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1、8.3 吸光光度法的灵敏度与准确度吸光光度法的灵敏度与准确度8.3.1 灵敏度的表示方法灵敏度的表示方法 1.摩尔吸光系数摩尔吸光系数 ( ) 2. A= b c =A/bc (Lmol-1cm-1) 越大越大, 灵敏度越高灵敏度越高: 105为高灵敏度为高灵敏度.1 2. Sandell(桑德尔桑德尔)灵敏度灵敏度 (S)定义：定义：截面积为截面积为1cm2的液层在一定波长或波段处，的液层在一定波长或波段处，测得吸光度为测得吸光度为0.001时所含物质的量。时所含物质的量。用用S表示，单位表示，单位：gcm-2A= bc=0.001 bc 0.001/ S小小灵敏度高灵敏度高; ; 相同的物
2、质相同的物质, M小则灵敏度高小则灵敏度高.变换单位变换单位:bcmcmol/L=bcM106 g/1000cm22例例1 邻二氮菲光度法测铁邻二氮菲光度法测铁 (Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38 计算计算 、S 和和解：解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.010-3/55.85 =1.810-5(molL-1)S=M/ =55.85/1.1104=0.0051 ( g g/cm2)或或3 c =1.0mg/L=1.010-3 g /1000mL = 1.010-4 g/100mL4例例2 比较用以下两种方法测比较用以下两种方法测Fe的灵敏度的灵敏度.B. 用用4,7
3、-二苯基邻二氮菲光度法测定铁二苯基邻二氮菲光度法测定铁5332.2104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(2.2104)0.0025 (gcm-2)B方法比方法比A方法的灵敏度高方法的灵敏度高.A. 用邻二氮菲光度法测定铁时，用邻二氮菲光度法测定铁时，5081.1104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(1.1104)0.0051 (gcm-2)58.3.2 准确度准确度仪器测量误差仪器测量误差100806040200T/% c1 c2 c3 T T T-透光率读数误差透光率读数误差 c c1c1 c2c2 c3c310 4;选择性好选择性好;显色剂在测定波长处无明显吸收显色
4、剂在测定波长处无明显吸收, 对照性好对照性好, max 60 nm;反应生成的有色化合物反应生成的有色化合物组成恒定，稳定组成恒定，稳定;显色条件易于控制，显色条件易于控制，重现性好重现性好.118.4.2 显色条件的确定显色条件的确定c(R)c(R)c(R)1. 显色剂用量显色剂用量（c(M)、pH一定）一定）Mo(SCN)32+ 浅红浅红Mo(SCN)5 橙红橙红Mo(SCN)6- 浅红浅红Fe(SCN)n3-n122. 显色反应酸度显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定）一定）pH1pH * *n * * n *30跃迁跃迁 max(nm) *150(200)n *200100300n
5、*20080010100 *200104190CH2CH2 CH2135 （CC）CH3CH2CH3135 （CC）CH3CH3125 （CH）CH4max（nm）饱和烃类饱和烃类 * *跃迁跃迁( (饱和烃类饱和烃类) )（作溶剂）（作溶剂）31 max(nm) max(nm) H2O1671480CH3OCH31842520CH3OH183150CH3NH2215600CH3Cl173200(CH3)2NH220100CH3Br204200(CH3)3N227900CH3I258365 n * 跃迁（含具跃迁（含具n电子的杂原子）电子的杂原子）32n * 跃迁跃迁（带孤对电子的杂原子与其他
6、（带孤对电子的杂原子与其他 键共轭）键共轭）280300饱和醛酮饱和醛酮1000( n *)16( n *)186280CH3COCH3异辛烷异辛烷22280CH3NO2EtOH5339CH3NNCH3H2O60214CH3CONH2EtOH41204CH3COOH max(nm）介质介质33* 跃迁（不饱和烃类跃迁（不饱和烃类) )6000173CH三三CH14000175CH2CH2 max(nm）* 跃迁跃迁的的 max短，短， 大大, n * 跃迁跃迁的的 max长，长， 小小.34电荷迁移跃迁（荷移光谱）电荷迁移跃迁（荷移光谱）特点：谱带宽特点：谱带宽, ,吸收强度大吸收强度大, ,
7、maxmax处的处的可大于可大于10104 4 。Fe3SCN- Fe2SCN （分子内氧化还原）（分子内氧化还原）h RN1R2Rh DADA-e e给予体给予体 e e接受体接受体e e给予体给予体e e接受体接受体N1R2-+h CROCRO-+h 358.6.2 有机分子中的生色团与助色团有机分子中的生色团与助色团严格地说，只有含有不饱和基团或孤对电子的基团，严格地说，只有含有不饱和基团或孤对电子的基团，才是才是生色团生色团（ n*， *）CC，CH ， * 150nmn*， *:CO CCO:n*， *CO，CSn* ,* 200nm:CN，CCl：:CC ,C C * ,* 200
8、nm （孤立双键（孤立双键 200nm）生色团生色团类类 型型36不饱和基团助色效应大不饱和基团助色效应大256 261 264 282 320 276(K带带) 苯环苯环B带带max(nm)CH3ClCH=CH2C CH3O常见常见助色团助色团及其助色效应及其助色效应(红移红移 max增大增大):FCH3ClBrOHOCH3NH2NHCH3 N(CH3)2 NHC6H5 max蓝移蓝移水水乙醇乙醇己烷己烷A 51溶剂极性增大溶剂极性增大， * 吸收吸收红移红移CH3溶剂效应溶剂效应无溶剂效应无溶剂效应 E1 E2 E2 E1 max红移红移 异亚丙基丙酮异亚丙基丙酮例：例： 异亚丙异亚丙基丙
9、酮基丙酮305309315329n *243237238230 *水水甲醇甲醇氯仿氯仿正己烷正己烷溶剂溶剂极性增大极性增大 max蓝移蓝移 max红移红移52溶剂极性影响的结论溶剂极性影响的结论:1. 非极性溶剂可见精细结构非极性溶剂可见精细结构;2. pH影响分子构型影响分子构型, 因此影响物质对光的吸收因此影响物质对光的吸收.3. 利用溶剂效应可区别利用溶剂效应可区别 *(红移红移) 还是还是 n *(蓝移蓝移);4. 比较光谱时比较光谱时, 溶剂要相同溶剂要相同.53常用溶剂的光学透明区常用溶剂的光学透明区CHCl3245乙醚乙醚210苯苯280环己烷环己烷210己烷己烷210CCl4265正丁醇正丁醇210庚烷庚烷210DMF270二氯甲烷二氯甲烷235甲醇甲醇215丙酮丙酮330二氧六环二氧六环235异辛烷异辛烷210吡啶吡啶303乙醇乙醇210水水191硝基甲烷硝基甲烷380大于以上波长时使用大于以上波长时使用对溶剂的要求对溶剂的要求1. 低极性低极性 2. 易溶解被测物易溶解被测物3. 稳定稳定 4. 在样品的吸收光谱区无明显吸收在样品的吸收光谱区无明显吸收54习习 题题8.5 8.7 8.8 8.9 8.1155
