药品定量分析与分析方法的验证

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1、第三章第三章 药品定量分析与分析方药品定量分析与分析方法验证法验证一、含卤素有机药物的分析一、含卤素有机药物的分析 含卤素有机药物系指药物分子结含卤素有机药物系指药物分子结构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包括某些有机药物的卤酸连者，而不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐盐或氢卤酸盐结构特点：结构特点：CX（一）卤原子的活泼性（一）卤原子的活泼性1. 1. 卤原子与碳原子直接相连，卤原卤原子与碳原子直接相连，卤原子的活泼性和它直接相连的烃基的结子的活泼性和它直接相连的烃基的结构有很大关系构有很大关系（1）乙烯型卤和芳卤）乙烯型卤和芳卤 不活泼不活泼（2）

2、烯丙型卤和苄卤）烯丙型卤和苄卤 活泼活泼（3）卤代烷型）卤代烷型 介于两者之间介于两者之间2. 分子中所含卤原子的个数分子中所含卤原子的个数 分子中所含卤原子的个数越多，分子中所含卤原子的个数越多，活泼性越低，特别是同一碳上含多个活泼性越低，特别是同一碳上含多个卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼性降低更加明显活泼性降低更加明显3. 卤素的种类卤素的种类IBrClF常见的含卤素有机药物常见的含卤素有机药物盐酸胺碘酮盐酸胺碘酮诺氟沙星诺氟沙星醋酸氟轻松醋酸氟轻松（二）含卤素有机药物的分析（二）含卤素有机药物的分析直接回流后测定法直接回流后测定法碱性或酸性还原后

3、测定法碱性或酸性还原后测定法氧瓶燃烧分解后测定法氧瓶燃烧分解后测定法1. 直接回流后测定法直接回流后测定法 本法是将含卤素有机药物溶于适当本法是将含卤素有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加入氢氧化钠溶溶剂（如乙醇）中，加入氢氧化钠溶液（或一定量过量的硝酸银滴定液）液（或一定量过量的硝酸银滴定液）后，加热回流使其水解，将有机结合后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（采用银量法（Volhard法）测定。法）测定。 本法适用于含卤素有机药物结构本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物（如卤中卤素原子结合不牢固的药物（

4、如卤原子和脂肪碳原子相连者）。原子和脂肪碳原子相连者）。 原原理理 三三氯氯叔叔丁丁醇醇在在氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液中中加加热热回回流流水水解解，氯氯元元素素全全部部转转变变成成氯氯化化钠钠，然然后后用用剩剩余余滴滴定定法法，即即于于水水解解液液中中加加硝硝酸酸酸酸化化，再再加加入入定定量量过过量量的的硝硝酸酸银银滴滴定定液液，使使Cl-生生成成AgCl沉沉淀淀，过过量量的的硝硝酸酸银银，以以Fe3+为为指指示示剂剂，用用硫氰酸铵液回滴定。硫氰酸铵液回滴定。 例三氯叔丁醇的测定例三氯叔丁醇的测定 ChP（2000）CCl3- -C(CH3)2- -OH + 4NaOH 回流回流(CH3)2-

5、-CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2ONaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3（淡棕红色）（淡棕红色）(Ksp=1.561010 )(Ksp=1.010- -12 )Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ 测定方法测定方法 取本品约取本品约0.1g，精密称定，精密称定，加加乙醇乙醇5ml溶解后，加溶解后，加20%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液5ml，加热回流，加热回流15min，放冷至室温，加水放冷至室温，加水20ml与硝酸与硝酸5ml，精密加硝酸银滴定液，精密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加

6、，再加邻苯二甲酸二丁酯邻苯二甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁胺指示，密塞，强力振摇后，加硫酸铁胺指示液液2ml，用硫氰酸胺滴定液，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定，滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝硝酸银滴定液酸银滴定液(0.1mol/L)相当于相当于6.216mg的的C4H7Cl3O1/2H2O。反应摩尔比为13T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c滴定液浓度，mol/LM被测物的摩尔质量，g/moln1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1n 2. 碱性或酸性还原后测定法碱性或酸性还原后测

7、定法 本法是将含卤素有机药物在碱性或本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应，使有机流，药物产生还原裂解反应，使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（然后采用银量法（Fajans法）测定。法）测定。 本法适用于测定结构中碘与苯环本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连，且一个苯环上含多个碘原直接相连，且一个苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。子的含卤素有机药物。 （1） 碱性还原后测定法碱性还原后测定法例例 泛影酸的测定泛影酸的测定 ChP (2000) 取本品约取本品约0.

8、4g，精密称定，精密称定，加氢氧化钠溶加氢氧化钠溶液液30ml与锌粉与锌粉1.0g，加热回流，加热回流30min，放冷，冷放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤涤3次，每次次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋，洗液与滤液合并，加冰醋酸酸5ml与曙红钠指示液与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于相当于20.46mg的的C11H9 I 3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+ 11NaOH + Zn回流回流COONaN H

9、2 H2N+ 3NaI + 2CH3COONa+ 2Na2ZnO2 + H2O USP (24)、BP（1998） ChP(2000)收收载载的的胆胆影影酸酸、碘碘番番酸酸、胆胆影影葡葡胺胺、泛泛影影葡葡胺胺、碘碘他他拉拉酸酸等均采用同法测定。等均采用同法测定。 （2）酸性还原后测定法酸性还原后测定法 取本品的干燥品约取本品的干燥品约0.4g，精密称定，精密称定，加锌加锌粉粉1g及冰醋酸及冰醋酸10ml，加热回流，加热回流30min，放冷，放冷，冷凝管用水冷凝管用水30ml洗涤，用脱脂棉过滤，烧瓶与洗涤，用脱脂棉过滤，烧瓶与脱脂棉用水洗涤脱脂棉用水洗涤2次，每次次，每次20ml，洗液与滤液，洗

10、液与滤液合并，加四溴酚酞乙酯指示液合并，加四溴酚酞乙酯指示液1ml ，用硝酸银，用硝酸银滴定液滴定液(0.1mol/L)滴定。终点时黄色沉淀变为绿滴定。终点时黄色沉淀变为绿色。每色。每1ml硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于相当于19.031mg的的C11H12 I 3NO2。例例 碘番酸的测定碘番酸的测定 JP (13)3. 氧瓶燃烧分解后测定法氧瓶燃烧分解后测定法 （1）原理）原理 氧瓶燃烧法：氧瓶燃烧法：将有机药物放入将有机药物放入充满氧充满氧气气的的密闭密闭燃烧瓶中进行燃烧瓶中进行燃烧燃烧，并将燃烧所，并将燃烧所产生的欲测物质产生的欲测物质吸收吸收于适当的吸收液中，于适

11、当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或含量测定析方法进行鉴别、检查或含量测定 适用于含卤素、硫、氮、硒等适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析有机药物的分析 本法特点是简便、快速、破坏完本法特点是简便、快速、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析全，尤其适用于微量样品的分析 （ 2） 仪器与材料仪器与材料 仪器装置仪器装置 燃烧瓶为燃烧瓶为500、1000或或2000ml无色无色、磨口磨口、厚壁厚壁、硬质硬质玻璃锥型瓶；瓶塞玻璃锥型瓶；瓶塞空空心，底部熔封铂丝一根，心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状下端呈螺旋状或网状称样

12、用材料及称样称样用材料及称样 A. 固体样品固体样品 无灰滤纸无灰滤纸 B. 液体样品液体样品 纸袋纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置不含软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹再用无灰滤纸包裹吸收液吸收液 A. 作用：吸收液的作用是将样品经作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态一定的便于测定的价态氧气氧气B. 吸收液的选择吸收液的选择氟氟 水水 氯氯 NaOH水溶液水溶液溴溴 NaOH二

13、氧化硫饱和溶液二氧化硫饱和溶液碘碘 NaOH二氧化硫饱和溶液二氧化硫饱和溶液硫硫 浓浓H2O2 水溶液水溶液 、加、加HCl除除硒硒 硝酸溶液硝酸溶液磷磷 水水（3）操作方法）操作方法燃烧瓶燃烧前的准备燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下的规定加用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧气通入氧气1min，立即用表面皿覆盖瓶口。，立即用表面皿覆盖瓶口。样品的准备样品的准备 取样品适量，精密称定后按规定方法取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。样品的燃

14、烧样品的燃烧 点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。检查或含量测定。根根据据被被燃燃烧烧分分解解的的样样品品量量选选用用适适宜大小

15、的燃烧瓶。宜大小的燃烧瓶。（4）注意事项注意事项（2005）规规定定的的燃燃烧烧瓶瓶体体积积为为500、1000或或2000ml三三种种，采采用用常常量量或或半半微量分析微量分析 待分解样品量待分解样品量 燃烧瓶的体积燃烧瓶的体积 310mg（微量分析）（微量分析） 150250ml 1020mg（半微量分析）（半微量分析）500ml 200mg 1000ml 0.60.7g或更多或更多 2000ml或特殊结或特殊结构的燃烧瓶构的燃烧瓶 正正确确选选用用燃燃烧烧瓶瓶的的目目的的在在于于：样样品品能能在在足足够够的的氧氧气气中中燃燃烧烧分分解解完完全全；有有利利于于将将燃燃烧烧分分解解产产物物较

16、较快快地地吸吸收收到到吸吸收收液液中中；防防止止爆爆炸炸的的可可能能性。性。测定含氟有机药物时，用石英制测定含氟有机药物时，用石英制燃烧瓶燃烧瓶铂丝燃烧时起催化作用铂丝燃烧时起催化作用应同时做空白试验应同时做空白试验燃烧时要注意防爆燃烧时要注意防爆燃烧要完全燃烧要完全燃烧产生的烟雾完全被吸收燃烧产生的烟雾完全被吸收98：140. 氧瓶燃烧法中的装置有A. 磨口硬质玻璃锥形瓶B. 磨口软质玻璃锥形瓶C. 铂丝D. 铁丝E. 铝丝96：133（99x：138）选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品A. 磨口硬质玻璃锥形瓶B. 铂丝C. 普通滤纸D. 氢气 E. 无灰滤纸99：76氧瓶燃烧法测定含氯有机药物

17、时所用的吸收液多数为A. H2O溶液B.浓H2O2 水溶液 C. NaOH溶液D. NaOH二氧化硫饱和溶液E. 硝酸溶液99：134. 氧瓶燃烧法可用于A. 含卤素有机药物的含量测定B. 醚类药物的含量测定C. 检查甾体激素类药物中的氟D. 检查甾体激素类药物中的硒E. 芳酸类药物的含量测定二、含有金属有机药物的分析方法二、含有金属有机药物的分析方法 含金属的有机药物：含金属的有机药物：金属原子不与碳金属原子不与碳原子直接相连，通常为有机酸及酚的原子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物金属盐或配位化合物 如如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁富马酸亚铁

18、有机金属药物有机金属药物：金属原子直接与碳：金属原子直接与碳原子以共价键相连，结合比较牢固原子以共价键相连，结合比较牢固 如如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利酒石酸锑钾酒石酸锑钾硬脂酸镁硬脂酸镁富马酸亚铁富马酸亚铁葡萄糖酸锑钠葡萄糖酸锑钠卡巴胂卡巴胂醋酸苯汞醋酸苯汞汞撒利汞撒利含金属有机药物定量分析前的含金属有机药物定量分析前的处理方法处理方法 不经有机破坏的分析方法不经有机破坏的分析方法 直接测定法直接测定法; ;经水解后测定法经水解后测定法; ;经还原经还原- -汞齐化后测定法汞齐化后测定法 经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法 湿法破坏湿法破坏( (硝酸硝酸- -高氯

19、酸法高氯酸法; ;硝酸硝酸- -硫酸硫酸法法; ;硫酸硫酸- -硫酸盐法等硫酸盐法等););干法破坏干法破坏（一）不经有机破坏的分析方法（一）不经有机破坏的分析方法1. 直接测定法直接测定法 适用于金属原子不直接与碳原子适用于金属原子不直接与碳原子相连的含金属有机药物或某些相连的含金属有机药物或某些CM键键结合不牢固的有机金属药物。结合不牢固的有机金属药物。富马酸亚铁的含量测定富马酸亚铁的含量测定 ChP (2000) 取本品约取本品约0.3g，精密称定，精密称定，加稀硫酸加稀硫酸 15ml，加热溶解后，加热溶解后，放冷，加新沸过的放冷，加新沸过的冷水冷水50ml与邻二氮菲指示液与邻二氮菲指示

20、液2 滴，立即用滴，立即用硫酸铈滴定液硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴硫酸铈滴定液定液(0.1mol/L)相当于相当于16.99mg 。原理原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe3+ Fe2+ + e- -Fe3+红色红色浅蓝色浅蓝色OOCCHOHCCO+Fe2+2. 用硫酸水解后测定法用硫酸水解后测定法例例 硬脂酸镁的测定硬脂酸镁的测定 取本品约取本品约0.1g，精密称定，精密加硫酸，精密称定，精密加硫酸滴定液滴定液(0.05mol/L) 50ml，煮沸至油滴澄清，煮沸至油滴澄清，继续加热继续加

21、热10min，放冷至室温，加甲基橙，放冷至室温，加甲基橙指示液指示液12滴，用氢氧化钠滴定液滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硫酸滴定液硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于相当于2.016mg的的MgO。原理：原理：Mg(C17 H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2 C17 H35COOH2NaOH + H2SO4 Na2SO4 + 2H2O 3. 经还原经还原-汞齐化后测定法汞齐化后测定法 本本法法系系在在酸酸性性或或碱碱性性溶溶液液中中，加加锌锌粉粉、加加热热回回流流，将将药药物物中中有有机机结结合合的的汞汞还还原原析析出出金金属属汞汞，并并与

22、与过过量量的的锌锌生生成成锌锌汞汞齐齐。将将锌锌汞汞齐齐溶溶于于硝硝酸酸后后，选选用用适适当当的的方方法法测测定定汞汞的的含含量量，并并换换算成含汞有机药物的含量。算成含汞有机药物的含量。 （二）经有机破坏的分析方法（二）经有机破坏的分析方法 适用于金属原子与碳原子结合牢适用于金属原子与碳原子结合牢固的有机金属药物。固的有机金属药物。1. 湿法破坏湿法破坏 （1 1） 硝酸硝酸- -高氯酸法高氯酸法 本法适用于血、尿、组织等生物样品本法适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有机金属药物经破坏后，得到的的破坏，有机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一般呈高价态。无机金属离子一般呈高价态。 本法不

23、能用于含氮杂环药物的破坏本法不能用于含氮杂环药物的破坏 （2） 硝酸硝酸- -硫酸法硫酸法 本法适用于大多数有机物质的破坏，本法适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的无机金属离子均为高价态。破坏得到的无机金属离子均为高价态。 本法不能用于含碱土金属有机药物的本法不能用于含碱土金属有机药物的破坏破坏 （3） 硫酸硫酸- -硫酸盐法硫酸盐法 本法是往样品中加入浓硫酸作氧化剂，本法是往样品中加入浓硫酸作氧化剂，加入硫酸盐提高硫酸的沸点，增强硫酸的加入硫酸盐提高硫酸的沸点，增强硫酸的氧化破坏能力，且防止硫酸的分解损失。氧化破坏能力，且防止硫酸的分解损失。 本法常用于含砷或锑有机药物的破坏，本法常用于含

24、砷或锑有机药物的破坏，破坏得到的无机金属离子多为低价态。破坏得到的无机金属离子多为低价态。 （4） 其它湿法其它湿法 硝酸硝酸硫酸硫酸高氯酸法高氯酸法 硫酸硫酸氧化剂法（过氧化氢法、高锰氧化剂法（过氧化氢法、高锰酸钾）酸钾） 破坏后，金属呈高价态破坏后，金属呈高价态2. 干法破坏干法破坏 适用于湿法不易破坏完全的有适用于湿法不易破坏完全的有机物以及某些不能用硫酸进行破坏机物以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。不适用于含易挥发性的有机药物。不适用于含易挥发性金属（如汞、砷等）有机药物的破金属（如汞、砷等）有机药物的破坏坏注意事项：注意事项：（1）加热或灼烧时，应控制温度在）加热或灼烧时，应控制

25、温度在420以下以下（2）一定要灰化完全）一定要灰化完全（3）经本法破坏后，所得灰分往往不）经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但不要轻易弃去易溶解，但不要轻易弃去第二节第二节 定量分析方法的特点定量分析方法的特点一、容量分析法的特点一、容量分析法的特点 容量分析法是将已知浓度的滴定液由滴定管容量分析法是将已知浓度的滴定液由滴定管滴加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与滴加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化学计量反应完全为止，然后根据被测药物按化学计量反应完全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗的体积，就可以计算被测滴定液的浓度和消耗的体积，就可以计算被测药物的含量。药物的含量。 特

26、点特点：操作简便、快速、比较准确，所用仪器：操作简便、快速、比较准确，所用仪器普通易得，在药品检验工作中具有很大的实用普通易得，在药品检验工作中具有很大的实用价值价值二、光谱分析法二、光谱分析法（一）、紫外可见分光光度法特点（一）、紫外可见分光光度法特点 原理：很多物质分子对波长原理：很多物质分子对波长200nm760nm 的紫外光有吸收特征。的紫外光有吸收特征。 特点：灵敏度高，可达特点：灵敏度高，可达10-4g/ml10-7g/ml 准确度高，相对误差为准确度高，相对误差为25 仪器价格较低廉，操作简单，易于仪器价格较低廉，操作简单，易于 普及。普及。（二）、荧光分析法 某些物质受到紫外光

27、或可见光照射激发后能发射出比激光波长较长的荧光。 特点：1、灵敏度高（10-10g/ml10-12g/ml ）， 紫外（10-4g/ml10-7g/ml） 2、样品的浓度比较低（1g/L） 3、必须做空白试验 4、对易被光分解的样品，用基准溶液代替对照品溶液校正仪器的灵敏度。 5、为扩大荧光分析法的应用范围，应采用荧光衍生试剂。 6、取样少，方法快速，在药物分析领域中是重要的分析手段。三、色谱分析法三、色谱分析法色谱分析法（又称层析法）根据基分离原理色谱分析法（又称层析法）根据基分离原理可分为：吸附色谱、分离色谱、离子交换色可分为：吸附色谱、分离色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。谱与排阻色谱等。

28、根据分离方法分为：纸色谱法、薄层色谱、根据分离方法分为：纸色谱法、薄层色谱、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法。柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法。色谱分析法是一种分离分析方法，是分析混色谱分析法是一种分离分析方法，是分析混合物的最有力手段。具有高灵敏度（可达合物的最有力手段。具有高灵敏度（可达 10-12g/ml10-15g/ml ）、高选择性、高效能、高）、高选择性、高效能、高速度和应用广泛等特点速度和应用广泛等特点 。第三节 药品质量标准分析方法验证 一、目的 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草和修订说明中。 二、用途（一）药品质量标准

29、起草时，分析方法需经验证。（二）药物合成方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。三、需验证的分析项目1. 鉴别试验；2. 杂质定量或限度检查；3. 原料或制剂中有效成分含量测定；4. 制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；5. 溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。 验证内容有：准确度、精密度验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性围和耐用性四、验证内容 （一）（一） 准确度（准确度（accuracy） 准确度是指用该方法测定的结

30、果与准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。收率表示。 测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。 回收试验 空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M 加样回收试验 已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M 数据要求数据要求 规定的范围内，至少规定的范围内，至少用用9次测定结果评价，如制备三个不同次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。浓度样品各测三次。1. 含量测定方法的准确度含量测定方法的准确度 原料药可原料药可用已知纯度的对照

31、品或样用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。行比较。 制制剂剂可可用用含含己己知知量量被被测测物物的的各各组组分分混混合合物物进进行行测测定定，即即采采用用在在空空白白辅辅料中加入原料药对照品的方法。料中加入原料药对照品的方法。 如如不不能能得得到到制制剂剂的的全全部部组组分分，可可向向制制剂剂中中加加入入已已知知量量的的被被测测物物进进行行测测定定，或或与与另另一一个个已已建建立立准准确确度度的的方方法法比比较较结果。结果。 中药分析的准确度一般用加样回中药分析的准确度一般

32、用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在收试验衡量。中药回收率一般要求在95105%范围内，有些方法操作步骤范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在繁多时，可要求在90110%范围内。范围内。RSD一般在一般在3%以内。以内。 2杂质定量测定的准确度杂质定量测定的准确度 可可向向原原料料药药或或制制剂剂中中加加入入已已知知量量杂杂质质进进行行测测定定。如如果果不不能能得得到到杂杂质质或或降降解解产产物物，可可用用本本法法测测定定结结果果与与另另一一成成熟的方法进行比较。熟的方法进行比较。 （二）（二）精密度（精密度（precision） 精密度精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，是指在规定

33、条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（度。用偏差（d）、标准偏差）、标准偏差(SD)、相、相对标准偏差对标准偏差(RSD)（变异系数，（变异系数，CV）表）表示。示。 偏差（d）：测量值与平均值之差标准（偏）差（SD或S）相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV） 1. 重复性重复性 在相同条件下，由同一个在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用定的范围内，至少用9次测定结果评价，次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把如制备三个不同浓度样品各测

34、三次或把被测物浓度当作被测物浓度当作100%，至少测，至少测6次进行次进行评价。评价。 2. 中间精密度中间精密度 同一实验室，不同时同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。考察随机变动因素的影响。的精密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备不同设备 3. 重现性重现性 不同实验室，不同分析人不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时通过协

35、同检验得如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果，协同检验的过程、重现出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。性结果均应记载在起草说明中。 （三）专属性（三）专属性（specificity） 指有其指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。度的度量。 （四）

36、（四） 检测限检测限（limit of detection， LOD） 检测限系指试样中被测物能被检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。是限度试验参数，检测出的最低量。是限度试验参数，无需定量测定。常用无需定量测定。常用%、ppm、ppb表示。表示。1非仪器分析目视法非仪器分析目视法 用用已已知知浓浓度度的的被被测测物物，试试验验出出能能被被可靠地检测出的最低浓度或量。可靠地检测出的最低浓度或量。 2信噪比法信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信试样测出的信号与空白样

37、品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比的最低浓度或量。一般以信噪比（S/N）3 1或或2 1时的相应浓度或注时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。入仪器的量确定检测限。3数据要求数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。测限结果。 （五）定量限（1imit of quantitation，LOQ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度。常用%、ppm、ppb表示。 常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为101时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所

38、测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定。 （六）（六） 线性线性 在设计的范围内，测试结果与试样在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。中被测物浓度直接呈正比关系的程度。 数据要求：应列出回归方程、相关数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。系数和线性图。（七）范围（七）范围 指达到一定精密度、准确度和线性指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。或量的区间。（八）（八） 耐用性耐用性 指测定条件稍有变动时，结指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依果不受影

39、响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。况下实验结果重现性的尺度。 （九）应用（九）应用 1. 鉴鉴别别试试验验除除专专属属性性、检检测测限限、耐耐用用性性外，其它都不要求。外，其它都不要求。 2. 杂质的限量检查除杂质的限量检查除专属性专属性、检测检测限限、耐用性外耐用性外，其它都不要求。杂质的，其它都不要求。杂质的定量测定除定量测定除检测限检测限外，其它都要求。外，其它都要求。 3. 含量测定及溶出量测定除含量测定及溶出量测定除检测限检测限、定量限定量限外，其它都要求。外，其它都要求。（十）各种含量

40、测定方法对效能指标（十）各种含量测定方法对效能指标的要求的要求 1. 1. 容量分析法：用原料药精制品容量分析法：用原料药精制品( (含量含量99.599.5) )或对照品考察方法的精或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于密度，相对标准差一般应不大于0.20.2；进行回收率试验。进行回收率试验。回收率一般在回收率一般在99.799.7100.3100.3之间之间。 2. 2. UV法法：用适当用适当浓浓度的精制品度的精制品进进行行测测定，其定，其RSD一般不大于一般不大于1。制。制剂剂的的测定测定，回收率一般，回收率一般应应在在98102之之间间。 线性：线性：吸光度吸光度A一般在一

41、般在0.20.7，浓浓度点度点n5。用。用浓浓度度c对对A作作线线性回性回归归处处理，得一直理，得一直线线方程，方程，r应应大于大于0.999(n5)，方程的截距，方程的截距应应近于零。近于零。 3. HPLC法：要求法：要求RSD2，回收回收率率98102之间。之间。 线性范围：用精制品配制一系列标线性范围：用精制品配制一系列标准溶液，浓度点准溶液，浓度点n应为应为57，用浓度，用浓度c对峰高对峰高h或被测物的响应值之比进行或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，回归处理，建立回归方程，r应大于应大于0.999，截距应趋于零。，截距应趋于零。 专属性：要考查辅料、有关物质专属性：要考

42、查辅料、有关物质或降解产物对主药的色谱峰是否有干或降解产物对主药的色谱峰是否有干扰，如有干扰应设法排除扰，如有干扰应设法排除99：73. 精密度是指（ ） A. 测得的测量值与真值接近的程度 B. 测得的一组测量值彼此符合的程度 C. 表示该法测量的正确性 D. 在各种正常试验条件下，对同一 样品分析所得结果的准确程度 E. 对供试物准确而专属的测定能力96：138在药物分析中，精密度是表示该法的（ ） A. 测量值与真值接近程度 B. 一组测量值彼此符合程度 C. 正确性 D. 重现性 E. 专属性 95：106110应要求的效能指标： A. 检测限 B. 定量限 C. 两者均要求 D. 两

43、者均不要求95：106. 含量测定方法评估（D）95：107. 杂质限量检查（A）95：108. 杂质定量测定（B）95：109. 溶出度测定（D）95：110. 中间体含量测定（D）97：126药物杂质限量检查所要求的效能指标为（ ） A. 准确度 B. 精密度 C. 专属性 D. 检测限 E. 耐用性 98：138评价药物分析所用的测定方法的效能指标有（ ） A. 含量均匀度 B. 精密度 C. 准确度 D. 耐用性 E. 溶出度例例15A精密度 B定量限C两者皆是 D两者皆不是1. 某法测得一组测量值间彼此符合程度（A）2. 测量值和真值接近的程度（D）3. 测定结果的重现性（A）4.可

44、定量测得被测药物的最低水平参数（B）5. 药物分析方法的效能指标（C） 例例6. 相对标准差表示（相对标准差表示（ ）A. 准确度B. 回收率C. 精密度D. 纯净度E. 检测限例例7. 精密度的一般表示方法有精密度的一般表示方法有( )A. 相对标准偏偏差B. 相对平均偏差C. 相对误差D. 绝对误差E. 标准偏偏差 例例8. 检测限的表示方法有（检测限的表示方法有（ ）A. 百分数 B. ppm C. ppbD. g E. ng例例9. 用用信信噪噪比比法法表表示示检检测测限限时时，信信噪噪比一般应为（比一般应为（ ）A. 11 B. 21 C. 31D. 41 E. 51例例10. 用用碘碘量量法法测测定定维维生生素素C原原料料药药时，要求碘量法应具备（时，要求碘量法应具备（ ）A. 专属性 B. 定量限C. 精密度 D. 耐用性E. 检测限例例11. 测测定定药药物物片片剂剂的的溶溶出出度度或或释释放放度度时，对所用测定方法应要求时，对所用测定方法应要求( )A. 精密度 B. 定量限C. 耐用性 D. 回收率E. 检测限 例例12. 药药物物鉴鉴别别试试验验所所要要求求的的效效能能指指标为（标为（ ）A. 准确度B. 精密度C. 专属性D. 检测限E. 耐用性