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1、 实验七 果蝇的三点测交实验七 果蝇的三点测交n一、实验目的 1.了解绘制遗传学图的原理和方法 2.学习实验结果的数据处理n二、实验材料 野生型果蝇: 红眼 长翅 直刚毛 (+ + +) 三突变果蝇: 白眼 小翅 焦刚毛 (w m sn)三、实验说明1.白眼 小翅 焦刚毛基因(w m sn)均位于X染色体上2.上述三突变果蝇和野生型的正交和反交结果不同3.利用三突变果蝇为母本和野生型果蝇为父本的F2群体进行本实验 四、实验步骤n1. 收集三隐性个体的处女果蝇, 培养在培养瓶里,每瓶5-6只。n2. 杂交:挑选野生型雄果蝇放入处女果蝇中杂交,每瓶5-6只。贴好标签放入25度中培养。n3. 7-8
2、天后出现蛹,倒出亲本。n4. 再4-5天后,蛹孵化出子一代(F1)成蝇,可以观察到F1雌果蝇全部都是野生型表型,雄果蝇都是三隐性。n5. 从F1代中选取20-30对果蝇,放到新的培养瓶中继续杂交。每瓶5-6对。n6. 7-8天后出现蛹,倒出亲本。n7. 再4-5天后,蛹孵化出子二代(F2)成蝇,开始观察。n8. 把子二代(F2)成蝇倒出麻醉,放在白瓷板上,用实体显微镜检查眼色,翅膀,刚毛。各类果蝇分别计数。检查过的果蝇倒掉。过两天后再检查第二批,连续检查8-10天,即3-4次。在25度下,自第一批果蝇孵化出10天内可靠的,再迟时F3代可能出现了。至少要求统计250只果蝇。n按下列顺序填表和计算
3、(所列数字系列举说明)。n先写出所得的F2代八种表型,填上观察数,计算总数。 2.综合全班的F2成蝇的观察记载结果.n3.根据全班的实验结果,进行三点测验遗 传分析.n 每个人整理自己的F2成蝇的观察记载结果. 三点测交实验中观察的记录 测交后代的表型观察数重 组 发 生 在m-sn3 m-wsn3- wsn3 w m+ + + w +sn3 + msn3 + + w m+ + msn3 w +总 计37228595974491521000-+151 -+-+335 - -+-200重 组 值15.1%33.5%20%六、实验报告n1.个人及全班的F2成蝇的三点测交实验观察记载结果(列表记载)
4、 测交后代的表型观察数重 组 发 生 在m-sn3 m-wsn3- wsn3 w m+ + + w +sn3 + msn3 + + w m+ + msn3 w +总 计 / / / / / / / /-+ / -+-+ / - -+- /重 组 值2.根据全班实验结果进行三点测验分析计算基因间的重组值,确定相关基因的位置作出连锁图(m-w 间重组值小于m-sn3间和sn3- w 间重组值之和,这是什么原因?) 计算双交换值:m-w 间重组值小于m-sn3间和sn3- w 间重组值之和,这是因为两个相距较远的基因发生了双交换的结果。而这种发生了双交换的果蝇在基因顺序尚未揭晓时,也就是说,当遗传学
5、图还没有画出时,是难以确定的。遗传学图画出后 ,可以分析出m-w 间发生双交换能产生两种表型的果蝇:m+w小翅,直刚毛,白眼和+sn3+长翅,卷刚毛,红眼。 这两种果蝇共有8只在计算m-w 间重组值时没有被计算进去,两个相距较远的基因的重组值被低估了,低估的是 8/1000*100%=0.8%。因为是双交换,所以乘以2得0.8%*2=1.6%,这就是矫正值。画出图距。1.计算并发率和干涉:如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换,那么预期的两个双交换的频率应该等于2个单交换频率的乘积。但实际上观察到的双交换频率往往低于预期值。因为每发生一次单交换它邻近也发生一次交换的机会就减少一些,这叫做干涉。一般用并发率来表示干涉的大小。 注意要点:n母本必须是处女蝇n观察记载实验结果必须客观准确,避免随意 性n统计群体不宜太小