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1、（一（一) 化学元素化学元素一、细菌细胞的化学组成一、细菌细胞的化学组成 碳、氢、氮、氧、磷、硫等碳、氢、氮、氧、磷、硫等有机物元素：有机物元素： 无机离子：无机离子： 钾、钠、铁、镁、钙等钾、钠、铁、镁、钙等 （二）（二） 化学成分化学成分 占细胞总重量占细胞总重量70%-90% 主要的固形成分，占主要的固形成分，占40%-80% 水水:蛋白质：蛋白质： 核酸：核酸：糖类，脂类和维生素糖类，脂类和维生素DNA：3%，RNA：10%二、细菌需要的营养物质及生理功能二、细菌需要的营养物质及生理功能碳源碳源氮源氮源无机盐无机盐生长因子生长因子水水三、吸收营养物质的方式三、吸收营养物质的方式 略。略
2、。四、细菌的营养类型四、细菌的营养类型略。略。五五 细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖3、PH： 一般最适为一般最适为7.0-7.62、温度：一般最适温度为、温度：一般最适温度为371、营养物质、营养物质4、对气体要求、对气体要求 5、渗透压：嗜盐菌需在高浓度的、渗透压：嗜盐菌需在高浓度的NaCl（3%）生长生长（一）（一） 生长繁殖的条件生长繁殖的条件对对O2要求：专性需氧菌要求：专性需氧菌 微需氧菌微需氧菌 耐氧菌耐氧菌 兼性厌氧菌兼性厌氧菌 专性厌氧菌专性厌氧菌对对CO2要求：要求： 5% CO2水水碳源碳源氮源氮源无机盐无机盐生长因子生长因子 细菌的繁殖方式细菌的繁殖方式 二分裂法二分裂法生
3、长方式：生长方式：链球菌链球菌八八叠叠球球菌菌葡萄球菌葡萄球菌代时：单个细胞完成一次分裂所需要的时间代时：单个细胞完成一次分裂所需要的时间大多数细菌的代时约大多数细菌的代时约2030min2030min速度速度六、细菌的人工培养六、细菌的人工培养（一）细菌培养的条件（一）细菌培养的条件充足的营养物质充足的营养物质 合适的酸碱度合适的酸碱度 合适气体合适气体 合适温度合适温度 （二）培养基（二）培养基 人工配制的满足细菌及其他微生物生长人工配制的满足细菌及其他微生物生长繁殖和（或）积累代谢产物的营养基质繁殖和（或）积累代谢产物的营养基质根据物理性状类分类根据物理性状类分类液体培养基：用于增菌。液
4、体培养基：用于增菌。半固体培养基：检测细菌的动力和短期保存菌种。半固体培养基：检测细菌的动力和短期保存菌种。固体培养基：用于分离、纯化和保存菌种，做病固体培养基：用于分离、纯化和保存菌种，做病原学诊断和产生菌苗用于预防。原学诊断和产生菌苗用于预防。主要用于鉴定。1 基础培养基基础培养基5553 选择培养基选择培养基 4 鉴别培养基鉴别培养基2 营养培养基营养培养基5 厌氧培养基厌氧培养基根据营养和用途分类根据营养和用途分类 （三）细菌的培养方法及生长现象（三）细菌的培养方法及生长现象 1.1.固体培养法固体培养法菌落：单个细胞在固体培养基表面经过培养形成肉眼可见的微生物集团。菌落照片菌落照片菌
5、落菌落的特征：的特征：（包括大小、形状、颜色、边缘、质地、透明包括大小、形状、颜色、边缘、质地、透明度、光泽、表面、湿润度等）度、光泽、表面、湿润度等）菌苔：菌苔：菌苔：微生物密集生长所形成的。其作用是可用来保存菌种。 固体培养基中固体培养基中菌菌落落R型型菌落（菌落（S型）型） 菌苔菌苔表面光滑、湿润、边缘整表面光滑、湿润、边缘整齐（新分离细菌）齐（新分离细菌）表面粗糙、干燥、表面表面粗糙、干燥、表面皱纹或颗粒状、边缘不皱纹或颗粒状、边缘不齐（陈旧菌落）齐（陈旧菌落）S光滑型菌落光滑型菌落R粗糙型菌落粗糙型菌落粘稠、有光泽、似水粘稠、有光泽、似水 珠样，多见有厚荚膜珠样，多见有厚荚膜或丰富粘
6、液层的细菌或丰富粘液层的细菌M粘液型菌落粘液型菌落菌落类型菌落类型 液体培养基中液体培养基中 沉沉淀淀生生长长混混浊浊生生长长表表面面生生长长2.2.液体培养法液体培养法半半固固体体中中 混浊生长混浊生长沿穿刺线生长沿穿刺线生长有鞭毛有鞭毛细菌细菌无鞭毛无鞭毛细菌细菌3.半固体培养法半固体培养法4 4、培养方法、培养方法 取检菌标本或细菌接种于适宜培养基取检菌标本或细菌接种于适宜培养基37培养培养箱箱18-24h大量细菌生长繁殖大量细菌生长繁殖分离培养分离培养纯培养纯培养分分离离培培养养：将将培培养养物物划划线线接接种种在在固固体体培培养养基基表表面面，使使原原混混杂杂的的细细菌菌在在固固体体
7、培培养养基基表表面面散散开开，形形成成分分离的单个菌落。离的单个菌落。纯纯培培养养：从从固固体体培培养养基基中中挑挑出出一一菌菌落落，移移种种到到另另一一培培养养基基中中，此此时时生生长长出出来来的的细细菌菌称称纯纯种种，这这种种培养方法为纯培养。培养方法为纯培养。如如果果某某一一培培养养物物是是由由单单一一微微生生物物细细胞胞繁繁殖殖产产生生的的，就称之为该微生物的纯培养物（就称之为该微生物的纯培养物（pure culture)。 接种工具接种工具（四）细菌的生长繁殖规律和生长曲线（四）细菌的生长繁殖规律和生长曲线生长曲线：细菌在有限的体系中的生长成为群体生长，具有一定生长曲线：细菌在有限的
8、体系中的生长成为群体生长，具有一定的规律性，描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律的曲线的规律性，描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律的曲线称之为生长曲线。称之为生长曲线。将少量单细胞的纯培养，接种到一恒定容积的液体培养基中，在将少量单细胞的纯培养，接种到一恒定容积的液体培养基中，在适宜条件下培养，定时取样，测菌量。以培养时间为横座标，培适宜条件下培养，定时取样，测菌量。以培养时间为横座标，培养物中活菌数的对数为纵座标，可绘制为生长曲线，根据其将细养物中活菌数的对数为纵座标，可绘制为生长曲线，根据其将细菌的群体生长繁殖分为迟缓期、对数期、稳定期和衰退期菌的群体生长繁殖分为迟缓期、对数期、
9、稳定期和衰退期（1 1）迟缓期（）迟缓期（lag phaselag phase）A A 现现象象：1-4h1-4h，活活菌菌数数没没增增加加，曲线平行于横轴。曲线平行于横轴。B.B.原原因因：由由于于细细胞胞进进入入新新环环境境, ,细细胞胞数数目目无无增增长长，甚甚至至有有所所下下降降有有一一个个适适应应过过程程，进进行行大大量量的酶（诱导酶）的生成。的酶（诱导酶）的生成。 C.C.细细胞胞特特点点: :细细胞胞的的新新陈陈代代谢谢非非常常旺旺盛盛，个个体体体体积积显显著著增增大大，但但不不分分裂裂繁繁殖殖，为为细细胞胞分分裂裂作作准备。准备。D.D.此此期期长长短短：与与菌菌种种遗遗传传特
10、特性性、菌菌龄龄、接接种种量量、培培养养条件有关。条件有关。E.E.意义：意义：在实际工作中，缩短在实际工作中，缩短lag phase lag phase 的措施：的措施： 1 1）加大接种量（群体优势）加大接种量（群体优势-适应性增强）适应性增强） 2 2）先用对数期的种子（此时细胞分裂旺盛）先用对数期的种子（此时细胞分裂旺盛） 3 3）调调整整培培养养基基的的成成分分，使使种种子子基基含含有有发发酵酵培培养养基基的成分的成分 4 4）选用繁殖快的菌种）选用繁殖快的菌种（2 2）对数期）对数期(log phase)(log phase)1. 1. 现象：现象： 8-18h8-18h，又称指数
11、期，又称指数期，生长迅速，生长迅速，细胞数目以几何细胞数目以几何级数增加，其对数与时间呈级数增加，其对数与时间呈直线关系。直线关系。2.2.细胞特点：细胞特点：此时细胞的大小、此时细胞的大小、形态、染色性、形态、染色性、生理特征等生理特征等均趋于一致，代谢活跃，均趋于一致，代谢活跃，对对外界环境因素的作用敏感。外界环境因素的作用敏感。生长速率高，代时稳定。生长速率高，代时稳定。研研究细菌的性状时应选用该期究细菌的性状时应选用该期的细菌。的细菌。(3)(3)稳定期（稳定期（stationary phase):stationary phase):B.B.细胞特点细胞特点: : 有有害害物物增增加加
12、，死死亡亡数数增增加加，细细菌菌的的芽芽胞胞、外外毒毒素素和和抗抗生生素素等等代代谢谢产产物物在在此此期期产产生生，细细胞胞内内开开始始贮贮藏藏物物质质。稳稳定定期期细细胞胞数数目目及及产产物物积累达到最高。积累达到最高。A.A.现象：现象：活菌数目不增不减，生长速率活菌数目不增不减，生长速率趋于趋于0,0,曲线有一下降的趋势。曲线有一下降的趋势。（4 4）衰退期（）衰退期（death phase death phase ）A A 现象：现象：细细胞胞死死亡亡速速率率 生生长长速速率率。一一般般总菌数不变总菌数不变, ,活菌数曲线下降。活菌数曲线下降。B B 特点：特点：死死菌菌数数多多于于活活菌菌数数，菌菌体体变变形形，大大小小不不一一，细细胞胞出出现现自自溶溶, ,生生理理代代谢活动停滞。谢活动停滞。对数期对数期迟缓期迟缓期0515202530105.56.08.58.07.57.06.59.0衰退期衰退期总菌数总菌数活菌数活菌数细细菌菌数数的的对对数数小时小时稳定期稳定期
