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1、嗜酸性粒细胞计数嗜酸性粒细胞计数P36P36临床检验基础教研室程杨艳嗜酸粒细胞起源于骨髓多能造血干细胞，为髓系干细胞分化而来的嗜酸粒细胞祖细胞（CFU-EO）所产生。 功能：（1）微弱的吞噬作用，基本无杀菌力；（2）主要作用是限制过敏反应的作用： 抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞； 吞噬其释放颗粒； 分泌组胺酶破坏组胺；（3）参与蠕虫的免疫反应。嗜酸性粒细胞的趋化因子其来源嗜酸性粒细胞的趋化因子其来源从嗜碱性粒细胞和肥大细胞来源的组胺；从补体来的C3aC5a；从致敏淋巴细胞来的嗜酸性粒细胞的趋化因子；从寄生虫来的嗜酸性粒细胞的趋化因子；某些细菌来的嗜酸性粒细胞的趋化因子； 从肿瘤来的嗜酸性粒细胞的趋
2、化因子。 趋化因子趋化因子EE嗜酸性粒细胞绝对数=WBCE% 其中E%（嗜酸性粒细胞分类的比值）不准，进推算的绝对值误差较大；故为达到准确计数嗜酸性粒细胞的目的，须做嗜酸性粒细胞直接计数。 原理原理 用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时使红细胞和大部分其他白细胞被破坏，并将嗜酸粒细胞着色，充入计数板，低倍镜下计数2个计数池共10个大方格内的嗜酸粒细胞数，经换算求得每升血液中的嗜酸粒细胞数。 器材器材 采血针、干棉球、75%酒精棉球 试管、吸量管 计数板、显微镜 试剂试剂 特点：为低渗溶液，可使红、白细胞溶解破裂；含对E的保护剂，如乙醇、乙二醇、丙酮；并使E颗粒染色而被识别。下列试剂任选一
3、种: 1.伊红-丙酮稀释液 2.溴甲酚紫稀释液 3.Hinkelman稀释液 4.乙醇-伊红稀释液 5.皂素-甘油稀释液 6.固绿稀释液 操作操作 0.38ml稀释液20l血混匀RBC溶解后混匀充池（2个）静置2-5min镜下计数10个大方格E的数目。 计算计算 E/L=10大方格E的数20106 =0.02N109/L 参考值参考值 0.05-0.5109/L 注意事项注意事项 1.本实验必须在1h内完成，否则细胞被破坏，结果偏低；2.及时混匀，不能过分振荡，以免细胞破坏；3.统一采血时间，以免受生理变化；4.注意与N区别，以免结果偏高；（N着色浅，颗粒小）5.含乙醇、丙酮等保护剂会挥发，应
4、注意其变化；6.溴甲酚紫在酸性或中性时为橙黄色，在碱性显蓝，故器具要防酸。 方法学评价方法学评价 1显微镜计数法 所需设备简单，简便易行； 求得的嗜酸粒细胞绝对值，比用白细胞总数和分类计数间接推算出的来的准确。 但重复性差，精确性不如血液分析仪法。 所采用的稀释液多种，其优缺点见表2-472血液分析仪法 五分类血液分析仪是目前最有效的嗜酸粒细胞计数的筛检方法， 分析速度快，准确性较高。 但仪器昂贵；当仪器提示嗜酸粒细胞增多伴直方图或散点图异常时，应采用显微镜直接计数法复检。 临床意义临床意义 1.生理变化 肾上腺皮质激素的作用: 阻止骨髓释放E; 使血中E到组织中去。1）劳动、寒冷、饥饿、各精
5、神刺激等 交感神经兴奋ACTH肾上腺皮质激素 E。 2）年龄： 5岁以下 （0-0.8）109/L 5-15岁 （0-0.5）109/L3）日间变化： 上午波动大，下午较恒定。 与糖皮质激素脉冲式分泌有关。2.病理变化 1）增高：轻度 （0.5-1.5）109/L 中度 （1.5-5）109/L 重度 5109/L 见于： 寄生虫病：可达10%或更多。变态反应性疾病：支气管哮喘、药物过敏反应、荨麻疹。某些皮肤病：如湿疹、银屑病等。血液病：如慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤、脾切除术后等；嗜酸性粒细胞白血病；霍奇金病。某些恶性肿瘤：如肺癌伴嗜酸性粒细胞增高。某些传染病：感染期嗜酸
6、性粒细胞常减低，猩红热急性期嗜酸性粒细胞增高。恢复期暂时性增高。2）减少： 长期使用肾上腺皮质激素； 急性传染病早期：如伤寒、副伤寒； 大手术、烧伤。3）其他临床应用 (1)观察急性传染病的预后 (2)观察手术和烧伤患者的预后 (3)测定肾上腺皮质功能和垂体前叶功能：促肾上腺皮质激素（ACTH）使肾上腺皮质产生肾上腺皮质激素，造成嗜酸性粒细胞减低。直接刺激肾上腺皮质：嗜酸性粒细胞直接计数后，随即肌注或静脉滴注ACTH 25mg。 间接刺激肾上腺皮质：注射0.1%肾上腺素0.5ml，刺激垂体前叶分泌ACTH 。结果判断：正常情况：比注射前应减低50%以上。肾上腺皮质功能正常，而垂体前叶功能不良者：则直接刺激时减低50%以上，间接刺激时不减低或减低很少。垂体功能亢进：直接和间接刺激均可减低80%l00%。垂体前叶功能正常，而肾上腺皮质功能不良者：直接和间接刺激减低均不到50%。艾迪生(Addison)病，平均仅减低4%。
