数）刺激指数）=PHA刺激管刺激管cpm均值均值/对照管对照管cpm均值均值lSI2为有意义，为有意义，2为淋巴细胞转化率降低。为淋巴细胞转化率降低
16、。T细胞转化试验细胞转化试验l临床意义临床意义l判断机体细胞免疫功能水平，降低判断机体细胞免疫功能水平，降低常见常见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者，于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者，如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬化等。化等。增高增高常见于常见于Down综合征。综合征。l估计疾病的疗效与预后估计疾病的疗效与预后B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l表面抗原：表面抗原：CD19、CD20、CD21、CD22和和CD40等等l表面受体：表面受体：B细胞抗原受体（细胞抗原受体（BCR）、）、细胞因细胞因子受体子受体（CKR）、）、补体受体（补体受体
17、（CR）与与Fc受体受体等。等。lB细胞表面免疫球蛋白（细胞表面免疫球蛋白（BCR，SmIg）是是B细细胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类型型Ig的单克隆抗体进行检测，可将的单克隆抗体进行检测，可将B细胞分为细胞分为SmIgG、SmIgM、 SmIgA、 SmIgD、 SmIgE。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l参考值：参考值：免疫荧光法（羊抗人）（以携带该标免疫荧光法（羊抗人）（以携带该标志的细胞百分数表示）志的细胞百分数表示）lSmIg+细胞总数：均值细胞总数：均值21%（16%28%）lSmIgG+ 细胞：均值细胞：均值7.1
18、%（4%13%）lSmIgM+细胞：均值细胞：均值8.9%（7%13%）lSmIgA+细胞：细胞： 均值均值2.2%（1%4%）lSmIgD+细胞：细胞： 均值均值6.2%（5%8%）lSmIgE+细胞：细胞： 均值均值0.9%（0%1.5%）B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l临床意义临床意义lSmIg+细胞增高细胞增高 ：常与常与B细胞恶性增殖有细胞恶性增殖有关，主要见于慢淋、毛细胞白血病以及关，主要见于慢淋、毛细胞白血病以及巨球蛋白血症等。巨球蛋白血症等。lSmIg+细胞减低：细胞减低：主要与体液免疫缺陷有主要与体液免疫缺陷有关，常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严关，常见于性联丙
19、种球蛋白缺乏症、严重联合免疫缺陷病等。重联合免疫缺陷病等。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测lB细胞分化抗原细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22测定测定l参考值：参考值：FACS：CD19+细胞细胞 11.74%3.73%l临床意义临床意义 CD19为全部为全部B细胞共有的表面细胞共有的表面标志，标志，增高增高见于见于B细胞系统的恶性种瘤，细胞系统的恶性种瘤，减低减低见于体液免疫缺陷病。见于体液免疫缺陷病。NK细胞活性测定细胞活性测定lNK细胞细胞能直接杀伤效应细胞，具有抗肿瘤、能直接杀伤效应细胞，具有抗肿瘤、抗感染和和免疫调节等功能，亦参与移植物排抗感染和和免疫调节
20、等功能，亦参与移植物排斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。lLDH释放法释放法 l参考值参考值 细胞毒指数：细胞毒指数：27.5%52.5%l51Cr释放法释放法l参考值参考值 NK细胞活性（自然杀伤率）：细胞活性（自然杀伤率）：47.6%76.8%NK细胞活性测定细胞活性测定l临床意义临床意义l活性升高活性升高 常见于病毒感染的早期，常见于病毒感染的早期，Down综合征，接综合征，接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患者。者。l活性降低活性降低 常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病，常见于恶性肿瘤、重症
21、联合免疫缺陷病，AIDS和免疫抑制剂治疗者等。和免疫抑制剂治疗者等。l肿瘤疗效观察及预后评价肿瘤疗效观察及预后评价l免疫调节功能免疫调节功能 NK细胞可释放细胞可释放INF-、INF-和和GM-CSF等细胞因子。等细胞因子。乙型肝炎病毒血清标记物检测乙型肝炎病毒血清标记物检测lHBeAgHBeAg，Anti-Anti-HBeHBe或抗或抗HbeHbelHBeAgHBeAg，Anti-Anti-HBcHBc或抗或抗HbcHbc 测定方法：测定方法：ELASAELASA，RIARIAHBsAgHBsAg，Anti-Anti-HBsHBs或抗或抗HBsHBs乙型肝炎病毒血清标记物检测乙型肝炎病毒血清
22、标记物检测lHBsAg（+）表示肝中有表示肝中有HBV见于：见于：乙型肝炎潜伏期和急性期。乙型肝炎潜伏期和急性期。 慢性迁延性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，慢性迁延性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，肝癌。肝癌。 慢性慢性HBsAg携带者。携带者。 Anti-HBs或抗或抗HBs：中和抗体中和抗体乙型肝炎病毒血清标记物检测乙型肝炎病毒血清标记物检测lHBeAg：有乙型肝炎，是病毒复制活跃，有乙型肝炎，是病毒复制活跃，传染性强的指标；持续阳性易转变为慢传染性强的指标；持续阳性易转变为慢性肝炎；性肝炎； HBeAg+和和 HBsAg+可可垂直传播。垂直传播。lAnti-HBe或抗或抗Hbe：出现于急性
23、感染的出现于急性感染的恢复期，持续时间较长。意味着恢复期，持续时间较长。意味着HBV部部分被清除或抑制，复制减少，传染性降分被清除或抑制，复制减少，传染性降低。低。 乙型肝炎病毒血清标记物乙型肝炎病毒血清标记物lAnti-HBc或抗或抗HBc：反映肝细胞受到反映肝细胞受到HBVHBV侵害侵害的一种指标，主要包括的一种指标，主要包括IgMIgM、IgGIgG、IgAIgA。l抗抗HBc IgMHBc IgM阳性阳性是最早出现的特异性抗体，是是最早出现的特异性抗体，是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，并提示病人的血液有强传染性。也见于慢性活并提示病
24、人的血液有强传染性。也见于慢性活动性肝炎。动性肝炎。l抗抗HBcHBc IgG IgG 其其阳性滴度高，表明患有乙型肝炎，阳性滴度高，表明患有乙型肝炎，指正在感染；低滴度为既往感染指标，体内时指正在感染；低滴度为既往感染指标，体内时间长。间长。乙型肝炎病毒血清标记物乙型肝炎病毒血清标记物lHBV-DNA定性和定量测定：定性和定量测定：目前定量测目前定量测定范围为定范围为102 108 拷贝拷贝/ml。l与血清免疫学结果的综合评价与血清免疫学结果的综合评价HBsAg和和Anti-HBsHBeAg，Anti-HBe ，Anti-HBc5项标志物的变化和联合检测的临床意义项标志物的变化和联合检测的临
25、床意义丙型肝炎病毒标志物检测丙型肝炎病毒标志物检测l抗抗-HCV（ELISA）l抗抗-HCV IgM阳性阳性 常见于急性常见于急性HCV感染，是诊断感染，是诊断丙肝的早期敏感指标；是丙肝的早期敏感指标；是HCV活动的指标，是判断活动的指标，是判断HCV传染性的指标。传染性的指标。 l抗抗-HCV IgGlHCV-RNA测定测定l测定方法测定方法 逆转录巢式逆转录巢式PCR法，荧光定量法，荧光定量PCR法法l（第三代试剂抗原包括（第三代试剂抗原包括C、NS3、NS4、NS5；丙肝病毒易发生变丙肝病毒易发生变异，异，抗抗-HCV阳转时间差异较大阳转时间差异较大）血清抗链球菌溶血素血清抗链球菌溶血素
26、“O”测定测定l参考值：参考值： 乳胶凝集法乳胶凝集法（LAT）：）：500U l意义：增高意义：增高 常见于常见于A组溶血链球菌感染相关疾组溶血链球菌感染相关疾病，如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、病，如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。链球菌感染后肾小球肾炎等。lASO 在在A组溶血链球菌感染后组溶血链球菌感染后1周开始升高，周开始升高，46周达高峰，可持续几个月或几年。周达高峰，可持续几个月或几年。l假阳性与假阴性假阳性与假阴性伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定l肥达（肥达（Widal）反应反应l参考值参考值lO凝集价凝集价1：80l伤寒伤寒
27、H凝集价凝集价1：160l副伤寒副伤寒A、B、C凝集价凝集价1：80l伤寒、副伤寒沙门菌抗体伤寒、副伤寒沙门菌抗体IgM测定测定l参考值参考值 ELASA法：法：阴性或滴度阴性或滴度1：20。伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定l临床意义临床意义lO升高，升高，H正常正常lH正常，正常，O升高升高lO升高，升高，H升高升高lO升高，升高，A、B、C任何一项升高任何一项升高 血清血清C-反应蛋白（反应蛋白（CRP）测定测定lC-反应蛋白反应蛋白是一种由肝脏合成的，能与肺炎双球菌是一种由肝脏合成的，能与肺炎双球菌C多多糖体起反应的急性时相反应蛋白，具有激活补体，促糖体起反应的急性时
28、相反应蛋白，具有激活补体，促进吞噬和免疫调理作用。进吞噬和免疫调理作用。l参考值：参考值：8.2mg/L（免疫比浊法）免疫比浊法）l意义意义 组织损伤组织损伤，如大手术，严重创伤，烧伤，心肌梗，如大手术，严重创伤，烧伤，心肌梗死等，发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下死等，发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。l风湿热活动期，可达风湿热活动期，可达200mg/L以上。以上。l细菌性感染常明显升高，病毒性感染升高不明显或轻细菌性感染常明显升高，病毒性感染升高不明显或轻度升高。度升高。l恶性肿瘤，器官移植
29、后排斥反应，妊娠等可见明显升恶性肿瘤，器官移植后排斥反应，妊娠等可见明显升高可在发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下高可在发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下降至正常。降至正常。肾综合征出血热病毒抗体检测肾综合征出血热病毒抗体检测l参考值参考值lIFA，ELASA：阴性阴性l特异性特异性IgM-感染后感染后23天检出，天检出，710天达天达高峰。特异性高峰。特异性IgG感染后两周出现，可持感染后两周出现，可持续多年。续多年。艾滋病血清学检查艾滋病血清学检查l检测抗检测抗HIV（I型或型或II型）型）是是AIDS诊断的一个主要指标。诊断的一个主要指标。抗原为抗原为HIV感染感染的的T细胞
30、株的病毒抗原（细胞株的病毒抗原（HLA-DR抗原抗原污染可出现假阳性）污染可出现假阳性） 。l方法：方法：初筛试验初筛试验ELASA ，乳胶凝集法，免疫印迹法，乳胶凝集法，免疫印迹法，斑点免疫渗透法。斑点免疫渗透法。 确认试验确认试验 可选用蛋白印迹试验（可选用蛋白印迹试验（WB），）， PCR法检查法检查HIV病毒病毒DNA。lHIV抗原检测抗原检测 P24抗原（抗原（病毒衣壳蛋白，具群特异性病毒衣壳蛋白，具群特异性）。）。 HIV核酸检测核酸检测 DNA-PCR；RNA-PCR 梅毒血清学检查梅毒血清学检查l是由梅毒螺旋体梅毒亚种所致的一种性是由梅毒螺旋体梅毒亚种所致的一种性传播疾病。传播
31、疾病。l梅毒螺旋体抗体检测：非密螺旋体抗原梅毒螺旋体抗体检测：非密螺旋体抗原试验和密螺旋体抗原试验，前者为筛选试验和密螺旋体抗原试验，前者为筛选试验和治疗效果监测，后者为确诊诊断。试验和治疗效果监测，后者为确诊诊断。l暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查l梅毒螺旋体梅毒螺旋体PCR检测检测甲胎蛋白（甲胎蛋白（AFP）测定测定l参考值参考值 CLIA，RIA，ELASA：血清血清25g/Ll临床意义临床意义l原发性肝癌明显升高，原发性肝癌明显升高，AFP300 g/Ll病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高但升高但常常 300 g/L。l生殖腺胚胎性肿瘤血清生殖腺胚胎
32、性肿瘤血清AFP升高升高l妊娠小扁豆凝集素（妊娠小扁豆凝集素（LCA）结合型结合型AFP25%提示原发性肝癌。提示原发性肝癌。自身抗体检查自身抗体检查l自身免疫性疾病自身免疫性疾病（AID）lAID-器官特异性和非器官特异性（抗原为细胞器官特异性和非器官特异性（抗原为细胞核或胞浆成分）及中间型。核或胞浆成分）及中间型。l抗核抗体（抗核抗体（ANA）：）：是以细胞的核成分为靶抗是以细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称。间接免疫荧光检查有四原的自身抗体的总称。间接免疫荧光检查有四种荧光图谱：均质型（抗种荧光图谱：均质型（抗dsDNA抗体和抗组蛋抗体和抗组蛋白抗体）；周边型（抗白抗体）；周边型（抗d
33、sDNA抗体）；斑点型抗体）；斑点型或颗粒型（抗或颗粒型（抗U1-RNP、抗抗Sm、抗抗Scl-70、抗抗SS-B/La、抗抗SS-A/Ro等）；核仁型（核糖体、等）；核仁型（核糖体、U3-RNP、RNA聚合酶）。聚合酶）。自身抗体检查自身抗体检查l抗核抗体（抗核抗体（ANA）检查：检查：抗各种细胞核成分抗各种细胞核成分（脱氧核糖核蛋白（脱氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核可提取的核抗原抗原-ENA和和RNA等）。等）。l参考值：参考值：IFA法法阴性，血清滴度阴性，血清滴度1：40为阳性为阳性l见于见于SLE（80%100%）、）、MCTD（100%）、）、原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁
34、性肝硬化95%100%）、）、DM （30%50%）、）、RA等。等。自身抗体检查自身抗体检查l抗抗DNA抗体分为：抗体分为：抗抗ds-DNA、抗抗ss-DNA、抗抗z-DNA 抗抗z-DNA 对对SLE有特异性，检出率在有特异性，检出率在90%以上。以上。l抗抗dsDNA抗体测定的临床意义抗体测定的临床意义l见于见于SLE活动期，阳性率活动期，阳性率70%90%。特异性教高。特异性教高（95%）敏感性较低）敏感性较低-诊断与治疗监控。另外参与诊断与治疗监控。另外参与SLE发病机制。发病机制。l抗抗Sm抗体测定：抗体测定：为为SLE所特有，疾病特异度达所特有，疾病特异度达99%，且能反应疾病活
35、动的程度，灵敏度较低，平均为且能反应疾病活动的程度，灵敏度较低，平均为20%。与与CNS、肾病、肺纤维化及心膜炎有一定关系。肾病、肺纤维化及心膜炎有一定关系。自身抗体检查自身抗体检查l抗组蛋白抗体（抗组蛋白抗体（AHA）测定测定l临床意义：临床意义：50%70%的的SLE及及95%以上的药物诱导性以上的药物诱导性狼疮可出现，主要靶抗原为狼疮可出现，主要靶抗原为H2A-H2B DNA复合物，复合物，与与SLE活动有关。活动有关。l抗核糖核蛋白（抗核糖核蛋白（RNP）抗体测定抗体测定l临床意义：临床意义：抗抗U1-RNP抗体主要与抗体主要与MCTD相关，在相关，在30%40%的的SLE病人中可检测
36、到，并常与病人中可检测到，并常与Sm抗体相抗体相伴出现。常与下列临床表现有关，肾脏较少累及、雷伴出现。常与下列临床表现有关，肾脏较少累及、雷诺现象、手肿胀、食管运动不良等。诺现象、手肿胀、食管运动不良等。自身抗体检查自身抗体检查l抗抗SS-A/Ro抗体测定抗体测定l干燥综合征有三种不同的自身抗体：干燥综合征有三种不同的自身抗体：SSA、SSB、SSC（RANA），），前两者仅见于原发性前两者仅见于原发性干燥综合征，后者见于伴类风湿性关节炎的继干燥综合征，后者见于伴类风湿性关节炎的继发性干燥综合征。发性干燥综合征。lSS-A/Ro抗体见于干燥综合征（抗体见于干燥综合征（SjS）（）（灵敏度灵敏度
37、88%96%），），RA（3%10%），），SLE（24%60%）。）。其他疾病：亚急性皮肤其他疾病：亚急性皮肤性狼疮（性狼疮（70%90%），新生儿狼疮（），新生儿狼疮（90%），补），补体体C2/C4缺乏症（缺乏症（90%）。）。 自身抗体检查自身抗体检查l抗抗SSB抗体（抗抗体（抗 La抗体、抗抗体、抗Ha抗体）测定抗体）测定l多数情况下与多数情况下与SS-A/Ro抗体同时出现。干燥综抗体同时出现。干燥综合征（合征（71%87%），新生儿狼疮综合征），新生儿狼疮综合征（75%）伴先天性心脏传导阻滞）伴先天性心脏传导阻滞（30%40%）。）。l抗抗Scl-70抗体测定抗体测定 抗抗Scl-
38、70抗体识别的抗原是抗体识别的抗原是DNA拓扑异构酶拓扑异构酶I，该酶参与超螺旋该酶参与超螺旋DNA的解的解螺旋。螺旋。l临床意义临床意义 特异性地出现于系统性硬化症特异性地出现于系统性硬化症（PPS）的病人，并提示预后不良。的病人，并提示预后不良。自身抗体检查自身抗体检查自身抗体的检测自身抗体的检测抗核抗体谱：抗核抗体谱：ANA滴度达滴度达1：80或以上者需考虑或以上者需考虑CTD的的可能，再进一步检查可能，再进一步检查ds-DNA、抗组蛋白、抗抗组蛋白、抗ENA抗体抗体谱的检查。谱的检查。 结缔组织病的抗核抗体谱结缔组织病的抗核抗体谱SLE： ANA、抗（抗（ds-DNA）、）、 抗组蛋白
39、、抗抗组蛋白、抗Sm 、抗抗SSA 。 pSS： 抗抗SSA、抗抗SSB。 DM/PM ： 抗合成酶（抗合成酶（jo-1，PL-7，PL-12）、）、抗抗SRP、抗抗Mi-2。SSc：ACA（抗着丝点）、抗抗着丝点）、抗Scl-70、抗核仁抗体。抗核仁抗体。MCTD：ANA 、抗抗RNP。自身抗体检查自身抗体检查l类风湿因子（类风湿因子（RF）：）：靶抗原为变性靶抗原为变性IgG的的Fc部分，有部分，有IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五种类型。五种类型。l测定方法：速率散射法或速率比浊法。测定方法：速率散射法或速率比浊法。lRIA，ELISA法法l90%RA患者呈阳性，患者呈阳性，IgA
40、-RF与骨质破坏与骨质破坏有关，早期升高提示病情严重，预后不有关，早期升高提示病情严重，预后不良。良。IgE-RF升高时已属病情晚期。升高时已属病情晚期。自身抗体检查自身抗体检查l抗线粒体抗体（抗线粒体抗体（AMA）l抗心肌抗体（抗心肌抗体（AHA）l抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（ASMA）l抗中性粒细胞胞浆抗体（抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） 抗磷脂抗体：有抗心脂抗体、狼疮抗凝物、假抗磷脂抗体：有抗心脂抗体、狼疮抗凝物、假阳性梅毒反应等。主要出现在阳性梅毒反应等。主要出现在SLE和和pSS，并并与血小板减少、狼疮脑病、血管栓塞、习惯性与血小板减少、狼疮脑病、血管栓塞、习惯性自发性流产有关。自发性流产有关。 HLA-B27
